C) RÉSULTATS ET CRITIQUE DE LA TECHNIQUE
a) détection du cholestérol libre et éthérifié.
Après le traitement par la digitonine une coupe de surrénale de cobaye normal, de quelques mois, présente, en dehors des cristaux aciculés d’éthers du cholestérol, des rosettes d’aiguilles bien localisées, biréfringentes, insolubles, stables vis-à-vis de la chaleur.
Le complexe avec la saponine et la gaiac-saponine est plus brillant. C’est, dans les deux cas. un agrégat d’aiguilles en épis très biréfringentes, moins finement localisées. Aucune preuve ne peut être faite sur la nature de ces aiguilles, à cause de l'instabilité du complexe. Aussi émettons-nous quelques réserves quant à l’emploi de ces saponines, bien que le résultat qu’elles donnent paraisse, au premier abord, plus brillant.
Surrénales du Cobayÿe. Coupes par congélation Microscope polarisant, nicols croisés. Microphotographies.
I. Coupe de surrénaie fraîche (Ethers du cholestérol). — II. Surrénale immergée 10 jours dans la solution alcoolique de digitonine (Etkers de cholestérol et complexe digitonine + cholestérol). — III. La même que fig. 2 et colorée au Soudan III (seul persiste le complexe cristallisé en rosette d’aiguilles). — IV. Surrénale immergée dans la solution alcoolique de saponine de Quillaya (agrandie : la zone médullaire est optiquement vide). — V. Surrénale immergée dans
la solution alcoolique de gaiac saponine.
NY PR That (he 2
à “A : WE © AU NU Ven D EP = ) L MA PR 1 4 ï :
hs DTA ET ne
dre
b) Répartition du cholestérol libre.
Nous avons vu que l’analyse chromatique, les réactions colorées, la méthode physique localisaient cholestérol et lipides dans la zone corticale. La méthode à la digitonine qui donne ses pleins résultats de détection du cholestérol libre lorsque les éthers sont masqués par un artifice quelconque, montre que le cholestérol libre paraît réparti de la même façon.
La surrénale de cobaye présente une abondance de rosettes d’aiguilles biréfringentes dans la corticale, tandis que la zone médullaire reste parfaitement obscure.
Mais la répartition dans la corticale n’est pas homogène; la zone glomérulaire est vide; tandis que la partie externe de la fasciculée est vraiment limitée par de nombreuses rosettes biréfringentes. Ces buissons d’aiguilles se font moins nombreux à mesure qu’on s'enfonce dans la corticale. La réticulée en est moins riche, et la zone réticulée interne fait une insensible transition par ses rares foyers lumineux avec la médullaire totalement obscure.
c) Critique de la méthode.
In vitro, la valeur de la précipitation n’était pas à discuter. Est-il permis d’accepter sans réserve les résultats lorsqu'il s’agit d’un tissu traité d’après la technique que nous préconisons ? Les erreurs possibles à la lecture de la coupe sont de deux ordres :
1°) confusion dans les cristaux biréfringents;
2°) précipitation incomplète ou nulle.
1°) Confusion. — Les substances capables de don-