‹ Contribution à l'étude biochimique des glandes surrénales de quelques mammifères: Étude comparée des zones corticale et médullaireChapitre 90 sur 142 · PS EE · texte numérisé non relu

PS EE

reprend le résidu par l’eau chaude acidulée par l'acide nitrique (Laupar [219]) qu’on transvase dans une ampoule à décantation ainsi que l’alcool éther qui a servi au lavage du ballon.

Les liquides sont épuisés à deux reprises par l’éther, et les solutions éthérées réunies sont lavées à l’eau, et après décantation évaporées au bain-marie. Le résidu contient le cholestérol total des 20 cc. de la prise d’essai.

c) Précipitation et pesée.

Dans les deux cas, cholestérol libre, ou total, on opère de la même façon. Le résidu de l’évaporation de léther est repris dans l’erlenmeyer par 25 cc. d'alcool absolu bouillant, On ajoute la solution de digitomine à 1 p. 100 dans l’alcool à 95 (on doit employer environ 4 à 5 fois plus de digitonine qu’il y a de cholestérol en solution, mais un trop grand excès est nuisible (CAMINADE |161]), et on maintient l’ébullition pendant deux minutes. Pour favoriser la précipitation il faut sortir l’erlenmeyer du bain-marie, et abaisser le titre de l’alcoo!l par addition de 1 à 2 cc. d’eau distillée. Dans l'alcool à 90°, le précipité se forme aussitôt, on l’abandonne à lui-même pendant 24 heures.

Au bout de ce temps, on filtre sur un filtre taré disposé sur un entonnoir à longue douille. Le précipité est lavé (1) deux fois avec 5 cc. d’eau bouillante,

(1) IL importe de ne pas utiliser un trop grand volume de solvants pour le lavage car le complexe n’est pas entièrement insoluble dans l’eau bouillante, l’éther (Muezzer [249]) l'alcool! fort (GARDNER ET WiLLiaMs [185]).

une fois avec 10 cc. de réactif de CAMINADE (acétone, alcool, eau) et une fois avec 5 cc. d’éther. Après séjour de 30 minutes à l’étuve à 100° et refroidissement dans un exsiccateur, le filtre et son contenu sont

pesés.

Le poids du précipité p’ permet de calculer facilement la teneur de la solution en cholestérol. 2:H#OH + C>5H°40°5S LLC CS2H1#20°° cholestérol digitonine complexe 386 1202 1588 d’où il ressort que p’ X 0,2431 donne le poids de cholestérol contenu dans les 20 cc. de la prise d’essai. Si V est le volume de la solution alcoolique correspondant à la prise d’essai p tout entière, V’ Le volume de la partie aliquote utilisée au dosage du cholestérol, la teneur pour 1000 gr. de tissu frais sera donnée par la formule :

p’ X 0,2431 X V X 1000 Cholestérol p. 1000 —

VD Cette méthode est élective. Sa précision la fait rechercher dans les dosages rigoureux. Elle présente cependant deux inconvénients : le coût élevé de la digitonine (qu’on peut d’ailleurs récupérer) et la longueur des manipulations qui s’oppose. à son utilisation en série.

AN

Repartition du Cholestérol libre et éthérifié dans les Capsules Surrénales de Mammifères.

(dosage pondéral)

SURRÉNALES DE MOUTON.

| Cholestérol pour 1000 | Rapports de tissu frais. L/T ED | Libre Ethérifié Total COrtUCale. INS.23 0.30 SE 92 8 médullaire. 5.91 0.41 6.32 93 7 | corticale. | 3.685 0.917 4.602 | 80 20 médullaire.| 5.01 0.096 5.106 98 2 SURRÉNALES DR CHÈVRE.

pr | Sortücale. | 2.58 0.49 3.07 84 16 médullaire. 5.30 0.08 5.38 98 2 | corticale. 3.60 0.18 3.10 95 5 médullaire.| 5.54 0.44 5.98 92 8 IV corticale. 3 0.37 SO 89 il) médullaire.| 4.78 (NE! 4.89 97 SURRÉNALES DE BŒUF.

corticale. | 3.98 0.01 3.99 99 1 médullaire.| 5.59 0.30 5.89 94 6 III corticale. 4.04 0.20 4.24 95.3 4,7 méduilaire.| 4.86 0.42 5.28 92 8

SURRÉNALES DE VEAU.

Cholestérol pour 1000 Rapports de tissu frais. L/T Et Libre Ethérifié Total

I corticale. 3.01 0.49 3.90 86 14

médullaire.| 4.11 0.52 4,63 89 11

V corticale. 2.84 0.54 3.38 84 16

médullaire.| 4.13 0.61 4.74 87 13

VI corticale. 3.38 1.07 4,45 76 24

médullaire.| 4.99 0.28 52 94 6 SURRÉNALES DE CHEVAL.

HI coriicale. 4.94 28:500033:00 15 89

D ullairel 04 SC Reda 29 78

corticale. 4,23 13.17 17.40 24 716

méduilaire.| 5.54 7.66 13.20 2) 58

I corticale. 5.18 16.22 21.40 24 76

VT | médullaire.| 5.05 1180262 81 19

HAcorticales 0834 12100018 021 67

IV = | médullaire.| 5.87 3.30 9.17 64 36 SURRÉNALES DE PORC.

corticale. 2.76 5.66 8.4 32 68

médullaire.| 4.06 3.59 7.65 53 47

[II corticale. 4,73 2,45 7.18 65 39

médullaire.| 4.83 Jai 6.04 80 20

CS Des

IT. Dosages du phosphore total et du phosphore lipidique.

Dans la glande surrénale, le phosphore peut se rencontrer, comme par ailleurs dans d’autres organes, sous différentes formes étudiées et précisées par Ja- VILLIER et ses collaborateurs [204]. Il y a : d’abord le phosphore minéral dont la détermination exacte paraît très délicate, sinon impossible à cause de la fragilité des autres formes qui, en libèrent sous les moindres influences; ensuite le phosphore appartenant aux phosphatides; enfin le phosphore nucléique dont le dosage a été tenté par JAVILLIER et ALLAIRE 201]. Il resterait une forme phosphorée organique d'existence probable, mais indéterminée, et l’on peut

schématiser ces faits de la façon suivante :

P total — P lipidique + P nucléique + P indéterminé PORT D I P inconnu + P minéral

Nous n’avons effectué que le dosage du phosphore total et du phosphore des lipides, écartant la détermination du phosphore nucléique. La méthode de JAVILLIER utilisée par JAVILLIER et ALLAIRE [201] pour doser le phosphore nucléique de la surrénale entière, a le mérite d’atteindre directement le phosphore des nucléines. Malheureusement elle paraît manquer encore quelque peu de certitude comme il ressort des critiques de PosTERNAK [262] et comme JAVILLIER

[200] lui-même Pa reconnu.

Pour doser correctement le phosphore lipidique il

faut extraire tous les lipides à l’exclusion de toute

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