CHAPITRE XIII L

MIGRATION PENDANT LA GERMINATION DES GRAINES ET LA FORMATION DES PLANTULES

Connaissant en partie les résultats obtenus par les auteurs sur ce sujet, nous avons voulu savoir si les graines de lupin, au moment de leur germination, donnaient des plantules plus riches qu’elles-mêmes en alcaloïdes (teneur rapportée à l'unité d’organe) ou si elles perdaient de leurs alcaloïdes et ce qu'ils devenaient :

«) Dans des expériences préliminaires effectuées en 1926-1928, nous avons constaté que l’eau dans laquelle les graines avaient été mises à macérer avant d'être semées, renfermait après trois jours des quantités d'alcaloïdes (1) loin d'être négligeables: 0 mg. 20 par graine.

Si, en expérimentant sur des graines ayant perdu leur pouvoir germinatif (graines de la récolte 1923), on poussait l’expérience pendant un temps de macération beaucoup plus long : 10 jours, 20 jours, 30 jours (2), nous allons constater le passage dans l’eau ordinaire d’une forte proportion d’alcaloïdes qui, après 10 jours de macération, était sensiblement égale à celle qui restait dans les graines (0 mg. 830 par graine dans l’eau de

1. Si la macération est effectuée dans de l’eau légèrement acidulée par So4H? (V gouttes pour 200 c$), les proportions augmentent quotidiennement et nous trouvons o mg. 13 après 24 h. ; o mg. 26 après 48 h. et o mg. 30 après 72 heures. :

2. La macération avait lieu en milieu stérile (récipients et liquides stérilisés) ; les graines avaient été préalablement stérilisées à la surface par un séjour de 5 heures dans de l’eau oxygénée.

macération contre O0 mg. 925 restant dans la graine) ; elle est très supérieure à cette dernière après 20 jours : 4 mg. 06 contre 0 mg. 67 et a fortiori après 30 jours : 1 m. 28 contre O0 m. 58 (1).

8) Nos expériences, 1929, sur la germination des graines : {re Série a) Principe ; rechercher si au cours de la germination à la lumière :

4. il y a diminution ou augmentation des alcaloïdes dans les plantules.

2. dans le cas où il y aurait diminution, rechercher s’il y a dégagement à l'état gazeux de l’alcaloïde volatil (voir expériences de Cramicran, 1922) ou d’un produit de sa désagrégation : l’ammoniaque (voir expériences de Wezvers, 1929).

a) Technique opératoire : 30 gr. de graines (150) sont mises à germer sur du coton humide et sous un entonnoir dont les parois sont imbibées de So‘H? à 1/20 et en présence d'un cristallisoir en verre renfermant le même acide dilué. Après deux jours toutes les graines ont germé et se sont bien développées dans cette atmosphère close. Durée de l'expérience 6 jours, nos plantules avaient O0 m. 05 de longueur au maximum.

b) Résultats : a) les parois de l’entonnoir furent rincés avec de l’eau distillée pour entraîner l'acide.

«) Recherche des alcaloïdes à l’aide du Réactif de Bouchardat dans l’eau acidulée de rinçage et dans l’acide du cristallisoir après neutralisation : absence.

8) Recherche de l’ammoniaque dans les mêmes liqueurs, à l’aide du Réactif de Nesszer (après neutralisation) : coloration jaunâtre.

R. — L’acide sulfurique employé fut examiné au point de vue de sa teneur possible en ammoniaque : absence.

Contre-épreuve : une expérience semblable (même durée) fut effectuée avec 30 gr. de graines de Lathyrus cicera (gesse jarosse) espèce dans laquelle nous avions constaté l'absence d’ai-

1. Avec l’eau acidulée nous trouvons 0 mg. go contre o mg. 77 dès le 10° jour.

caloïdes (54) : les liqueurs acides neutralisées ne donnèrent aucune trace de coloration avec le Réactif de Nesscer.

b) Détermination de la teneur en alcaloïdes : O0 gr. 195 pour 100 plantules contre 0 gr. 252 dans 100 graines.

c) Détermination de l'azote protéique : 0 gr. 990 pour 100 plantules contre 1,44 dans 100 graines.

Il y a donc, à la lumière, diminution à la fois en alcaloïdes et en azote protéique dans les plantules par rapport aux graines.

2e Série : Mais il était intéressant de connaître si, avec des plantules plus âgées, les faits se passaient de la même façon : pour cela, dans une seconde série d'expériences, nous avons fait germer des graines sous cloche, dans des conditions différentes d'éclairement (à la lumière et à l’obscurité) et, quand les plantules eurent aiteint une certaine hauteur nous avons effectué les dosages comparatifs. Au cours de la germination, l'air de la cloche était aspirée dans un liquide acide permettant de doser l’alcaloïde ou l’ammoniaque pouvant être entraînés.

Mode opératoire : des lots de 50 gr. de graines (150) préalablement stérilisées à la surface dans de l’eau oxygénée, sont mis à germer sur du coton humide dans des crislallisoirs recouverts de cloche à double tubulure : quatre lots sont placés dans une pièce bien éclairée, un cinquième à l’obscurité. Nous avons adapté aux deux tubulures de chaque cloche une série de flacons laveurs : côté gauche (entrée de l'air) un premier flacon contenant de l'acide dilué pour arrêter l'ammoniaque atmosphérique, et un deuxième flacon contenant de la soude diluée pour débarrasser l'air aspiré des vapeurs acides ; côté droit (aspiration) un troisième flacon renfermant V® d'eau distillée additionnée de IIT gouttes de solution d’orangé et SO#H°N/10 q. s. pour faire virer le liquide au rouge ; un quatrième flacon, dit de sûreté, renfermait de l'acide dilué.

Tous les jours à partir de la germination, nous avons aspiré à l’aide d’une trompe à eau l’air de la cloche de façon à recueillir dans le flacon n° 3 l’alcaloïde volatil ou l’ammoniaque qui auraient pu se dégager.

Résultats : 19 à l’obscurité : a) recherche de l’alcaloïde et de l’ammoniaque : absence.

b) 1. dosage des alcaloïdes : 0 gr. 316 pour 100 plantules contre 0 gr.212 dans 100 graines.

2. Azote protéique : 0 gr. 900 pour 100 plantules contre 4 gr. 44 dans 100 graines. Donc augmentation des alcaloïdes dans les plantules par rapport à la graine et diminution des protéiques. |

29 à la lumière : a) recherche de l’alcaloïde : absence. b) recherche de l’ammoniaque : présence : titrage après mise en liberté par de la soude et entrainement par de la vapeur d’eau dans V® de SO2H? N/10 : 1 mgr. 8 pour II (1) correspondant à 0 gr. 011 d’alcaloïdes (spartéine) pour 100 plantules ; 4 mgr. pour IIT (2) correspondant à O0 gr. 0276 d’alcaloïdes. c) les teneurs en alcaloïdes et en azote protéique sont consignées dans le tableau suivant que nous pouvons interpréter ainsi:

1. quand les plantules sont encore jeunes (hauteur O0 m. 05- 0 m. 10), la proportion d’alcaloïdes pour 100 unités est inférieure à celle contenue dans les graines, mais elle augmente sensiblement ; 2. dans les plantules plus âgées la proportion d’alcaloïdes dépasse celle de la graine et continue de s’accroître.

Ainsi donc, la teneur en alcaloïdes dans les plantules, suivant l'âge, est inférieure ou supérieure à celle de la graine, alors qu’à l’obscurité nous trouvons dans les plantules jeunes une teneur supérieure. Qu'est devenue la petite quantité d’alcaloïdes qui, à la lumière, a disparu au début de la germination? A-t-elle été transformée en matière protéique ou décomposée ?

Nous constatons que la proportion d'azote protéique a diminué dans les plantules à la lumière comme à l'obscurité. Donc il semble que l'alcaloïde n'intervienne pas dans la protéogénèse. Par contre, nous avons observé un dégagement d’ammoniaque à la lumière, faible il est vrai, mais non négligeable, et que nous n'avons pu constater à l'obscurité (ni à la lumière avec des plantes sans alcaloïdes).