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voir antiseptique du sublimé. Ainsi, tandis que le sublimé en solution aqueuse empêche, à la dose de 4o milligrammes par htre de bouillon, le bacille pyocyanogien de se multiplier, et supprime, à la dose de 30 milligrammes, sa fonction chromogène : 1l suffit, quand on ajoute 10 centimètres cubes d'alcool éthylique par litre d'une dose de 6 milligrammes pour arrêter le développement du bacille et de 2 milligrammes pour supprimer sa fonction chromogène. “

Est-ce à dire qu'il n'y ait pas quelquefois intérêt à tenter la détermination du coefficient antiseptique d’une substance dissoute dans un véhicule autre que l'eau ? Assurément non. Il est clair en effet que toutes les fois qu'on se proposera de rechercher, non pas le coefficient anliseptique absolu d'une substance, mais seulement la valeur de ce coefficient comparé à celui de telle autre substance prise dans les mémes conditions, cette méthode pourra être employée. Mais on ne devra pas perdre de vue que de pareilles déterminations présentent surtout un intérêt théorique. On verra par ce qui va suivre que les recherches expérimentales que j'ai entreprises ont été poursuivies avec le souci constant de m'écarter le moins possible des données générales que Je viens de développer.

II. — Expériences relatives à la détermination du pouvoir anti- 4 tique de l’Homocréosol.

Dans une première expérience, en quelque sorte pré-

liminaire, Jai préparé deux milieux de culture ayant

ad même composition au point de vue de la teneur en éléments nutritifs, mais préparés, l’un avec de l'eau distillée pure, l'autre avec de l'eau distillée tenant en dissolution un millième d'homocréosol.

La composition de ces milieux était la suivante :

Haubdishiléel Miro NC TRE AST GG cc PÉDÉOME RNA à M NA nr MN re A 3 grammes A. ‘ ) Chlorure dé SOU MAIRE NRRREE I — \MPhosphate dersouder 1" NEA O,O1

Eau distillée homocréosolée à 1 p. 1000. 100 ce

B. Poplône sur CRM. NUL 3 grammes Chlorure de:sodiuni NE TE EN I = Phosphate de soude. 1.) : 2. O,0I

Ces deux liquides nutritifs ont une réaction légèrement acide, de même intensité, assez faible d'alleurs pour ne pas entraver le développement des bactéries.

Ces milieux sont répartis dans de petits matras Pasteur préalablement stérilisés au four à flamber et portés à l'autoclave pendant 20 minutes à la température de 130°. On a mis dans chaque matras 10 centimètres cubes de liquide et on préparé deux séries de 5 matras.

Série À, — Deux des matras de cette série sont conservés comme témoins. Dans les trois autres on ensemence une goutte d'un bouillon de culture de bactéries banales rencontrées dans une eau analysée au laboratoire et en plein développement. Au bout de vingt-quatre heures. les deux ballons témoins sont encore stériles : les trois autres cultivent normalement. Au bout de quarante-

huit heures. les deux témoins sont encore demeurés sté-

ir ee

riles : les trois autres cultivent abondamment. On conclut tout d'abord de ces résuliats que la culture, à laquelle on s'était adressé pour faire ces ensemencements, était bien vivante etqu'elle pouvait servir à ensemencer la série B. On répèle avec celte série B les expériences précédentes, c'est-à-dire qu'on conserve deux ballons témoins et qu'on ensemence les trois autres avec une goutte de la même culture de bactéries banales. Après vingt-quatre heures aucun des ballons n'a encore cultivé : plusieurs jours après ils sont encore stériles.

Cette première série d'opérations était simplement destinée à me donner une idée très approximative du pouvoir antiseptique de la substance.

Les résultats que je viens d'exposer étaient pourtant déjà encourageants. J'entrepris alors une deuxième série d'expériences beaucoup plus précises, beaucoup plus variées, beaucoup plus instructives aussi, comme on le verra, que celles de la première série. Ce sont ces opéralions que Je vais maintenant décrire, me réservant d'alleurs de les réunir plus loin dans un tableau d'ensemble. de façon à les rendre plus saisissables.

Le 24 avril, je prends 24 matras Pasteur préalablement stériisés et dans chacun desquels j'introduis 10 centimètres cubes de bouillon ordinaire. Je répartis ces 2/4 matras

en six séries de la facon suivante :

ire Série :

Ballon témoin «.

Ballon Ent "avec RER UENNEN 7 EME ENAONEE TEE 1 p. 1000 d'homocréesol

Ballon: no 6e be Een NE Re aa ee 2 2= ee BALONEA RS ER Rem SRE PET GS EME EN RD ER ER =

MR AR 2e Série :

Ballon témoin #.

Ballon noalavee ess Me LAN UE EE I ee = Ballon noer ae CE ARE NES ERA CRE ne BAUON TB NM ERREURS MAPS Re EE Et TA NS 7

3e Série :

Ballon témoin c.

Palo TA Ve Cr REMOTE EME due RU NES 1 Le ——

Pallonino se rare Eee rer ANIME TN CU 2 =

BALLON ROLE SEEN ES LUE SAS RENE LE se CRE ECTS RS ES br Le série :

Ballon témoin d.

Ballon nee Re EU ENS Er aq 1 = BAHONENOPO ARE D NARNIA TNEE D'PRIES ne RAC DEAD SEE RS SES LR AT RS US PR RO do =

5e Série :

Ballon témoin e.

Ballon no ED NES NE ERA IE I __ == Ballon MO ANTENNES CARRE ea RES QUE LE BANC DR EEE PS TRUE SEE AR EAUENC ARE EUR HORS

6e sérue :

Ballon témoin f.

Po nier 020 en A ATEN T AE ere er PE BAMOENO MI TN MTS AL CNP M RU La t AAS a NEC DENE 2 Ds

BANOn AR MR CRAN Cour ETATS LATE SNS MEPARSE —

Dans chacun des matras de la première série J'ensemence une goutte d'un bouillon de culture de charbon datant du 22 avril et obtenue avec le sang du cœur d'un cobaye venant de succomber à une injechon de charbon symplomatique faite 48 heures auparavant.

Dans chacun des matras de la deuxième série Fensemence une goutte d'un bouillon de culture de staphylo-

coque datant aussi du 1° avril.

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Dans la troisième série J’ensemence du pyocyanique datant du 1% avril.

Dans la quatrième du subtilis récent: dans la einquième du bacterium coli, et dans la sixième du typhique égalements récents.

Résultats. — Série n° 1 (charbon). — Après vingtquatre heures, le bouillon témoin à abondamment cultivé. Aucun desautres n'a rien donné. On en conclut quele charbon ne cultive pas dans un bouillon contenant 1 pour 1000 d'homocréosol. Il restera à rechercher la dose minima (plus petite que 1 pour 1000) capable d'empêcher son développement.

Série n° ? (staphylocoque). — Le bouillon témoin a abondamment cultivé. Le bouillon n° 2 (1 pour 1000) a également cultivé: les autres sont demeurés stériles. La dose minima est donc comprise entre Tr et 2.

Série n° 3 (pyocyanique). — Le bouillon témoin a culuvé. Le bouillon à r pour 1000 a également cultivé. mais la fonction chromogène paraît supprimée. La dose minima est comprise entre I el 2 pour 1000.

Série n° /(subülis). — Le bouillon témoin et le bouillon à 1 pour 1000 ont cultivé. Les autres sont demeurés stériles. Mêmes conclusions que précédemment.

Série n° 5(B. cohi). — Le bouillon témoin a abondamment culivé. Le bouillon à 1 pour 1000 a aussi cultivé, faiblement après 24 heures. plus abondamment après 48 heures. Conclusions : une dose de 1 pour 1000 d'homocréosol retarde le développement du B. coli mais ne l'empêche pas. Il y aura lieu de rechercher la dose

mortelle.

eg Série n° 6 (typhique). — Le bouillon témoin et le bouillon à 1 pour 1000 ont cultivé: les autres n'ont rien donné. Comme pour le B. coli, il y a eu du retard dans le développement de la culture qui n'est devenue vraiment évidente qu'après 48 heures.

En résumé, les expériences précédentes démontrent que dans le bouillon homocréosolé à 1 pour 1000, le charbon ne pousse pas : que dans un bouillon au même tre le pyocyanique pousse, mais que sa fonction chromogène est tout au moins suspendue: enfin que celte même dose de 1 pour 1000 ne s'oppose pas au développement du staphylocoque, du B. coli. du subtülis et du typhique. |

Ces expériences montraient en même temps qu aucun des microbes ci-dessus ne pousse dans un bouillon homocréosolé à 2 pour 1000. Dans tous les cas 1l restait à déterminer les doses minima capables de s'opposer au développement des divers microbes que nous venons d'énumérer. Nous indiquerons dans un instant les résultats auxquels nous ont conduit les expériences relaüives à la recherche de ces doses minima.

Mais une autre question fort intéressante se posait aussi, à savoir si aux doses que j'ai indiquées conime capables de s'opposer au développement des microbes ensemensés, ces microbes étaient définitivement tués ou si au contraire ils étaient seulement en état de vie ralentie. Pour résoudre le problème 1l était nécessaire de retransplanter ces microbes dans un nulieu normal, c'està-dire ne contenant pas de produit antiseptique. Ma première expérience a porté sur le charbon. Après 48

Ricuaup. 3

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heures le passage du charbon a légèrement cultivé. Après 72 heures la culture est plus intense.

Cette expérience est intéressante. Elle nous montre que la dose de 1 pour 1000 est plus que suffisante pour empêcher le développement du microbe, mais qu'elle est insuffisante pour tuer la spore charbonneuse : elle nous montre qu'à cette dose la spore entre seulement en état de vie ralentie, mais qu'il suffira de la transplanter sur un milieu normal pour la voir devenir le point de départ d’une nouvelle génération de bactéridies. Elle confirme en somme ce que l'on sait de la résistance extraordinaire de cette spore.

Enfin, un autre point était encore à élucider, celui de savoir si la nouvelle génération de bactéridies, née de spores ayant subi pendant plusieurs jours l’action nocive de l'antiseptique. possédait une virulence normale ou si, au contraire, cette virulence avait été atténuée. Pour éclairer ce point: J'ai fait à un cobaye une injection intrapéritonéale avec un quart de centimètre cube de la culture dont je viens de parler. L'animal mourut au bout de 48 heures. Les passages faits avec les bouillons contenant 2 pour 1000 d'homocréosol et où les autres microbes sur lesquels J'ai expérimenté n'avaient pas pu se développer, sont demeurés stériles.

En définitive, les expériences que Je viens de rapporter montrent que la dose de 0 pour 1000, non seulement empêche d'une façon absolue le développement de ces microbes mais quelle les tue. De plus, l'expérience relative au charbon montre que la dose de 1 pour 1000 est suflisante pour arrêter le dé eloppement de ce

muicrobe, mais qu'elle ne suffit pas pour le tuer.

Je devrais donc rechercher cette dose. Pour cela, j'ai ensemencé une goutte d'une cultnre de charbon datant de quelques jours dans 10 centimètres cubes de bouillon ordinaire. Après 48 heures, la nouvelle culture était en plein développement. Je l'ai alors additionnée d’une goutte d'homocréosol, quantité qui correspond à très peu près à 2 pour 1000 (1).

J'ai abandonné cette culture à elle-même pendant 24 heures à la température ordinaire. Au bout de ce temps jai fait un passage dans 10 centimètres cubes de bouillon ordinaire. Après 24 heures, la culture était déjà apparente : après 48 heures elle était abondante.

J'ai répété la même expérience en ajoutant deux gouttes d'homocréosol. Cette dose se montre encore insuflisante pour enlever à la spore son pouvoir germinatif. Toutelois on observe que le pouvoir germinalif se manifeste déjà un peu plus tard que dans l'expérience précédente.

infin, une troisième expérience est faite après addition de trois gouttes d’homocréosol. Celle fois, le nouvel ensemencement ne donne aucun résultat. On en peut conclure que la quantité d'antiseplique nécessaire pour enlever définitivement à la spore charbonneuse son pouvoir germinatif est compris entre 4 el 6

pour 1000.

(1) Pour toules ces expériences, en effet, je me suis constamment servi du même compte-goutles. Cet instrument donnait 45 gouttes au gramme

d’'homocréosol.

III. — Détermination des doses minima d’antiseptique nécessaires pour empêcher la germination.

Les recherches que J'ai exposées plus haut ont simplement montré que la dose de 1 pour 1000 empêchait le développement du charbon et que dose de 2 pour 1000 empêchait celle des autres microbes sur lesquels ont porté ces recherches.

Ces résultats étaient naturellement insuffisants: etil y avait lieu de rechercher pour chacun de ces microbes la dose minima susceptible de produire le même effet. Ce sont ces expériences que je vais maintenant rapporter.

1° Charbon. — Je prépare deux bouillons a et b contenant, l’un (a) 0.75 pour 1000 d'homocréosol. l'autre (b) 0,85 pour 1000. Dans chacun d'eux j'ensemence deux gouttes d’une culture de charbon et je place les deux matras à l'étuve à 37°. Après 24 heures. le bouillon (a) a cultivé: le bouillon (b) est demeuré slérile et est encore stérile après plusieurs jours. J'en conclus que la dose minima que je cherchais à détermineresicomprise entre 0,7 e10,85 pour 1000. J'aurais pu essayer de déterminer plus exactement encore cette dose minima. Je ne lai pas fait parce que je ne crois pas qu'on puisse demander aux expériences du genre de celles que je rapporte une précision absolument mathémathique.

En suivant la même méthode Ja trouvé que les

doses minima pour les autres microbes étaient comprises entre ‘ Staphylocoque.

1,25 et 1,50 pour. { Typhique.

Subtilis.

1,950 et 1,75 pour.. B. Coli.

1,79 et 2 pour.. Pyocyanique.