CHR 0: H,O OH

oH — FT OMS + C;H120;

Afin de constater si l’action antibiotique attribuée à la feuille de Bergenia est comparable à l’action désinfectante de l’Hydroquinone, nous avons effectué les expériences suivantes. D’une part, nous avons placé à l’étuve une série de tubes avec des dilutions de jus ajoutées au bouillon; d'autre part, nous avons préparé une série avec de l’Hydroquinone synthétique, introduite dans le bouillon. Les concentrations en Hydroquinone de cette série correspondaient aux quantités d’Hydroquinone provenant de la dégradation de l’Arbutine du jus.

Poids moléculaire de l’Arbutine ........ 27219 Poids moléculaire de l’'Hydroquinone .. 110,05 Etant donné que 1 cc. de jus de feuilles contient 0,13 gr. d’Arbutine, la quantité suivante d’Hydroquinone doit se former dans 1 cc. de jus:

212,130: MO25Æ= 0 AS, sr HVasoquinone Quantité d'Hydroquinone de 1 cc: jus — 0,052 gr. La disposition et les résultats de cette expérience sont

démontrés dans les tableaux suivants:

Série d’essai avec le jus.

Série d’essai avec de l’Hydroquinone synthétique. mm mm mn me

Ces expériences démontrent que l’Hydroquinone n’est pas l’élément unique qui cause l’action antibiotique du jus. Car, si nous comparons les résultats des deux séries de dilutions, nous voyons que le jus a une action bactéricide nette même à une dilution de 1:1600, tandis que dans les: mêmes conditions expérimentales l’action bactéricide dé l’'Hydroquinone chimiquement pure s’arrête déjà à une con-: centration de 0,00052 gr. dans 5 cc. de bouillon, ce qui cor-" respond à peu près à une dilution de jus à 1:500. Le jus et l’Hydroquinone pure donnent des résultats fortement divergents, non seulement en ce qui concerne la concentration active, mais aussi leur mode d’action.

L’Hydroquinone intervient comme un désinfectant. Elle tue les bactéries après une période d’action très courte. Le bouillon contenant des dilutions d’Hydroquinone encore efficaces n’était nullement opalescent. Dans les tubes où l’Hydroquinone n’agissait plus, le trouble était comparable à celui du témoin; nous ne voyons aucune transition entre les tubes limpides et ceux fortement troublés. Par contre dans la série d’essais avec les dilutions de jus, nous constatons, même dans les tubes avec des concentrations relativement fortes, au début une certaine croissance des bactéries. Tous les tubes sont légèrement opalescents et le degré d’opacité augmente dans la même proportion que la teneur en jus diminue. Toutefois, en repiquant les milieux, on peut démontrer que malgré l’aspect floconneux les bactéries ont été tuées jusqu’à une dilution de 1 :1600. L'action inhibitrice, bactéricide du jus ne se révèle que peu à peu, tandis que celle de l’Hydroquinone se déclenche rapidement sans période d’incubation. Nous voyons ici l’action d’un Antibiotique et celle d’un désinfectant opposées l’une à l’autre d’une facon très claire et évidente.

A un point de vue, les deux séries d'expérience ont une analogie frappante: disposés à l’étuve, les milieux prennent

ASE =

dans les deux cas une couleur rouge bordeau-foncé. Ce fait s'explique par l'oxydation de l’'Hydroquinone qui se transforme en Oxy-hydroquinone.

Nous nous sommes ensuite demandé si éventuellement l'Hydroquinone naissante à partir de l’Arbutine décomposée agit différemment sur le Staphylocoque que l’'Hydroquinone synthétique. Pour élucider ce problème, nous avons essayé de décomposer enzymatiquement de l’Arbuline pure par voie biologique pour réaliser la formation d’Hydroquinone naissante.

Nous savons que l’Arbutine n’est pas seulement dédoublée par le ferment spécifique l’Arbutinase. D’après BAMANN et MyrBÆCxk (24), l’Arbutine est également décomposée par la Tannase, un ferment beaucoup moins spécifique. Tous les esters chez lesquels le groupement acide contient au minimum deux groupements OH phénoliques et dont le groupement carboxylique estéré est fixé directement sur le novau benzénique oxydé (et non pas en position ortho par rapport à un groupement hydroxyle phénolique), sont décomposés selon DYCKFRHOFrF (25) par la T'annase. Celle-ci décompose aussi le Sucre de canne, le Maltose, l’'Amidon et les Glycosides tels que l’Arbutine.

De nos jours, la T'annase est obtenue essentiellement à partir du Sterigmatocystis nigra. Ce champignon fournit des quantités considérables de Tannase, s’il croît sur un substrat contenant un T'annin hydrolysable par celle-ci.

Comme nous n’avons pas pu trouver la J'annase dans le commerce, nous l’avons préparé par la culture à partir du Sterigmatocystis nigra, d’après les indications de BAMANN et MYRBÆCK.

Sur un milieu de SABOURAUD (28) à 10% d’Arbutine, nous avons cultivé le Sterigmatocystis nigra. Après deux journées à l’étuve à 25°, un mvcélium blanc s’est formé dans la boîte de PÉrRI. D’après les indications des auteurs précités, c’est à ce stade que le rendement de T'annase est le meilleur. Nous avons donc tué le champignon en introduisant dans la boîte de PÉTRI un tampon de coton imbibé de Toluène que l’on fait agir pendant 24 heures.

Nous avons vérifié la stérilité de la culture en repiquant un prélèvement du mycélium sur un nouveau milieu, placé ensuite à la température optimum.

Selon les indications de l’auteur susmentionné, il n’est pas nécessaire pour la plupart des cas d’isoler la Tannase à l’état pur, puisque le mycélium même peut servir comme substrat enzymatique. Mais enfin pour que la Tannase puisse agir, les parois cellulaires du mycélium de champignon doivent être détruites. Il faut donc réaliser une cytolyse pour