‹ Contribution à l'Étude d'un Milieu de Culture à Base de Protéolysat: Recherche et Dosage Microbiologique des Principaux Facteurs de CroissanceChapitre 21 sur 45 · ET EE · texte numérisé non relu

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c’est-à-dire: gamme contenant des concentrations croissantes de Vitamine à l’aide de doses différentes de la solutionétalon et, ensuite, série de dilutions croissantes de Protéolysat à 2%; 4° Stérilisation des séries de tubes prêts à l’ensemencement;

5° Préparation de la suspension microbienne;

6° Ensemencement des tubes à l’aide de cette suspen- Sion ;

7° Incubation et lecture des résultats.

Nous suivrons cet ordre dans l'exposé concernant chaque Vilamine étudiée ultérieurement.

La méthode de SNELL et WRIGHT utilise comme organisme-test: Lactobacillus arabinosus 17-5, dont la croissance, proportionnelle, dans certaines concentrations, à l’addition de Pantothénate au milieu de base, peut être mesurée par turbidimétrie ou acidimétrie.

1° Préparation du milieu de base.

Le milieu de base de cette méthode, indiqué par SNELL et WRIGHT, est constitué comme suit:

Hydrolysat de Caséine, Tryptophane, Cystine, Adénine, Guanine, Uracile, Thiamine, Pyridoxine, Riboflavine, Biotine, Glucose, chacun de ces éléments en quantité déterminée.

Il renferme, en outre, des sels minéraux tels que: Chlorures, Phosphates, Sulfates de K, Fe, Meg et Mn.

Notre Maître M. J. MEYER ayant mis obligeamment à notre disposition des milieux américains, préparés par les Laboraloires Difco, ce travail en fut grandement facilité.

Un de ces milieux, intitulé «Bacto-Pantothénate - Assay- Médium» spécialement préparé en vue du dosage de lAcide pantothénique, répond sensiblement à la formule indiquée par les auteurs de la méthode: c’est celui décrit par SNELL et WRIGHT, légèrement modifié.

Il a l'aspect d’une poudre jaune, de teinte non homogène, très hygroscopique, d’où la nécessité de conserver ce produit en flacons hermétiquement bouchés et à Pabri de l'humidité; c’est, en effet, un milieu complètement déshydraté et totalement dépourvu d’Acide pantothénique et de Pantothénale, bien que renfermant tous les autres facteurs nécessaires à la croissance du Lactobacillus arabinosus 17-5.

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