NT CARE

téolysat (indice d’un taux important de Biotine dans ce dernier milieu), nous avons alors réalisé une solution étalon de Biotine à 10 y par litre, soit 0,01 y par cc.

Préparation de l’émulsion bactérienne.

Nous avions conservé la souche de Lactobacillus casei sur le milieu américain intitulé <Bacto-Micro-Assay-Culture- Agar», milieu préparé par les Laboratoires Difco, et dont nous avons donné quelques caractéristiques lors du titrage du Pantothénate de Calcium.

C’est à partir de cette souche que nous avons ensemencé un tube de 10 cc. de bouillon <Bacto-Micro-Inoculum», que nous avons fait cultiver à 37°, pendant les 24 heures précédant l’ensemencement des séries d’essais. Nous avons alors centrifugé aseptiquement cette culture; puis, après décantation du liquide surnageant, nous avons remis le dépôt bactérien en suspension dans du soluté physiologique isotonique stérile, et, dilué cette suspension jusqu’à obtention d’un trouble convenable. L’émulsion bactérienne est alors prête pour l’ensemencement des gammes.

Mode opératoire.

Nous avons fait de nombreux essais, opérant de la même façon que pour les autres titrages, c’est-à-dire, qu'après avoir réparti dans chaque tube 5 cc. de milieu de base, nous ajoutions les doses variables de solution étalon de Biotine ou les dilutions différentes de Protéolysat, amenant en dernier lieu le volume final à 10 cc. à l’aide d’eau distillée.

Nous avons été obligée de faire des essais avec des échantillons de Protéolysat très dilués, obtenant toujours un trouble trop important et difficile à évaluer exactement.

Bref, dans un essai définitif, après bien des tâtonnements, nous avons pu établir que: la valeur du trouble dû à la croissance, en rapport avec la quantité de Biotine présente, était la même dans le tube contenant 1 ce. de Protéolysat dilué au 1/500, que dans celui où nous avions introduit 5 cc. de solution-étalon de Biotine à 10 Y par litre (soit à 0,01 y par cc.).

Donc 1 cc. Protéolysat à 1/500 renferme 0,05 y de Bio- Une; 1 ce. de Protéolysat à 1/5 renferme 5 Y:;

et 1 cc. de Protéolysat pur à 2% renferme 25 y de Bioline.