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l'intensité de la coagulation. Les résultats donnés par ces courbes ont été confirmés par la culture de ces 4 souches sur le milieu suivant :

Glucose : 3 gr.

Urée : 0 gr. 2

Gélatine : 7 gr. 5.

“Eau : 100 cc.

milieu spécifique préparé pour la caractérisation de la gélatinase: là encore la vitesse et la quantité de produit liquéfié nous ont donné par culture de l’organisme à la température de +209 des résultats analogues à ceux que nous avons signalés pour la présure. (Fig. 22).

Caséase. — Nous avons employé comme milieu spécifique d’excitation, celui qui a déjà été cité pour la chymosine, mais ici nous avons cultivé les 4 souches pendant un mois sur ce milieu; la technique a été la même en ce qui concerne la préparation du liquide diastasique. Le pouvoir diastasique a été mesuré par des dosages pondéraux de la façon suivante : noùs avons préparé des tubes larges renfermant les produits suivants :

Caséine pure en poudre : 1 gr. (exactement pesé) Acide acétique : à A Acétate de sodium : O gr. OI

Eau : 5 cc.

Le mélange d’acide acétique et d’acétate de sodium constitue un amortisseur des variations de réaction, c’est ce que FERNBACH et HUBERT appellent un tampon (1). En outre l’acide acétique empêche toute digestion occasionnée par un facteur différent. Le tout est stérilisé à l’autoclave à 1100 pendant 20 minutes; à ce mélange nous ajoutons après refroidissement 5 cc. de liquide diastasique des souches : T O, R O,T Na Ci, R Na C1. Des tubes contenant du liquide diastasique, chauffés à 1209, servent de témoins.

On place les séries de tubes au bain marie à 40° et les dosages sont effectués après 12, 24 et 48 heures; après ces temps le mélange est filtré à travers des filtres équilibrés d’avance, lavé à l’eau distillée stérilisée et séché à l’étuve; les pesées sont alors effectuées. La caséine digérée est donnée par la différence entre la caséine introduite dans les tubes (ici x gr.) et la caséine restante.

. Nous exprimons quelques résultats obtenus dans le tableau suivant :

Après 12 ‘heures Après 24 heures TO = T£gr. — 0,979 + 0,027 TO —=1gr. —0,889= 0,111 RO = 71gr. —0,981 =0,019 . RO-— 1gr.—0,892 = 0,108 T'NaCI — 1 gr. — 0,986 — 0,014 T NaCI — 1 gr. — 0,901 —0,099 R NaCI = 1 gr. — 0,998 — 0,002 R NaCI = 1 gr.— 0,996 —0,004

Après 48 heures

TO. = :1gr. — 0,635 = 0,365 RO —1gr, — 0,674 — 0,326 T NaCI = 1 gr. — 0,880 — 0,220 R NaCI = 1 gr. — 0,991 = 0,009

La figure ci-après, dont les abscisses donnent les heures de dosage et les ordonnées le poids en grammes de caséine digérée, montre les résultats obtenus : (Fig. 23). | Sucrase. — Ie milieu d’excitation spécifique est composé comme suit :

Saccharose pur : : 6 gr.

Urée : 0 gr. 2 Eau : I00 cc.

Afin d'éviter une inversion par la stérilisation à haute température, nous avons eù recours à la tyndalisation à 60° pendant 8 jours consécutifs à raison de 1 heure par jour. Après 1 mois de culture, le milieu est aseptiquement décanté, lavé et les cultures sont mises en présence des milieux d'irradiation; l’irradiation est de nouveau pratiquée le sixième jour après l’ensemencement; douze jours après nous opérons la séparation des exodiastases par la filtration à la bougie de CHAMBERLAND au pH — 8,2; le liquide est ramené après filtration au pH — 4 et partagé à l’aide des ballons de PASTEUR; le liquide diastasique a été alors examiné au point de vue du glucose qu’il pouvait contenir et, si il y avait présence, le sucre interverti était dosé.

(1) FERNBACH et HUBERT. C. R. Ac. Sc. 131, page 293 (1900).

ET ee

D'autre part nous avons préparé la solution suivante :

SACONATOE eh re x ds Acétate de soude : O gr. 3 Acide acétique : traces Eau : 100 cc.

Le tout est tyndalisé pendant 8 jours à 60°. Les prélèvements effectués dans ce liquide après tyndalisation ont certifié à l’analyse qu’il ne s'était pas produit d’inversion du saccharose. Dix centimètres cubes de cette solution sont alors mis en présence de 10 ec: de chaque liquide diastasique; le mélange est placé pendant une heure au bain marie à 560, puis rapidement refroidi pour arrêter

gramme de caseine d; erée partan? de Tor. de caserne pare

par Sem de lrguto iaslasrque:

OÀ ÿ A2% DATE Frs 48h d'action Caséase ; £xo digslase :

lPaction des enzymes des différents liquides; le dosage, du sucre inverti formé dans les 20 cc. de liquide est pratiqué par la méthode de BERTRAND. La quantité trouvée après défalcation du glucose préexistant éventuellement nous donnait l'intensité de l’action diastasique des différentes souches.

I; Il

T:O — 0,025 TO 2 ve070882