RO 6" 00221 RO

T NaCl — 0,0197 TNaCl= 0,0314

R NaCI — 0,005 R NaCl — 0,007 Trypsine. — Ie milieu d’excitation spécifique est composé

comme suit :

Ovalbumine : o gr. 2 Glucose : 3 gr.

Eau légèrement alcalinisée : 100 ec.

… Après 15 jours de culture les souches sont repiquées sur les milieux d'irradiation; celle-ci est effectuée comme d’habitude

douze jours après, nous pratiquons la séparation du liquide diastasique (renfermant lexodiastase) par filtration à travers la bougie CHAMBERLAND; on ramène au pH — 8,2 car la trypsine passe le mieux à travers la bougie en milieu franchement alcalin: un tampon artificiel est inutile car l’ovalbumine en tient lieu. Ici considérant que l’action de la trypsine s’effectue seulement en milieu alcalin, nous avons après filtration, augmenté la concentration de notre liquide en ions OH (pH = 8,5). Le milieu a été ensuite analysé au moyen du réactif de TANRET et par la réaction du biuret pour caractériser la peptone ou les acides aminés préexistants ; ainsi fixés sur la qualité de notre liquide diastasique, nous en avons ajouté 10 cc. de chaque souche au mélange suivant :

Ovalbumine : I gr.

TÉaui: 10 cc. celiquide ayant été au préalable stérilisé à l’autoclave à 1109 pendant 20 minutes.

Ce mélange a été mis au bain marie à une température de 400 et les acides aminés produits par décomposition de l’ovalbumine ont été dosés par la méthode de formoltitration de SGRENSEN (1) après 6 heures, 12 heures, 24 heures, 48 heures et enfin après 10 jours.

Pour évaluer l’activité de la trypsine nous pouvions avoir recours à la vitesse de solubilisation de l’ovalbumine, ou à la mesure volumétrique de la quantité d’acides aminés formés; c’est cette dernière méthode que nous avons choisie car nous estimons

qu’elle est de beaucoup la plus précise.