SE: QE
le milieu dissocié, le pH décroît vers la zone limite acide de croissance de lAspergillus; à ce moment, la perméabilité de la membrane aux colloïdes est devenue de grandeur négligeable ; la production d’endodiastases est restée très active, c’est alors que se constate l’apparition du phénomène de la te tandis que dans un milieu non dissocié, la concentration en ions Hdiminue, c’est-à-dire arrive au seuil de l’alcalinité où elle reste constante; ici la perméabilité de la membrane n’est guère modifiée, ce qui permet aux colloïdes la diffusion vers le milieu ambiant et dans ce cas, morphologiquement nous ne constatons que des formes conidiennes oïdiennes et de souffrance (1). Nos observations, dans ce cas sont en plein accord avec les résultats des récents travaux de E.HARDE et P. HENRI (2) qui dans leurs expériences, ont trouvé que la multiplication cellulaire in vivo est favorisée par l'acidité des milieux. En outre GRŒDEL et SCHNEIDER (3) dans des recherches sur l’action des rayons X sur les paramécies constatent :
I. L/action des rayons X apparaît seulement à un certain pH qui chez la paramécie est situé au seuil de l’alcalinité et qui devient le plus sensible quand le pH se rapproche de la limite de croissance.
II. L'action des rayons X devient excitatrice au moment où le pH arrive à la zone inférieure limite permettant encore la vie des organismes envisagés ; par contre cette influence devient déprimante et non spécifique lorsque le pH augmente.
La formation d’appareils sexués chez l’Aspergillus fumigatus FRESENIUS est donc conditionnée par l’action de l’irradiation s’exerçant sur l’organisme à travers le milieu et se manifestant en premier lieu en troublant l’équilibre des membranes de DONNAN, mais nous pensons que ce ne sont pas là les seuls phénomènes entrant en jeu, car nous avons à faire à des cellules vivantes dont la complexité des fonctions est connue et appelle une diversité de réaction. Pour nous, nous n'avons voulu que montrer la relation entre les phénomènes provoqués par l’irradiation et les lois de DONNAN dans le but d’arriver à une explication de l’apparition de la reproduction sexuée chez un organisme qui normalement ne se reproduit que par voie asexuée.
Ces intéressants résultats nous ont amené à entreprendre des expériences analogues sur différentes générations d’Aspergillus fumigatus FRESENIUS issu d’ascospores et de conidies afin de comparer les propriétés biologiques de ces différentes souches dans des milieux définis avec les mêmes propriétés biologiques des races expérimentées plus haut; les différentes souches employées dans ce but sont :
(1) A. SarTORY, R. SARTORY et J. MEYER. Interprétations des phénomènes observés dans la reproduction de l’Aspergillus fumigatus Fresenius soumis à l'influence du radium. Bull. Sc. Pharm. N° 1 (Janvier 1927).
(2) E. HARDE et P. HENRI. Sur le pH des néoplasmes et des embryons des souris déterminés par la coloration vitale. €. R. Soc. biol. T. XCVI Mars 1927, page 535.
(3) GRŒDEL et SCHNEIDER. Experimentelle Untersuchungen zur Frage der biologischen Wirkung der Rôntgenstrahlen. Strahlentherapie B. XXIITI, HMS 1S LL di
I. Souche d’Aspergillus fumigatus KRESENIUS provenant de périthèces (repiquages d’ascospores);
II. Souche d’Aspergillus fumigatus FRESENIUS normal pathogène (issu de conidies) ;
III. Souche d’Aspergillus fumigatus FRESENIUS normal irradié sur le milieu même après 3 jours de culture;
IV. Souche d’Aspergillus fumigatus FRESENIUS repiqué d’un milieu irradié (première génération sexuée) ;
V. Souche d’Aspergillus fumigatus KRESENIUS de deuxième génération sexuée,
Ici nous avons recherché l’activité des diastases en ensemençant directement l’organisme sur le milieu spécifique pour chaque enzyme à examiner. Nous avons ensuite dosé dans ce milieu les
jours: de coaquatran d'u lait pradurle par lactron de da 44 Presure de Souches 2557eS de :
D 9 © À D On R 5%
Perithece Conidies J.gentration Jrradié Egcnrration DRE :
AXVI :
Fafa 4: 4
produits de dédoublement résultant de l’action des ferments. Nos examens ont porté sur la production de chymosine, caséase, gélatinase, sucrase et trypsine.
Chymosine. — Ie milieu employé a été le suivant : Glucose pur : 3 gr.
Urée : 0, 6472
Lait écrémé mécaniquement : 1cocc.
. Les courbes ci-dessus donnent une idée de la vitesse de coagulation du lait par les différentes souches. (Fig. 28.)
Caséase. — Ie milieu précédent après coagulation et au moment où l’action de la caséase annulait l'influence de la présure était filtré suivant les méthodes d’asepsie indiquées et le filtre contenant le ferment était mis en présence de 1 gr. de caséine exactement pesé; le dosage était effectué au moyen de la méthode de formoltitration de Sürensen après cinq jours de contact. Les
résultats sont exprimés dans le tableau suivant, où les chiffres représentent les centimètres cubes de Soude N /10 employée après bloquage de la fonction amine sur 10 ce. de liquide diastasique :
Exodiastases Endodiastases
Souihe HOCMAIS Sr de 5,8 5,3 DOUCE DÉTIEMOER see dé à ee 2e 8,2 1,0 Souche de première génération .. 6,0 1;2 Souche irradiée même ......... 4,2 D?
Souche de deuxième génération, ... 0,8 2,1
Souche issue : d’Ascopores, de Conidies.
Fig. 29 Dégagement de gaz en milieu gélatiné par culture de souche sexuée.
Gélatinase. — Te milieu dont nous nous sommes servi était encore :
Glucose : 3 gr.
Urée : Oo gt2 Gélatine : 7 OT. 5 Eau : 100 cc.
La liquéfaction de la gélatine se manifeste dans le même sens que la coagulation du lait. Ici nous signalerons un phénomène facilement visible sur la photographie jointe, observé dans une culture d’Aspergillus de souche issue d’ascospores sur le milieu cité pour la recherche de la gélatinase; nous observons une production gazeuse anormale, constatée aussi dans le milieu de lait, dont ïl nous a été possible de déterminer les causes; à cet effet nous avons fait usage de l’appareil suivant : (Fig. 29 et 30.)
Pour la recherche du gaz carbonique nous nous sommes servis d’un tube empli d’eau de baryte, pour caractériser l’ammoniaque pouvant provenir de la décomposition de l’urée, on à employé un tube renfermant une solution alcoolique de phtaléine; un troisième tube rempli d’eau servait à capter le gaz pour analyse (production
d'alcool par décomposition du glucose où dégagement d’un autre gaz inflammable) était placé au-dessus d’une cuve à mercure. De cette expérience résulte nettement la présence de gaz ammoniac qui ne peut provenir que de la décomposition de l’urée en CO* et NH. Nous voyons donc que l’assimilation de l’Aspergillus issu de périthèce est plus intense que pour les formes normales. Nous ferons remarquer ici que, par ce phénomène, l’organisme trouve la possibilité de vivre en anaérobie question que nous exposerons dans une note ultérieure.
Appareil pour le prélèvement et la caractérisation de gaz de culture.
Sucrase. — Nous avons cultivé les organismes sur le milieu suivant :
Saccharose : 6 gr. :
Urée : OLD. 12" fau : 100 Cc.
Mentionnons ici que ce milieu n’est pas très favorable au développement de l’Aspergillus fumigatus KRESENIUS. Après 20 jours de culture, nous avons dosé :
19 Je saccharose restant; 20 Ie sucre réducteur (glucose) formé.
Nos résultats sont les suivants :
Les chiffres expriment les milligrammes de sucre dans 10 cenmètres cubes de milieu dosés par la méthode de BERTRAND :
Saccharose restant Sucre réducteur I 2 5 à 2 Souche-normâale ir sheet O0 0,0 . 49 34 Souche, DéHitRèCe ae M er 0,0 0,0 43 30 Souche de première génération 0,0 9 47 35 Souche irradiée même ...... 20 32 56 38
Souche de deuxième génération. 53 46 6 I4
