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Après avoir divisé le milieu en 10 portions égales, réparties en 10 ballons semblables, on a ajouté à chacun des 10 récipients des quantités différentes d’acide chlorhydrique ou de Soude de façon à obtenir des pH différents. Ceci est exprimé dans le tableau qui suit. Dans chaque ballon nous avions 60 cc. de bouillon plus une quantité variable d’acide chlorhydrique ou de soude normale, plus de l’eau pour amener le volume total à 64 cc.

No des matras CE SHCIEN Cm: NaOH N Cm° : H20

OR

OO ON Oui B © D H © © © © © © H DU D H,H/©O ©O/O © OO © QU +

Tous les matras ont été stérilisés 20 minutes à 110°, on les a mis au repos pendant 3 jours de façon à permettre l’équilibre de la concentration en ions H. Nous avons alors mesuré les pH dans les différents matras en employant les indicateurs de CLARK et LuBs (1) et la méthode du demi-virage.

Nous avons obtenu la gamme suivante allant de pH—2,8 à pH=9. pH: 2,8-3,6-3,8-4-5-6,5-7-7,7-8,6-0.

Pour éviter des erreurs causées par le trouble des solutions et mieux apprécier les teintes nous avons fait usage d’un comparateur de notre invention dont nous donnons ici le schéma (Fig. 3).

Mode opératoire :

Les milieux ainsi préparés et les pH déterminés (2) nous avons réparti le contenu de chaque matras dans des tubes de culture, chaque tube renfermait 10 ce. de bouillon, on a stérilisé ces tubes à l’autoclave (110° pendant 20 minutes).

En outre nous avons préparé un milieu de Raulin acide suivant le mode opératoire habituel. Il a été réparti en tubes stérilisés et ensemencé avec l’organisme en essai. Ces cultures nous ont servi, au cours de nos recherches de témoins et de termes de comparaison.

Enfin nous avons constitué trois séries de tubes à concentration en ions H différentes depuis pH—2,8 jusqu’à pH—0, chacune des séries de tubes a été ensemencée avec l’Aspergillus.

(1) Les indicateurs employés ont été les suivants : Bleu de Thymol, Bleu de Bromophénol, Rouge de Méthyle, Pourpre de Bromocrésol. Bleu de Bromothymol: Rouge de Phénol, Rouge de Crésol, O-Crésol-Phtaléine.

(2) Après la stérilisation définitive des tubes de bouillon nous avons constaté, comme l’a aussi trouvé Dernby, que le pH avait la même valeur.

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Une série de tubes a été destinée à mesurer les variations du pH du milieu sous l’influence du champignon en culture. I/autre servant exclusivement pour l’examen journalier des modifications morphologiques pouvant survenir au cours de l’expérimentation. La troisième réservée à la détermination de la concentration optima en ions H.

Nous nous sommes d’abord demandé quelle était la variation du pH du milieu exercée par la culture du champignon. Pour cela nous avons laissé cultiver l’organisme sur la première gamme des milieux pendant 20 jours. Après ce temps nous avons effectué la mesure de la concentration en ions H de ces milieux. Nos résultats ont été les suivants : sur les milieux très acides (pH—2,8) la croissance ne s’est pas manifestée, il n’y a pas de changement dans la valeur des pH.

H 6e 0 CE

Fig. 3 Comparateur vu de face.

11 est peint en noir. La face arrière est fermée par un verre dépoli.

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