II. — MÉTHODES DE DOSAGE

Ces deux méthodes, celle de Cristol et Puech, employée par Noël Fiessinger, et celle de Goïffon et Spaey, sont basées sur le même principe : la double défécation.

On traite d’abord le sérum par un réactif fort (acide phosphotungstique) qui précipite toutes les protides, y compris les polypeptides. Puis, sur une autre prise, de quantité égale, on fait agir un réactif faible (acide trichloracétique) qui précipite seulement les albumines complexes. Jusqu'ici, pas de différence notable entre les deux méthodes. Mais à partir de ce moment, on peut, soit rechercher la différence en azote entre les 2 filtrats, soit évaluer cette différence en tyrosine. Cette différence représente les polypeptides, absents du filtrat n° 2.

Cristol et Puech — c’est la méthode du double azote

— dosent l’azote des deux filtrats au micro Kjeldahl avec l’appareil de Parnas et Warner, et traduisent ainsi les polypeptides en azote.

Goiffon et Spaey, partant de ce fait que les substances albuminoïdes et, entre autres, les albumines sériques et tissulaires, contiennent toujours un ou plusieurs noyaux tyrosiniques, mesurent la quantité de ces noyaux contenue dans le premier filtrat et absente du second. Le filtrat, traité par le réactif des phénols, puis par une solution de carbonate de soude, donne une coloration bleue. On compare au colorimètre de Dubosc avec la coloration donnée par une solution titrée de tyrosine traitée auparavant comme les filtrats. La différence entre les filtrats r et 2 donne la valeur des polypeptides exprimés ainsi en tyrosine.

Ces deux méthodes prêtent à la critique. On peut, en particulier, leur reprocher de ne jamais pouvoir faire sûrement la séparation entre polypeptides et albumines complexes. Mais, malgré leur imprécision, les résultats obtenus suffisent pour pouvoir être utilement étudiés en pratique.