PE LÉ RE

Pendant l'hiver, l’animal s'hydratait légèrement et les ovaires suivaient le mouvement mais d’une façon moins accentuée. Durant la posthibernation, la teneur en eau de la Grenouille s'élève davantage encore et celle des œufs progresse d’une façon prodigieuse de 56,77% à la fin de l’hibernation à 59,30% à la déhiscence et à 72,25% au moment de la ponte. Laissant provisoirement de côté les œufs utérins, les matières albuminoïdes comme les acides gras des œufs ovariens calculés en pour cent du poids frais semblent baisser jusqu’à la déhiscence. Mais si l’on tient compte que les ovocytes se sont hydratés et si l’on ramène les calculs au poids sec, on voit que le taux de l’azote était de 11,02% au début de la posthibernation et se trouve encore à 11,01 à la déhiscence. Par contre, le taux des acides gras rapporté au poids sec baisse de 20,80% à 20,1%. Il y a donc eu consommation de graisse et de peu d’azote. Ce résultat n’est pas autrement surprenant. Expérimentalement, j’ai montré qu’à l’époque de la ponte la maturation in vitro ne peut se faire qu'en présence d’oxygène ; on comprendrait mal le rôle de ce gaz s’il n’agissait comme oxydant. On voit ainsi que les corps à oxyder comprennent les graisses (H. BARTHELEMY 21).

L'étude biométrique de la posthibernation a laissé entrevoir qu’à ce moment l’organisme bien que S’hydratant perd de l’eau au profit des œufs. Les tableaux XXXVII. XXXVII. XLI. et les graphiques font mieux saisir encore l’importance du phénomène. On se rend ainsi compte que pendant la période posthibernale, malgré l'augmentation du taux de l'eau de la Grenouille, la quantité d’eau renfermée dans les œufs, (ovariens et utérins réunis) en pour cent du contenu total de l’organisme passe de 9,6 à 35,5, c'est-à-dire à presque quadruplé (tableau XXXVIII).

Un phénomène analogue se retrouve pour l'azote qui progresse de 24,8% à 40,6% alors qu'il n’y a pas de différence appréciable pour les acides gras des oocytes qui représentent les 65 pour cent du contenu de l'animal global. Pourtant, il faut remarquer qu’à l’époque de la posthibernation, la teneur en substances grasses de la Grenouille to-

acides gras des œufs

tale ayant baissé (graphique n° 5), le rapport mm acides gras de l’animal total diminuant aussi très légèrement (de 65,5 à 65%) on en déduit que pendant cette période, la perte des graisses porte à la fois sur l’organisme et sur les œufs, ce qui implique des oxydations chez ces derniers; fait

important pour l'interprétation de la maturité.

Le supplément d’eau et d'azote des œufs provient surtout de l’ap-

port de la gangue mucilagineuse secrétée par les oviductes turgides qui se flétrissent aussitôt par perte de substance (voir avant page 58). Mais cette cession de liquide aux œufs retentit aussi sur le foie et le muscle dont les teneurs en eau baissent également (Tableau XLI. et graphique n° 1). Par contre, leur teneur en acides gras a une tendance à la hausse.

Formation des œufs. Arrivés à la fin du cycle annuel nous avons vu défiler sous nos yeux tous les stades de l’ovogénèse. Il en ressort que la formation des œufs, tout en étant continue, n’est pas régulière, et s’effectue en quatre étapes nettement tranchées. C'est d’abord la période printanière de réparation et de remise en état de l’organisme pendant laquelle les jeunes oogonies varient peu et comme poids et comme composition. Au contraire, pendant la phase estivale qui suit, on assiste à un développement pondéral très rapide des ovaires en même temps qu’à leur enrichissement considérable en matières protéiques, en graisses et en cholestérine.

Durant l’hiver, si l’augmentation du poids des œufs progresse encore mais plus modérément, la composition chimique centésimale se modifie peu. Enfin pendant le temps relativement court de la posthibernation, sans doute par enrobement dans la gangue mucilagineuse, les œufs utérins triplent leur poids et modifient leurs teneurs des différents constituants, mais l’œuf dégangué et l’œuf ovarien déhiscent ont sensiblement même composition centésimale.

Fait déjà signalé par TERROINE et BARTHELEMY (295).

De cette dernière constatation il résulte donc que la simple détermination des teneurs en eau, en matières protéiques et en acides gras ne permet pas de caractériser biochimiquement l’œuf prêt à atteindre la maturité. Si nous constatons en effet jusqu’à la ponte une augmentation pondérale continue, nous ne saisissons par contre aucune évolution qualitative des œufs. Doit-on alors abandonner l’idée de relier les phénomènes accompagnant la maturité à une composition chimique déterminée et caractéristique? Nullement. Sans conteste, des analyses limitées à l’eau, à l’azote total, aux acides gras totaux ne sont que des travaux d’approche mais qu’il faut d’abord effectuer. L’investigation plus approfondie des composés de l’œuf est indispensables: évolution dans la constitution des acides gras et des protéiques; modifications des proportions dans lesquelles ces matières sont engagées; variation des substances nucléiniques, etc. . . Recherches délicates et longues que nous n’avons pas encore entreprises sauf pour la détermination des indices

es AU 17. PA mu

d'iode des acides gras. Pour ces derniers, le simple examen des tableaux XL. et XLI. et des courbes de la fig. 6 montre que l'indice d'iode des œufs tout en étant toujours supérieur à celui de l’animal total et de l’organisme débarrassé des ovaires reste sensiblement constant tout au moins pendant l’hiver et la posthibernation. Il ne constitue donc pas non plus une caractéristique biochimique de la maturité.

Origine de l’eau, des matières azotées et des substances grasses et lipoïdiques de l'œuf.

L'étude des variations et des rapports des principaux constituants de l’organisme et des ovaires faite précédemment permet de constater sans discussion que les œufs se comportent comme des parasites vivant et s’enrichissant aux dépens de l'animal. En particulier pour les graisses et pendant l’hibernation qui est pourtant une période de jeûne spécial, les ovaires continuent à emmagasiner des quantités considérables de corps gras alors que le reste de l'organisme s’appauvrit d'une quantité correspondante. Ainsi que le prouvent les teneurs des différents composés de l’animal total (Tableau XLI.), durant la phase hibernale, le taux de l’azote variant peu, celui des graisses diminuant beaucoup, on peut conclure d’une manière à peu près incontestable qu'il n'y à pas formation de substances grasses aux dépens des tissus; à moins toutefois que le glycogène des différents organes ne se transforme en graisse, question qui est à examiner.

En tout cas, il n’y a pas transformation en lipoides des protéiques de l’organisme. D'autre part, si l’on se reporte aux chiffres d'ATHANA- SIU (17) insistant comme PFLUGER d’ailleurs sur la faible dépense en glycogène de Rana fusca femelle pendant l'hiver, on constate qu’au 11 Novembre le taux de cet hydrate de carbone s’élevant à 1,7% est encore de 1,05 en Février; par suite, on peut donc éloigner l'hypothèse de la formation de substances grasses aux dépens du glycogène pendant l’hibernation de la Grenouille.

Dès lors, il est permis d’affirmer qu’au cours de la phase hibernale, les acides gras accumulés dans les ovogonies et provenant des graisses emmagasinées dans l’organisme pendant la période d’alimentation ne tirent par leur origine d’une néoformation.

Mais est-ce à dire qu’il y a transport pur et simple et qu’il n’y a pas remaniement des substances grasses avant leur mise en dépôt dans les œufs ou même dans l'ovaire lui-même? En aucune manière. La simple constatation que les indices d’iode des acides gras de l’œuf

sont toujours plus élevés que ceux de l’organisme lui-même, permet d’affirmer qu’il y a modification des graisses du corps avant ou pendant leur emmagasinement dans l'ovaire.

Mais alors où se fait cette transformation? Vu nos connaissances actuelles sur la fonction du foie dans la lipogénèse et le métabolisme des graisses nous serons amenés à examiner le rôle de cet organe. N'y aurait-il pas aussi des modifications des acides gras dans les œufs euxmêmes ? |

Pour résoudre cette dernière question, l’étude de la surmaturation de même que celle de l’inanition sans maturation pourront peut-être nous fournir d’utiles indications, Dans l’un et l’autre cas il y aura lieu d'examiner si les œufs utérins Surmatures d’une part et les œufs ovariens d’autre part, de même que l’organisme subissent des modifications ou des altérations susceptibles de nous faire saisir l’importance, la grandeur et le sens des phénomènes et du métabolisme chez les animaux normaux. Par la même occasion, par comparaison il sera possible d’examiner le rôle du foie, ce qui permettra peut-être dé jeter quelque lumière sur son action pendant l’ovogénèse normale. ,

Auparavant, une observation des plus importantes s'impose. Dans les tableaux examinés précédemment, pour le même mois, d’années différentes, des chiffres parfois très disparates ont pu être indiqués pour les teneurs des diverses substances, ce qui peut laisser supposer que les phénomènes de maturation ne suivent pas une marche régulière. Un exemple fourni par le tableau XL.: le 11 Février 1923 la teneur en acides gras de l’animal total était de 16,65 pour mille alors que l’année suivante à la même date elle s’élève à 20,13 pour mille! Or en 1923, la ponte commençait vers le 23 Février et en 1924 elle débutait seulement fin Mars. Ainsi s’expliquent ces différences provoquées par des durées variables de l’hibernation et des froids plus ou moins intenses retentissant sur le métabolisme. Des faits analogues peuvent être constatés pour la période estivale. Comme chacun sait, dans la même région, les circonstances atmosphériques et climatériques varient énormément d’une année à l’autre: hivers plus ou moins longs et rigoureux, étés secs ou pluvieux. Toutes circonstances extérieures et facteurs de la plus haute importance sur l’alimentation, la nutrition, l’évolution et le métabolisme des Batraciens terrestres.

L'été 1924, très pluvieux, relativement tempéré dans nos contrées, a permis aux Grenouilles rousses de circuler facilement et de se nourrir plus abondamment. La même époque de 1922 fût particulièrement chaude et sèche. Beaucoup d’entre elles moururent de la chaleur

trop élevée, alors que les autres terrées profondément n’avaient qu’une alimentation défectueuse qui manifeste son influence par une teneur en acides gras beaucoup moins élevée que pour les animaux de 1924 à la même date.

Il ne faut donc voir dans les chiffres fournis que des indications

générales sur l’allure de phénomènes pour une longue période sans vouloir exiger des dates fixes et immuables. Les grandes phases de l’ovogénèse et de la maturation persistent donc mais avec des variantes annuelles quant à leur durée et à leurs points de départ. Le fait généralement saillant et remarquable sur lequel nous avons déjà insisté est le suivant : quelle que soit la durée de l’hibernation normale, la ponte s’effectue toujours à la fin de l’hiver, au relèvement de la température et à ce moment, les œufs comme l'organisme ont une composition chimique bien définie.

Etat de l'organisme au moment de la ponte. Arrêtons-nous quelques instants sur la constitution de l'organisme au moment de la ponte. Ainsi qu'il ressort des tableaux XL. XLI. XLV. et des graphiques n°*°. 5, 9, 10, à cette époque, l’animal débarrassé des œufs a une teneur relativement faible en acides gras, 7 gr. 60 pour mille, quantité cependant légèrement supérieure à la graisse protoplasmique, à l’élément constant (6 gr. de matières grasses par kilogr.), quantité irréductible qui constitue une constante biochimique caractéristique observée lors de la mort par inanition.

Ainsi à la fin de la reproduction, l’animal a épuisé la presque totalité de ses réserves d’acides gras dont la plus grande partie est passée dans les œufs qui en renferment 65 pour cent du contenu total de l’organisme, presque le double de la quantité renfermée dans le reste du corps.

Au moment où les Grenouilles se reproduisent, elles sont donc presque à la veille de mourir d’inanition. Et en fait, conservées encore quelque temps sans alimentation elles ne tardent pas à périr. S’il serait hasardé de tirer la conclusion que la ponte est déterminée par un appauvrissement des réserves grasses de l'animal débarrassé des ovaires, voisin de l’épuisement, on peut cependant constater que la reproduction s'effectue à l’époque où il s’est établi entre les œufs et l’organisme un rapport limite compatible avec la survie de l'animal et où tout développement ultérieur des œufs ne serait plus guère possible. —

CONCLUSIONS

1°) L'étude de la composition des œufs et de l’organisme de la Grenouille rousse permet de séparer le cycle annuel en deux longues

phases bien distinctes :

L'une s’étendant de la ponte précédente (Mars) au début de la mauvaise saison (fin Octobre, début Novembre) correspond à l’existence active et terrestre de l’animal. C’est la période d’alimentation; l’autre lui faisant suite comprend à la fois la vie aquatique et léthargique à basse température pendant l’hiver et l’époque de la reproduction, c’est-à-dire l’hibernation suivie de la posthibernation de courte durée, caractérisées toutes deux par l’absence de nourriture.

Si au cours de la première phase, la Grenouille augmente de taille et s'enrichit énormément surtout en matières grasses, pendant la période printanière, les ovogonies changent peu; c’est seulement durant la période estivale (de Juillet à Octobre) que la composition des œufs se modifie considérablement. La variation de cette dernière est caractérisée : par une diminution de la teneur en eau qui s’abaisse de 81 pour cent à 54 pour cent; par une augmentation de la teneur en matières protéiques qui progresse de 13 à 32 pour cent, du taux des acides gras qui s'élèvent de 4 à 9,5 pour cent et de la cholestérine. Pendant toute cette période, l’organisme envoie donc aux ovaires plus de matières protéiques et de graisses que d’eau.

Au cours de la seconde phase, tout d’abord durant l’hibernation le poids de l’animal total change peu, mais la Grenouille s’hydrate légèrement, subit des pertes de substances particulièrement d'acides gras dont la teneur tombe de 21,53 pour mille à 16,65 pour mille. Les œufs continuent à augmenter de taille, leur masse atteignant 15 pour cent du poids du corps entier, mais leur composition ne présente plus aucune modification appréciable, l'accroissement de leurs divers constituants se poursuivant régulièremnt dans les mêmes proportions. Puis vient la posthibernation se caractérisant par l’hydratation et l’augmentation du poids de l’animal total en même temps que la teneur en acides gras s’abaisse encore. Les œufs utérins entourés de leur gangue drainent alors une grande quantité de l’eau et de l'azote de

l'organisme.

2°) Le fait que seul le poids des ovaires varie pendant l’hibernation, tandis que la composition globale (eau, matières protéiques, substances grasses et lipoïdiques) et l’indice d’iode des acides gras changent peu, indique que ce n’est pas dans une proportion déterminée des éléments dosés qu’il faut rechercher un test biochimique caractéristique de l’œuf prêt à subir la maturité. La question de l’existence d’un tel test reste entièrement posée et ne sera résolue que par des investigations plus approfcndies.

3°) Par l'étude comparée du contenu en matières protéiques et en substances grasses et lipoïdiques des ovaires et de l’animal d’une ponte à une autre, on constate que: les œufs se comportent comme des parasites s’enrichissant considérablement aux dépens de l’organisme même pendant l’hiver, période durant laquelle on peut suivre surtout pour les graisses l’appauvrissement du corps au fur et à mesure de l’augmentation des mêmes substances dans les ovaires. Vu ces faits, la constance de la teneur de l’organisme en glycogène, celle de la composition du muscle et la perte minime des matières protéiques de l’animal total, on peut affirmer qu’il n’y a pas de synthèse de graisses aux dépens des tissus dans le cours de l’hibernation, mais simple déplacement vers les œufs des substances grasses accumulées dans l’organisme pendant la période d’alimentation. D'autre part, l'indice d’iode des acides gras des ovaires à peu près constant et toujours plus élevé que celui du corps indique des remaniements des graisses avant ou pendant leur accumulation dans les ovocytes.

4°) L'évolution et la composition des corps adipolymphoïdes montrent que ces organes sont les premiers éléments consommés pendant l’hiver. Au moment de la ponte, l’organisme moins les ovaires ne contient plus que des quantités minimes de matières grasses. Le taux des acides gras, 7 gr. 60 par kilogr. bien que faible, est encore légèrement plus élevé que celui de l’élément constant 4 gr. 7 par kilogr. observé lors de la mort par inanition. Vu la composition du corps débarrassé des œufs, nous ne pouvons préciser le déterminisme de la ponte et nous constatons qu’elle se produit au moment où tout développement ultérieur des œufs ne serait plus guère possible, tout au moins au point de vue de la teneur en acides gras. —