CHAPITRE XVI

CONSIDÉRATIONS SUR LA MATURATION ET LA MATURITÉ DE LA GRENOUILLE ROUSSE ET DE SES OEUFS D'APRÈS LES RÉSULTATS BIOMÉTRIQUES ET BIOCHIMIQUES DE LA MATURATION DES RÉSERVES, DE L’HIBER- NATION, DE LA SURMATURATION ET DE L’INANITION.

Ii n’est pas dans mes intentions de décrire en détail et de suivre pas à pas la morphologie et les modifications cytologiques du jeune ovocyte à l’ovule mür. prêt à être fécondé. De telles études ont été entreprises depuis longtemps par O. SCHULTZE, G. BORN, DUBUISSON, Melle. LOYEZ, et plus récemment par KONOPACKI et KONOPACKA.—CARNOY et LEBRUN, BATAILLON, HOVASSE, se sont surtout occupés des mouvements karyocinétiques de l’oocyte à l’époque de la maturation proprement dite qui pour LEBRUN (172) «commence au moment précis de la déhiscence de l'œuf.»

Rappelons brièvement qu’à ce moment la membrane nucléaire disparaît et que tous les stades de l’émission du premier globule polaire et de la formation du deuxième fuseau polaire s’effectuent dans [a cavité générale et dans les conduits, si bien que les œufs séjournant dans l’utérus ont tous leur noyau en arrêt à la métaphase de la seconde cinèse maturative. Mais comme le fait remarquer BATAILLON (35), «Ja marche des phénomènes d’émission paraît être fonction du temps écoulé depuis la déhiscence» et non pas du cheminement aux différents points des conduits.

Laissant de côté la partie cytologique, nous examinerons avec plus de soin les phénomènes physiologiques et les variations physicochimiques de l’œuf durant la maturation de ses réserves, surtout pendant l’hibernation et la posthibernation.

Il a été constaté antérieurement que durant le cycle annuel l’oocyte se comportant comme un parasite croît continuellement mais irrégulièrement aux dépens de l’organisme. Son accroissement s'effectue sur-

tout d’Août à Octobre, mais il n’en subsiste pas moins que durant la

1,189 *— mauvaise saison et malgré la torpeur hibernale et l’absence de nourriture, Son poids comme la teneur de ses différents constituants progressent sans cesse, alors que si les variations pondérales de la Grenouille totale sont insignifiantes, le taux des matières protéiques comme des substances grasses de l’animal global ou débarrassé des ovaires va en diminuant.

Les variations des constituants essentiels de l’œuf doivent retenir quelques instants toute notre attention. Si pendant les périodes printanière et estivale le taux des protéiques, des graisses et du glycogène va sans cesse en augmentant; durant l’hibernation le pourcentage des mêmes substances change peu malgré une teneur globale plus élevée. Fait curieux, alors que depuis la ponte et jusqu’en Eté le rapport du

matières protéiques

taux ——— est assez variable puisqu'il passe de 7,1

âcides gras immédiatement après la reproduction par 3,00 fin Juillet, à 3,68 fin Août, 3,74 fin Septembre, durant l’hibernation il reste à peu près constant, Se maintenant aux environs de 3,35. C’est ainsi qu’au 20 Octobre il est de 3,37, au 3 Novembre de 3,33, au 24 Décembre 3,35, mi- Février 3,31 et au moment de la déhiscence 3,40. Un autre phénomène également remarquable réside dans la presque constance de l’indice d’iode des acides gras des œufs. A part la période estivale de grande accumulation de graisses plus rapprochées de la saturation, durant l’hibernation, et même au moment de la ponte, l’indice d’iode des acides gras des œufs ovariens ou utérins se tient dans le voisinage de 139— 140. En tout cas comme nous l’avons remarqué précédemment, cet indice est toujours plus élevé que celui de l’animal total.

Si les variations du cycle annuel de la teneur en cholestérine de l’œuf ne disent pas grand’chose, il n’en est pas de même de la teneur en eau. Très élevé immédiatement après la ponte, le taux de ce liquide va sans cesse en diminuant, mais très irrégulièrement. C’est surtout en Eté, au moment de l’accumulation des réserves qu'il baisse le plus, pour être minimum au début de l’hibernation, pendant laquelle il progresse de nouveau. Fait signalé également par HIBBARD (152) qui étudiant par des méthodes histochimiques usuelles ou raffinées l’ovogé.nèse du Discoglossus pictus a montré que la formation du vitellus s’accompagne d’une déshydratation et qu'’inversement une réimbibition marche de pair avec son utilisation. Déjà, à propos de l’hibernation, nous avons souligné l'importance de l’accumulation des réserves, de la déshydratation de l’animal en même temps que de l’abaissement de la température sur l'intensité des échanges respiratoires et sur la durée

du sommeil hibernal. «L’accumulation des réserves traduisant le ralentissement du métabolisme actif» et «l’anhydrobiose aboutissant nécessairement à la toxicité du milieu sanguin,» tout comme chez les Muscides étudiées par ROUBAUD. (266)

Les ovaires, paftie active et vivante des plus importantes de l’animal, subissent nécessairement le sort de l’organisme global et sont par conséquent comme lui, durant l’hiver le siège d’une respiration peu intense. Le Q. R. très faible signalé pendant la torpeur hibernale a forcément ses répercussions sur l'œuf qui, lui aussi, se trouve dans des conditions asphyxiques et s’intoxique d'autant plus qu’il continue à emmagasiner des réserves. Les mêmes raisonnements que nous avons faits pour expliquer le métabolisme de la Grenouille en hibernation s'appliquent également pour le cas de l’œuf.

Cependant il faut bien constater qu’au réveil printanier normal, l’organisme débarrassé des ovaires est relativement pauvre en matériaux nutritifs, il se trouve dans un état voisin de l’épuisement, alors que les œufs contiennent leur maximum de réserves particulièrement en acides gras. ‘

Une remarque préliminaire s'impose: Les connaissances actuelles sur les graisses de l’organisme acquises et précisées surtout grâce aux travaux de E. F. TERROINE et de ses élèves les classent en 1°) graisses de réserve ou de dépôt ou élément variable portant visiblement la marque alimentaire et ne faisant pas partie intégrante des tissus, 2°) en graisses protoplasmiques ou élément constant non immédiatement visible, inclus dans le protoplasme, indépendant de l’alimentation. La première catégorie de corps gras s’accroissant en qualité et en quantité au cours de l’alimentation surabondante est consommée par l’organisme dans l’inanition ; la seconde fraction constituante des tissus, constante cellulaire ne se modifie ni par l’alimentation ni par le jeûne.

Or, pendant l’hibernation et même la posthibernation, si l’on tient compte de la légère hydratation des éléments génitaux, la constance à la fois du taux et de l’indice d’iode des acides gras des œufs ovariens ou utérins toujours plus élevés que celui de l'organisme, laisse supposer que les graisses des oocytes, grandes cellules gorgées de réserves font partie intégrante du protoplasma et représente l'élément constant, invariable, fixe et prévu d’avance pour chaque stade de l’évolution des oogonies. Nous avons vu que à la maturité, les différents constituants de l’œuf: eau, protéines, hydrates de carbone, matières grasses, etc., ont un taux bien déterminé et un rapport constant non seulement entre eux, mais aussi avec les mêmes éléments de l’organisme. Il semble donc

que l’on peut employer l’expression d'équilibre de maturité de FAURE- FREMIET désignant cet état ou plutôt cette composition physico-chimi-

que spéciale de l’œuf mûr apte à la fécondation. Ainsi que nous avons calculé précédemment au moment de la reproduction, le rapport

taux des matières protéiques de l’œuf à taux de l’eau de l’œuf ———© © ——° = BIO, — ———— taux des acides gras de l'œuf jaux des acides gras de l'oeui 1723 étc.

Par l'observation on sait que d’une femelle à l’autre la taille des œufs mûrs varie presque du simple au double, d’autre part pendant toute l’hibernation et la posthibernation, le rapport

matières protéiques de l’œuf :

————— est sensiblement constant. Dès lors on acides gras de l’œuf

pourrait supposer que dès fin Octobre, la déhiscence devrait s’effectuer. Il n’en est rien. Si l’équilibre de maturité est réalisé pour le protéines

rapport tout en admettant que les termes protéines,

acides gras, acides gras, ne représentent qu'une approximation très grossière de la constitution d’une cellule ou d’un organisme et ne préjugent en rien sur la nature et la fonction des composants, il n’en demeure taux de l’eau

pas moins vrai que le rapport varie sans cesse

taux des acides gras

durant toute l’hibernation. C’est ainsi qu’étant de 5,65 au 3 Novembre, il monte à 6 au 24 Décembre, puis à 6,3 mi-Février et à 7,23 au moment de la reproduction. Nous avions déjà constaté l’hydratation continue des œufs durant la torpeur et au réveil printanier, elle apparaît encore ici.

Ainsi que nous l’avons admis et constaté indirectement dans l’hibernation de la Grenouille rousse, l’eau d’hydratation de l’animal se charge de COZ2 et des déchets des combustions incomplètes. Ici encore les œufs vont se comporter comme l'organisme dont ils sont étroitement solidaires et avec la hausse du taux de l’eau il y aura également et parallèlement accumulation dans l’oocyte du COZ et des déchets organiques jusqu’à une véritable saturation carbonique, «saturation spéciale» (BATAILLON 36) provoquant un changement d’état qui se manifeste par la liquéfaction du stroma ovulaire et de la membrane nucléaire de la vésicule germinative, rappelant la destruction asphyxique des parois cellulaires signalées par LOEB et BUDGETT ou nucléaires étudiées par BATAILLON (loc. cit.) chez l’Ascaris megalocephela, soumis au gaz carbonique.

La preuve du déterminisme de la déhiscence et par suite de la ponte dûes à ces causes internes asphyxiques est fournie par les faits

suivants: nous savons que l’hibernation cesse aussitôt que l’on élève suffisamment la température extérieure, mais la maturation proprement dite n’a lieu que si ce changement de milieu s'effectue à une période relativement proche de l’époque de la ponte. Voici comment j'interprète les phénomènes: Par l’élévation de température, les combustions internes redevenant plus actives et plus intenses et par suite les tissus et les ovaires de l'animal dégageant plus de CO2, s’intoxiquent encore d’avantage arrivent au quorum d’asphyxie voulu pour provoquer la liquéfaction du stroma ovulaire avant que l’intensité et la rapidité des mouvements respiratoires n’aient pu provoquer la décharge carbonique. Ainsi s’expliquerait l’accélération de la ponte provoquée artificiellement en plaçant au laboratoire des Grenouilles sur le point de terminer l’hibernation normale. |

Inversement on sait, et nous l’avons constaté dans la première partie de ce travail, qu’à l’eau, à la température constante d’une glacière, la maturité sexuelle se produit fatalement, mais plus tardivement, bien . qu’il n’y ait aucun relèvement de la température extérieure. Cette observation vient renforcer encore l’hypothèse émise que le déterminisme de la déhiscence et de la maturation proprement dite est provoquée, non pas nécessairement par le relèvement de la température, mais par des facteurs internes résultant d’un métabolisme ralenti, aboutissant infailliblement à des conditions asphyxiques et à une intoxication de plus en plus accentuées.

Une autre preuve indirecte de cette affirmation nous est fournie par l’étude grossière et rapide du métabolisme de l’inanition durant l’hiver, montrant que les ovaires continuent à progresser aux dépens de l'organisme, tout au moins pendant un certain temps et à la fois en poids et en teneur des principaux constituants et cependant la ponte n’a pas lieu. ù

I y a plus, au 9 Mai, les œufs ovariens de Grenouilles inanitiées au laboratoire durant 194 jours (tableau XLIX) avec un Poids total des ovaires

: —= 19,69% trè éri ê d Boite ae 9,69% très supérieur au même rapport d'œufs

normaux au moment de la déhiscence ont par contre une composition centésimale très voisine de celle des oocytes normaux à la fin de l’hibernation. Pour ces produits sexuels d'animaux au jeûne, à cette date, les rap-

taux des protéines taux de l’eau

ports > et :

taux des acides gras taux des acides gras SOI TON RCCAPEENt Me

3,56 pour le premier, 7,14 pour le second, chiffres relativement rap-

er À S Mie

prochés des nombres correspondants 3,40 et 7,23 des œufs sur le point de déhiscer. Alors qu’au début de l’expérimentation, le 27 Octobre, les mêmes rapports étaient sensiblement égaux à 3,33 et à 5,65, on peut logiquement supposer que nécessairement, à un moment donné, les deux rapports considérés des œufs inanitiés, variant de 3,33 à 3,56 et de 5,65 à 7,14, passeront par des rapports correspondants à ceux des œufs normaux déhiscents et que la maturité se fera. Pratiquement et expérimentalement à aucun moment on ne voit survenir la ponte chez des femelles au jeûüne depuis longtemps à température élevée. C’est donc qu’une composition chimique centésimale déterminée et fixe cependant nécessaire est néanmoins insuffisante pour provoquer la déhiscence. D’autres causes internes, peut-être dans l’arrangement et le groupement des constituants doivent intervenir. En tout cas une différence biologique essentielle, constatable entre l’inanition expérimentale et l’hibernation se manifeste par la grandeur et l’intensité des échanges respiratoires. Dans le premier état physiologique, c’est une respiration active dans un milieu abondamment pourvu d’O2 et aéré, provoquant sans doute une légère baisse du Q. R. par production d’acides acétoniques évacués par l’urine, mais il n’y a aucune intoxication carbonique, ce gaz étant rejeté par les mouvements respiratoires intenses. Dans le second, au contraire, la vie en milieu confiné et à basse température surajoute à la production d’acides acétoniques de tout animal au jeûne, l’intoxication par le gaz carbonique et les déchets des combustions incomplètes.

De l'exposé précédent, il est essentiel de retenir et de souligner que :

Si l'élévation de température est suffisante mais parfois pas indispensable (à la fin de l'hiver par exemple) pour faire cesser à n'importe quel moment l’hibernation de la Grenouille; la déhiscence et la maturation proprement dite de l’œuf accompagnant normalement dans la nature la fin de ce phénomène physiologique, ne peuvent se produire que sous certaines conditions qui sont:

1°) Une accumulation dans les oocytes de réserves empruntées à l’organisme aboutissant à une composition fixe et à des rapports constants biométriques et biochimiques à la fois de l’animal et de ses ovaires. —

2°) Avec des rapports bien déterminés des différents constituants de l'œuf et une hydratation suffisante adéquate, un état d'intoxication

provenant de conditions semi asphyxiques réalisées pendant une longue période par le milieu paraissent nécessaires.

Les faits antérieurs permettent de comprendre pourquoi dans l'étude de la maturation proprement dite, in vitro des œufs ovariens de Rana fusca au moment de la ponte ou dans le courant de l’hiver, telle que je l’ai décrite en 1922 (H. BARTHELEMY 21) parfois le résultat est négatif. De mes nombreuses expériences je concluais: «. . . . . . . à l’époque de la ponte, la maturation in vitro des œufs ovariens 5 la Grenouille rousse peut se produire dans la plupart des cas en présence de l'oxygène de l’air, soit en chambre humide, soit dans le sérum aéré de l’animal, ou dans les solutions aérées de NaCI à 7 pour mille dans l’eau distillée. L'absence d’oxygène et les solutions hypertoniques ou hypotoniques même aérées, ne la provoquent pas.»

Dans le courant de l’hiver, les ovocytes des femelles hibernantes ou à l’époque de la ponte les œufs ovariens de certaines Grenouilles sortant de torpeur ou inanitiées au laboratoire ne déhiscent pas et ne mûrissent pas, parce que les conditions de leur composition chimique et surtout d’hydratation et d’intoxication signalées précédemment ne sont pas réalisées. Elles ne sont pas encore «au point» ou pour parler plus scientifiquement l’équilibre de maturité, tel que nous l’avons défini et précisé, n’est pas encore réalisé. Aussi, d’après ce qui a été décrit précédemment: taille variable des œufs, composition chimique, rapports des différents constituants entre-eux, degré d’hydratation, intoxication, etc. . . , expérimentalement on doit pouvoir activer et devancer la déhiscence. Il s’agira avant tout d’hydrater l’œuf, tout en l’intoxiquant, par conséquent c’est une question de tatonnement, de dose et de choix judicieux des réactifs. C’est dans ce sens qu'il faudra diriger toutes les recherches ultérieures.

En tout cas on ne saurait trop insister sur le fait que pendant l’hibernation de la Grenouille rousse il y a hydratation progressive et continue de l’œuf en même temps que les condiions asphyxiques s’accentuent de plus en plus.

À la déhiscence normale et naturelle qui se fait au réveil printanier au retour à la vie active avec l’appel d’eau extérieure il y a nécessité d’une oxygénation intense pour brasser, brfûler et éliminer les déchets de l’œuf.

Ces opinions ne sont pas nouvelles et ont déjà été émises depuis longtemps, quoique basées sur des observations de nature différente. Les analyses et études expérimentales précédentes ne font que les confirmer.

C’est d’abord CARNOY et LEBRUN (65, — 172, — 173) qui, par l’étude cytologique des œufs ovariens de Rana temporaria (— fusca) en déhiscence insistent et écrivent: «c’est dans l’ovaire que la vésicule germinative disparaît, ainsi que l’avait déjà observé NEWPORT, et sa disparition précède de quelques minutes seulement la déhiscence des œufs qui tombent de l'ovaire dans le péritoine.» Plus loin (172) «c’est au moment précis de la déhiscence de l’œuf que la maturation commence.» On voit ainsi quel sens ces deux Savants attribuent au mot maturation.

Par ailleurs, LEBRUN (173) recherchant «l’influence de l’alimentation sur le moment de la maturation» (ce dernier mot dans le sens précisé dans les lignes précédentes) se demande «si les conditions de nutrition défavorables (état semi-asphyxique) n’auraient pas quelques rapports avec le changement physique du milieu extérieur»... «Cet état semi-asphyxique est réalisé sans aucun doute chez Rana et Bufo, espèces qui pondent dès le premier jour de leur sortie de l’hibernation ; il a existé pendant tout l’hiver. Quand les animaux étaient en terre, l'oxydation du sang a été ralentie dans des proportions considérables, puisqu'elle s’accomplissait par la peau, la respiration pulmonaire étant entièrement suspendue. L’œuf a, pendant cette vie latente subi aussi une déshydratation lente, puisqu'il a réagi contre cette action par la construction d’une membrane épaisse, comparable à la coque des Protozoaires qui s’enkystent pour résister à la dessiccation. Cet état très accentué déjà passe à l’état aigü par le fait de l’accouplement.». «La membrane du noyau se résorbe sous l’action du cytoplasme chargé d’acide carbonique.» . . . «Cette action dissolvante ne se manifeste pas seulement à l’intérieur de l’œuf, mais aussi sur le follicule ovarique qui se brise et la déhiscence générale de tous les œufs mûrs se produit presque simultanément.» Puis il conclut : «1 est bien prouvé, par l’étude comparative que nous venons de faire, que ces trois facteurs: alimentation insuffisante, état asphyxique, déshydratation, exercent sur la marche de la maturation une action profonde.» Pourtant le cas de certains Batraciens en particulier des Urodèles embarrasse l’auteur. «Chez Diemyctilus, il y a aussi un accouplement prolongé qui se produit dans l’eau; l’action déshydratante ne se conçoit pas fort bien ; il fau-

drait donc, dans cette espèce, reconnaître une influence prépondérante à l’état asphyxique et à l’alimentation.»

A la lumière des faits nouveaux acquis depuis cette époque, mettons les choses au point et rectifions les imperfections de la théorie de LEBRUN basée uniquement sur l'étude cytologique.

Sans doute l'oocyte est une «cellule affamée» mais pas inanitiée et pas en voie de dépérissement comme on pourrait le croire, en ce sens que, non seulement, comme nous l’avons vu durant l’hibernation et malgré l'absence de nourriture de la Grenouille il ne périclite pas, mais il augmente de poids, attirant à lui, accaparant les constituants, épuisant l’organisme producteur. Que l’on me permette l'expression: c’est une «cellule vorace» qui a besoin d’une grande abondance de matériaux nutritifs pour arriver à son plein développement, c’est-à-dire à l’équilibre de maturité.

Le cas de Diemyctilus s’accouplant à l'eau si embarrassant à interprèter pour LEBRUN, rentre cependant dans le cadre général des autres Batraciens. Bufo, tout au moins Bufo vulgaris hiberne habituellement dans la terre, parfois dans la vase, de même pour les Tritons; Rana fusca passe généralement la mauvaise saison dans les cavités aquatiques, mais elle peut cependant hiberner dans la terre. Dans tous ces cas d’hibernation terrestre, il y a non seulement perte de poids considérable de l’animal ainsi que nous l’avons constaté expérimentalement dans la première partie de ce travail pour Bufo vulgaris et Rana fusca, mais aussi déshydratation de l’organisme qui retentit nécessairement sur les oocytes, et nous partageons complètement l’opinion de LEBRUN qui voit dans cette hibernation «à sec» une déshydratation.

Mais chacun a pu observer ces longs défilés de Crapauds vulgaires émigrant vers les mares par les belles soirées tièdes du mois de Mars. Si l’hibernation s’est faite «à sec» dans la terre, la maturité et surtout la ponte n’a lieu que dans l’eau; doù cette migration vers les lieux aquatiques. Au début de ce mémoire (page 54) on a pu vérifier qu’aussi bien pour Rana fusca que pour Bufo vulgaris l’hibernation pouvait s’effectuer dans la terre légèrement humide, mais la ponte n’est possible qu'après hydratation de l’animal par le retour à l’eau. —

D'ailleurs déjà à l’époque des travaux de CARNOY et de LEBRUN, BATAILLON (29 — 32) poursuivant des «études expérimentales sur l’évolution des Amphibiens, les degrés de maturation de l’œuf et la morphogénèse» émettait l'hypothèse que «l'œuf au cours de sa maturation, subit des variations de pression osmotique et de turgescence. ». «Entre l’œuf ovarien et l’œuf mûr la pression osmotique présente une

différence sensible.» La dilatation considérable des œufs ovariens jetés dans l’eau comme celle des œufs immatures de la cavité générale et des conduits, portait ce Savant à leur attribuer une pression osmotique supérieure à celle de l’œuf mûr. En 1928 encore, à la suite de nombreuses recherches et études nouvelles, il insiste de nouveau en concluant que «Tous ces faits d'observation et d'expérience appuient l’idée d’une hypertension osmotique des œufs immatures, que j'ai adoptée comme hypothèse de travail il y a plus de 25 ans.» (BATAILLON 41).

Ces remarques sont générales et ne s'appliquent pas seulement aux œufs de Batraciens. On sait depuis longtemps, et les travaux de LOEB y ont énormément contribué, que les solutions hypertoniques empêchent la mise en marche de la maturation. Les recherches de DALCQ (76) sur les œufs d’Asterias glacialis ont prouvé également qu'avant la rupture de la vésicule germinative, l’oocyte se plasmolyse énergiquement dans l’eau de mer rendue hypertonique par NaCI ou par du sucre et se trouve rapidement cytolysé dans l’eau de mer alcalinisée par des bases fortes. Et il ajoute: «la perméabilité aux sels étant exclue, on peut penser à une augmentation de la pression interne de l’œuf lors de l’entrée en maturation.» Plus loin il montre que: «les phénomènes cinétiques qui se déroulent durant la maturation s’accompagnent réellement d’un appel d’eau, et par conséquent d’une certaine hypertension osmotique; la turgescence du système paraît augmenter après la rupture de la vésicule germinative.»

Tout en conservant au mot maturation employé par ces différents Savants, le sens plus restreint qu'ils lui attribuent, c’est-à-dire l’ensemble des modifications cytologiques et physico-chimiques de l’œuf seulement pendant la posthibernation au moment de la reproduction, on peut constater que l'étude chimique de la maturation des réserves de l’oocyte que nous avons faite, vient confirmer expérimentalement les hypothèses précédentes de la turgescence de l’œuf au moment de la déhiscence.

En particulier les tableaux XXXVII, XXXVIIT, XLI, comme les courbes 1, 3, 7, 8, indiquant les variations de la teneur en eau des ovocytes durant le cycle annuel, montrent nettement avec l'hydratation continue indiscutable de l’animal, celle de l’œuf pendant l’hibernation et surtout une ascension rapide au réveil printanier au moment de la reproduction.

Il y a plus; dès 1907 A. P. MATHEVWS (201) émettait une hypothèse basée sur le rôle de l’oxygène dans la mise en marche de la maturation, fait sur lequel J. LOEB a attiré l’attention. Par l’étude cy-

tologique et l’expérimentation MATHEWS considère que «les zônes irradiées sont le siège d’oxydations plus intenses que les autres territoires cytoplasmiques, car elles s’effacent notamment si l’œuf est plongé dans une eau de mer privée de O2 et également sous l’action du froid, ainsi que sous l’influence de la quinine qui ralentit les oxydations. »

La rupture de la membrane nucléaire libèrerait ainsi une oxydase qui se répandant dans toute la masse ovulaire élève le taux des oxydations: fait confirmé en partie en 1913 par les recherches de Melle. M. VAN HERVERDEN qui, par la réaction de l’indophénol a établi la présence de ferments oxydants dans les œufs d’Oursins vierges et mûrs.

L'étude biométrique, biochimique et expérimentale de la maturation des œufs de la Grenouille rousse confirme toutes les idées précédentes. Pendant toute la mauvaise saison, l’animal comme ses ovaires, vivent dans un état semi-asphyxique déjà signalé dans les observations de LEBRUN (loc. cit.) et que l’analyse du métabolisme, et en particulier du Q. R., effectuée dans les chapitres précédents ont vérifié. A la fin de l’hibernation l’oocyte se trouve donc fortement intoxiqué et par le COZ et par les déchets de ses combustions incomplètes. Il arrive un moment où l’intoxication très accusée provoque nécessairement la dissolution des follicules ovariques et de la membrane de la vésicule germinative amenant ainsi la déhiscence.

La durée de l’hibernation, d’autant plus longue que la température extérieure du milieu aquatique est plus près de zéro et retardant d’autant le moment de la déhiscence et de la reproduction, comme cela se produit tous les hivers très rigoureux, s'explique par le fait des réactions chimiques et du métabolisme moins intenses même en milieu asphyxique, à basse température.

L’hydratation des œufs de Grenouille au moment de la déhiscence est prouvée surabondamment par les chiffres des tableaux XXXVII. XXXVII. et XLI. et par l’allure des courbes 1, 3, 7, 8. L’oxygénation intense nécessaire pour éliminer les déchets et pour épurer l’oocyte est marquée du fait du retour de l’animal à la vie active avec une respiration intensive, un Q.R. très élevé, parfois Supérieur à un et par la disparition d’une quantité appréciable des constituants azotés ou lipoïdiques de l'organisme: épuration de l'œuf parallèle à celle que nous avons constatée à la posthibernation de l’animal total.

La turgescence de l’œuf ovarien et la nécessité de l’oxygénation, condition nécessaire et indispensable pour que la maturation proprement dite de l’œuf de Grenouille puisse s’effectuer, sont prouvées encore

par mes recherches de 1922 (21). In vitro, si elle s’effectue dans l'air humide ou dans les solutions dans l'eau de NaCI à 7 pour mille (isotonique au sang de Grenouille) ou dans le sérum aérés, elle n’a pas lieu en l’absence d'oxygène ou dans les solutions hyper ou hypotoniques même aérées. Les deux facteurs: oxygénation et milieu isotonique, sont donc simultanément indispensables. In vivo, on a pu constater par les résultats expérimentaux de la première partie de ce travail que la maturation et par suite la ponte du Crapaud ou de la Grenouille ayant hiber-

nés «à sec» ne pouvaient avoir lieu qu’au retour à l’eau et par suite après une hydratation très appréciable.

De cet ensemble de faits et d'observations il résulte nettement que si d'une manière générale d’après DALCQ (81) «l'entrée en maturation a un déterminisme assez variable» paraissant souvent se produire spontanément dans l’ovaire ou dans les voies génitales, parfois liée visiblement à un changement de milieu, dans le cas particulier de la Grenouille rousse, elle est intimement liée à l’état général de l’organisme, lequel est sous la dépendance des facteurs externes: milieu aquatique, conditions respiratoires et de nutrition, température, etc.

Il nous reste à examiner la période très courte S’étendant de l’entrée en maturation proprement dite, c’est-à-dire de la déhiscence à la maturité, moment où l’œuf est apte à la fécondation.

D'après les recherches de CARNOY et LEBRUN (65, — 172, — 173) chez la Grenouille rousse «la déhiscence et ensuite le passage des œufs à travers le péritoine et l’oviducte s’accomplissent en un temps relativement court. Après deux heures environ, tous les œufs sont rassemblés dans la portion inférieure de l’oviducte.» Comme on le sait, les oocytes s’entourent de leur gaine de mucine lors de leur passage dans les conduits et normalement après 18 à 24 heures de séjour dans l’utérus ils sont expulsés.

Au point de vue cytologique LEBRUN constate que si la membrane ovulaire de l’œuf ovarien est très mince («c’est une ligne dont il est très difficile parfois de saisir le double contour») par contre aussitôt que l’œuf est tombé dans la cavité générale elle s’épaissit rapidement, atteignant une largeur de un y et augmentant encore au fur et à mesure que l’oocyte circule dans les conduits. Quelques minutes avant la déhiscence, la vésicule germinative disparaît ou plutôt la membrane nucléaire s’efface, les nucléoles et le matériel chromatique étant mis en liberté dans le plasma de l’œuf. Le premier globule polaire s’expulse pendant le trajet dans l’oviducte ; les œufs de l’utérus ayant leur noyau en arrêt à la deuxième métaphase polaire.

Il appartenait. à BATAILLON (35) qui voulant corroborer sa conception d'ensemble sur le rôle de l’osmose au début des phénomènes de génération, de fournir quelques précisions sur la marche de ces phénomènes d'émission polaire et de montrer qu’elle «paraît fonction du temps écoulé depuis la déhiscence» et non du cheminement aux différents points des conduits. Je ne m'’arrêterai pas sur les détails cytologiques connus de tous.

Ce Savant et DALCQ aussi, (mais chez les Echinodermes) ont constaté expérimentalement que les phénomènes cinétiques qui se déroulent pendant toute la maturation proprement dite s’accompagnent d’un appel d’eau et par conséquent d’une certaine hypertension osmotique. «La turgescence du système paraît augmenter, après la rupture de la vésicule germinative.» (DALCQ 76).

Ce dernier par l’étude de l’action des solutions salines ou sucrées variées sur les ovocytes en maturation de Asterias glacialis démontre l’importance des phénomènes d’osmose ou d’imbibition dans la maturation, alors que les solutions hypotoniques empêchent la cytodiérèse, l’amènent à conclure que: «Toute la période de maturation active est donc caractérisée par une imperméabilité relative de l’œuf à l’égard de l’eau.»

Antérieurement à ces travaux, BATAILLON dans ses recherches nombreuses et variées sur les œufs de Batraciens et en particulier de la Grenouille rousse obtenait des résultats analogues. Dès 1901, ce Savant (29) étudiant l’évolution des œufs immatures de Rana fusca concluait déjà: «La dilatation considérable des œufs ovariens jetés dans l’eau me portait l’an dernier à leur attribuer une pression osmotique supérieure à celle de l’œuf mûr. L’évolution des œufs immatures révèle le même caractère, et ma deuxième série d'expériences paraît surtout significative.» Par ailleurs, (32) il ajoutait: «j'ai adopté provisoirement l’explication: maturation incomplète, excès de pression osmotique.» et «on peut supposer dans la maturation des oscillations de pression osmotique comparables à celles qui relèvent des solutions salines.»

Dans tous ses travaux ultérieurs, avec de nombreuses expériences variées à l’appui, (fécondations, croisements, immersion dans des solutions diverses, action des réactifs fixateurs, action de la chaleur, du froid, etc.) et même en 1928 (41), BATAILLON revient sans cesse sur cette notion de pression osmotique et de turgescence de l’œuf en maturation dont les variations peuvent être traduites par des courbes descendantes s’abaissant par l'émission des globules polaires et des