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tous les caractères des actions diastasiques, étant régie par la loi

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exprimant la vitesse d’hydrolyse produite par les diastase. Les principales conclusions de M. Niccoux sont les suivantes :

« La partie active de la graine est le cytoplasme, à l'exclusion de tous les autres éléments cellulaires (grains d’aleurone en particulier).

« Cette action du cytoplame n'est pas due à une diastase, l’eau la détruit dès que le cytoplasme n’est plus protégé par l'huile.

« L'étude détaillée de la saponification montre que l'acidité absolue joue un rôle minimum, la qualité de l'acide un rôle important. »

Tanaka, dans une série de travaux (45), décrivit un nouveau mode de préparation de la lipase analogue à celui de M. Nicroux. Il confirma les remarques de URBAIN, PERRUCHON et Lancon (50) en ce qui concerne l’action stimulante de la leucine, de l’asparagine et des autres produits de dégradation des protides.

De nombreux efforts furent tentés pour la réalisation de l’hydrolyse industrielle des corps gras au moyen de la lipase du Ricin, ainsi que le prouvent les travaux multiples concernant cette question, tels ceux de Visser (52), Eucer (11), Sommervizze (44), Lozw (31), BerczeLzer (5), Jacanner (27), Farx et Nerson (35).

On peut obtenir la formation de glycérides en mettant en présence la lipase d’un mélange de glycérol

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et d'acides gras. Ce pouvoir synthétisant du ferment de Ricin a suscité de nombreux travaux parmi lesquels on peut citer ceux de Porrevin (42), Hamsix (22), KasrLe et Lo wENHARDT (28), BrADLEz {7), Tay- LoR (46), Bourxor (6), ARMSTRONG et Gosney (1).

WELTER (53) ainsi qu'Iwaxow (26) réalisèrent la synthèse de glycérides d'acides gras au moyen de la lipase du Ricin. Krauss (29) isola les termes intermédiaires mono et dioléine. Cet auteur opérait à 20° en laissant le ferment en contact prolongé avec le glycérol et les acides gras. Le mélange était agité cinq fois par jour, chaque agitation était d’une durée de deux minutes.

Les résultats de cet auteur sont rapportés dans le tableau suivant :

HYDROLYSE des ESTERS SYNTHÉSE des ESTERS

0,01 Lipase sèche. 0,01 Lipase sèche.

I gr. Trioléine. 0,957 Acide oléique.

I cmc acide acétique N 0,104 Glycérol anhydre. 100 I cc. Acide acétique.

GE CR Durée |NaOH N1/[0/Huile ME Durée V|NaOHN/10 Acides (jours) cms (jours) lems combinés % 15 29,51 89,02 30,31 41,16 30 29,30 88,57 30,35 11,0%

Enfin MM. A. More. et L. Vector (36) ont montré que le pouvoir hydrolysant ainsi que le pouvoir synthétisant du ferment de la graine de Ricin avait pour même support le cytoplasme de la graine. Ces auteurs ont également précisé les conditions d'obtention d’un ferment « activé » capable d’hydrolyser et de faire la réaction inverse, sans addition d'acide.

En 1924, Wiccsrarrer et Wazpscaminr-Lerrz (54) publièrent un très important mémoire où ils passèrent en revue les modes d'obtention de la lipase ainsi que les tentatives pour dégager le ferment de son support protéique. Si cette énorme publication est remplie d’intéressantes remarques ayant trait aux transformations du ferment au sein de la graine, au cours de la germination, elle n'apporte pas d'éléments nouveaux au problème de la constitution du ferment.

Les auteurs sont unanimes à attribuer à la lipase du Ricin une action lipolytique très supérieure à celle des autres « Phytoestérases ». Comme celles-ci, la lipase du Ricin jouit d’une activité maxima en milieu acide à l'inverse des « Zooestérases ». La lipase des bactéries échappe pourtant à cette règle, son optimum d'action se trouve en zone neutre ou alcaline. La lipase du Ricin apparaît comme un ferment endocellulaire dont l’activité est étroitement liée au support colloïdal de nature protéique, aussi a-t-on pu se demander si le support n'était pas le ferment lui-même. C'est à cette conclusion que semblent aboutir WiLLSTATTER et WarpscaminrT-Lerrz. C’est là encore une explication toute verbale. Il v a fort longtemps que l’on a attribué à l'élément colloïdal un rôle notable dans l’acte fermentaire. Bien des fois on a tenté de reproduire au moyen de métaux colloïdaux l’action des enzymes, mais on a abouti à un échec. Accorder aux propriétés individuelles du substratum organique un rôle de premier plan, en invoquant la grosseur des micelles, qui. est en relation avec la réaction du milieu, leur signe électrique, ce n'est pas expliquer le phé-

ou

nomène. La lipase du Ricin manifeste, en effet, avec une égale intensité, son action hydrolysante, sous des pH très différents, ainsi que le prouvent les observations faites par les auteurs allemands sur les variations du pH de la graine au cours de la germination.

Mais à côté de cet état colloïdal très particulier, ne pourrait-on pas rattacher l’action lipolytique de la lipase du Ricin à un autre élément ?

Avant d'aborder ce problème il nous a fallu préparer un ferment extrêmement pur, susceptible d’être soumis à des investigations chimiques.

L'étude critique des différents modes de préparation et la technique employée font l’objet du chapitre

suivant.