MT OS
précédentes montrent qu’on peut déterminer la quantité d’un acide organique par chromatographie de partage sur papier. Mais en est-il de même lorsque plusieurs acides sont mélangés ? Ne se produit-il pas des modifications dans le chèeminement et la diffusion de chacun des acides par suite de la présence des autres ? Autrement dit le mélange de plusieurs acides n’est-il pas capable de fausser les résultats précédents ? Nous avons effectué des chromatographies d’un mélange de quantités constantes de plusieurs acides : oxalique, tartrique, citrique, malique, malonique, succinique et fumarique. Nous avons effectué ensuite des chromatographies de doses croissantes de lun quelconqué de ces acides en présence de doses constantes des autres acides. Nous avons constaté que la surface des spots n’est'en rien modifiée par le mélange de ces acides. Le dosage des acides organiques dans un mélange de ceux-ci est donc possible par la méthode d'appréciation de la surface des spots après chromatographie de partage sur papier.
MODE OPÉRATOIRE
On utilise des feuilles de papier Durieux n° 122 à filtration lente de 26 cm de large sur 24 cm de haut. À 2 cm de la base pour une chromatographie ascendante et à 5 em pour une chromatographie descendante, on trace un trait parallèle à celle-ci. Sur cette droite on marque des points a partir de 2 em du bord et ensuite tous les 3 cm. Sur ces points, nous -disposons un volume déterminé de la solu- Hüon à étudier à l’aide de micropipettes calibrées.
On dépose sur le chromatogramme des quantités croissantes et diverses d’un mélange d'acides témoins. On procède à une chromatographie descendante de trente-six heures ou à une chromatographie ascendante de six heures avec les solvants 1 et 2. Les chromatogrammes sont suspendus dans un courant d’air pendant deux heures.
Pros
On révèle les spots par pulvérisation du révélateur au bromophénol bleu. On compare la surface des taches avec les témoins.
Remarque : Lorsque l’on veut,déterminer le taux d’un acide avec une plus grande précision, on effectue la chromatographie de doses variables de la solution à étudier et l’on détermine celle qui permet d'obtenir un spot correspondant à 30 y d’acide.
CONCLUSIONS
La détermination quantitative des acides organiques par chromatographie de partage sur papier est possible avec une erreur de 5 à 10 p. 100 près. Cette détermination est rapide, spécifique et sensible. Elle a l'avantage de permettre du même coup la mise en évidence d’une substance acide que lon ne soupçonnait pas, de permettre son isolement en petites quantités et de fournir par la détermination de son Rf une constante physique qui contribue à l'identifier.
MÉTHODE DE PURIFICATION DES EXTRAITS VÉGÉTAUX EN VUE D’UNE ÉTUDE CHROMATO- GRAPHIQUE DE LEURS ACIDES ORGANIQUES SOLUBLES.
Les extraits végétaux ne peuvent pas se prêter tels qu'on les obtient à une étude chromatographique. Les acides organiques sous formes hydrosolubles sont en partie salifiés ; cette fraction échapperait au dosage. Il faut. éliminer tous les cations métalliques pour ne conserver que les anions. Il faut également éliminer les sels minéraux qui provoquent des phénomènes d’ionisation. Les sucres et toutes les substances extraites en quantité assez abondante saturent le pouvoir d'absorption du papier et diminuent la quantité d’acides déposés ; ils provoquent des phénomènes parasites à un cheminement correct ; il faut s’en débarrasser.
L'usage des échangeurs d’ions semble peut-être indiqué. Par cette technique, on peut résoudre tous les problèmes précédents ; les anions sont fixés sur les résines. La régénération de ces anions par élution est sûrement moins bien définie. Aussi, nous avons préféré une technique que nous avons mise au point. Elle a l’avantage également d’être plus simple et plus rapide.