CONCLUSION SUR CES EXPÉRIENCES DE CULTURE DIRECTE
Les résultats dans cette série d'expériences sont assez nets.
On observe une disparition de l’ion NO en milieu acide et
Lt Se
une disparition de lion NH# en milieu neutre ou faiblement alcalin.
9 , L Là .
Si l’on représente par une courbe les expériences les plus démonstratives (expériences N° 10, 11 et 12, voir page 80) en portant en abcisse le pH des milieux de culture et en ordonnée l’azote disparu exprimé en milligrammes le phénomène aparaît assez nettement.
Disparition de lion : No3 et dé | 1on NH3 o3 #3 Millgr N/N OÙ N/N disparu culture directe sur NO> m4 en fonction du ph :
1 | A O0 N03 : 8jours el 4 + —| + — o 3 , 5 6 7 pl
Courbe 6
Le maximum de disparition de l'ion NO* a lieu dans la zone acide tandis qu’il se trouve dans la zone alcaline pour l’ammoniaque.
Comme nous l’avons fait pour l’étude de l'assimilation de NOK nous allons compléter ces expériences par des essais effectués en utilisant la méthode des voiles solides afin d'éviter l’imprécision des résultats obtenus avec la méthode de culture
directe.
B. __— Assimilation par la méthode des voiles solides
Le voile étant obtenu sur le milieu à la carotte dont nous avons donné la composition (voir page 43) on opère la subs-
titution de milieu, en suivant la technique indiquée, avec le nouveau milieu préparé comme suit :
On part de la solution mère suivante :
Nitrate d’ammoniaque ........ 8 gr.
CRLCOSEPAE ER EEE 50 gr.
Citratéedéensoudten tree 20 gr.
AMAR Chlorure de Sodium. 20 gr.
| Constante minérale "cc" 50 gr.
AU de SODOURR CR or 500 &r.
L’ajustage se fait en prenant 50 cc# de cette solution et en ajoutant la quantité nécessaire soit d’acide, soit d’alcali, pour obtenir le pH désiré et en complétant finalement à 50 ceci.
On a préparé ainsi toute une gamme de séries allant de pH 0,8 à pH 7,02. Les milieux ainsi préparés sont distribués aseptiquement à la dose de 25 cc* dans des ERLENMEYER contenant déjà les voiles solides, puis on place le tout à l’étuve à 27°. On retire les fioles au bout d’un certain temps.
On dose dans les fioles témoins et dans les milieux expérimentaux l’azote sous ses formes nitrique et ammoniacale.
Dans nos premières expériences nous allons chercher à quel pH commence l’attaque de l’ion nitrique et à quel autre débute l'attaque de lion ammoniacal ; ce qui nous conduit à faire des expériences de durée relativement courte.
Aspergillus repens et nitrate d'ammoniaque.
Obtention des mycelium sur milieu à la carotte. Voiles de cinq jours, ayant subi 5 lavages en 24 heures (1). Substitution avec milieu au nitrate d’ammoniaque.
On utilise 5 séries de ce milieu ajustées à différents pH.
Les 5 groupes de 2 fioles sont retirées en une seule fois au bout de 14, 30 heures de contact .
Le titrage des témoins donne les résultats suivants (tab. 23):
(1) Voir la technique des voiles solides, page 42,
Fat
TABLEAU 23 Séries pH N. ammoniacal N. nitrique I 3.07 35 30 IT 3.77 39 39 II 4.63 3D 30 IV 5.45 39 30 V 5.85 30 39
Les résultats expérimentaux sont relevés dans le tableau 24.
L'attaque de l’ion nitrique commence aux pH très acides puis se ralentit beaucoup lorsque le milieu initial devient plus alcalin. On observe l'inverse pour l’ion NH.
En raison du temps assez court de l'expérience, les pH ont peu varié.
TABLEAU 24 Voiles substitués avec un milieu N/10 en NO:NH: ajusté à différents pH. (Durée du contact, 14 h. 30).
PH Mycelium N. ammoniacal N. nitrique ARTE Série en QUE — initial grammes résiduel disparu résiduel disparu a 0.267 3.12 39.56 0 31.48 3.02 3 07 1 b 0.246 3.24 38.88 0 31.44 3.56 a 0.220 4.28 36.80 0 28.44 6.56 377 7) b 0.287 1.28 36 96 0 28.42 6.58 a 0.318 4.78 3] LOW2 3.28 27.00 8.00 4 63 3 5.45 4 | b 0.264 5ho2 31 80 3.20 30.52 3.48 a 0.238 6.43 31.96 3.04 34.56 0.44 5.85 Es.
En ire
Aspergillus repens et nitrate d’ammoniaque.
Mêmes conditions expérimentales que dans lPexpérience précédente. On utilise des voiles obtenus sur milieu à la carotte. Substitution après lavage par des milieux nitratés habituels ajustés à 6 pH différents.
6 séries de fioles retirées au bout de 13 heures de contact.
Le dosage des témoins est relevé sur le tableau 25 et les résultats expérimentaux sont notés au tableau 26.
Les résultats de cette expérience sont particulièrement intéressants. On y voit, là encore, l’assimilation de l’ion NO commencer aux pH très acides, passer par un maximum pour décroître considérablement lorsqu'on arrive aux pH neutres ou alcalins. Inversement, en milieu très acide, l'absorption de l’ion NH d’abord très faible ou même nulle, augmente d'intensité lorsqu'on gagne les régions neutres ou alcalines. Notons une véritable décharge de l’ammoniaque issue de la réduction des nitrates dans le milieu extérieur (seulement dans les premières séries, et en milieu relativement acide).
Séries pH N/NH:3 N/NO3
