INFLUENCE DE LA PRESSION OSMOTIQUE
Il est de notion courante, depuis KrEBS et MANGIN, que l’Aspergillus repens exige l’emploi de solution à forte concentration en sel marin pour donner des cultures normales.
KLEBS (21) avait signalé depuis longtemps la nécessité de cultiver l’Aspergilius repens sur des solutions à haute pression osmotique. Ainsi sur des milieux renfermant des doses croissantes de glucose (de 0 à 20 %) le champignon ne donne des cultures normales que sur les milieux à 20 % de sucre ; à 0,2 % il n’y à qu’un mycélium rudimentaire. De plus avec des sels minéraux variés non seulement on peut observer les mêmes faits mais on peut réaliser avec ces corps des milieux à pression osmotique suffisamment élevée pour arrêter tout développement. En 1909 MANa«IN (37) a noté également la nécessité absolue d'employer des milieux très concentrés. D. BACH (1925) (2) a insisté d’une façon toute particulière sur l’influence de la pression osmotique sur la croissance de l’Aspergillus repens avec divers milieux liquides. La source d’azote a été, suivant les cas, soit le nitrate de potasse, soit l’asparagine, soit le succinate d’ammoniaque. Il a noté en l’absence de sel marin que la culture est réduite à des îlots blancs, puis jaune sale, qui s’immergent dans le liquide et ne présentent généralement pas d'appareils reproducteurs. Avec 1 et 2 % de NaCI, la culture est lente à partir, mais finit par donner un développement intense de pigments solubles.
Avec 5 % de sel, la culture est très rapide ; le voile blanc organisé dès le 3° jour, devient bientôt jaune d’or et ne se couvre de conidies vertes que lorsque l’on revient dans la zone neutre pour pH — 6. Avec des concentrations plus fortes, la culture est plus lente à évoluer mais elle finit par donner des résul-
tats plus élevés. Le voile d’abord d’un blanc pur, se couvre ensuite de conidies vertes et ne jaunit que tardivement. La sécrétion des pigments solubles est presque entièrement suspendue et les milieux restent ind ‘finiments incolores.
Enfin D. Bacu signale qu’il ne lui semble pas que la pression osmotique ait une influence marquée sur la variation de la réaction.
Il ne s’est pas attaché à étudier l’influence de cette pression sur l’assimilation de l'ion nitrique, toutefois il a présenté des résultats avec un milieu au NOK (1,01 %) à pH — 3,6. Mais il n’a pas dosé l’azote nitrique au cours de sa culture.
Cependant il a noté une légère alcalinisation de son milieu qui passe de pH — 3,6 à 5,5 en 20 heures, quelle qu’en soit la concentration saline, ce qui dénote une légère attaque de l'ion NOS.
Il nous a paru intéressant de reprendre l'étude de cette influence sur la réduction de l’ion nitrique à l’aide de la méthode des voiles solides.
Nous préparons deux séries de milieux obtenus de la façon suivante :
Nous partons de la solution mère suivante :
Constante minérale ........ 12 gr. 50 GluGose rs EE ER 12 gr. 50 Citrate#desonudene 2 re 5 gr.
Solution de. NOSK N/5 ..... 40 cc HCLON ER 20 cc Faun/bidiSuilée ESS pee 200 cr.
et nous préparons deux milieux l’un à 2 % de NaCI (milieu
normal) et l’autre privé de NaCI en utilisant les indications du tableau 49.
TABLEAU 49 El É Milieux ; s nn SR = Solution 100 cc. 100 CC.
NaCI 2,50 0 Eau q.s. 125 125
Les voiles obtenus sur milieu habituel à la carotte sont, après lavage et suivant notre technique, placés sur les milieux Avet.B.
Après avoir mis les fioles à l’étuve on les retire 2 par 2 les 24° et 48° heures.
Aspergillus repens et milieu à NaCl — 2 %.
Les dosages des témoins ont donné les résultats suivants :
Poids moyen des
Série pH N/NO: mycéliums initiaux A 1,61 39 0.2585 B 170 39 0.2585
Nous avons opéré en série acide, dans une zone où nous avons montré que la réduction de l’ion nitrique est nettement effectué par le mycélium de l’Aspergillus repens.
Les résultats sont relevés au tableau 51. Comme nous nous y attendions l’ion nitrique est attaqué. Le milieu devient moins acide par suite de la disparition de l'acide et l’apparition d’ammoniaque dans le milieu extérieur.
Opérant en milieu acide l’ammoniaque provenant de la réduction passe intégralement dans le milieu extérieur, et lon retrouve 4 milligrammes à la 48° heure ; par suite le mycélium n'ayant pas d’azote à sa disposition pour effectuer sa synthèse protéique n’augmente pas de poids.
En 48 heures 8 mmgr. d’'N/NO* sont absorbés et réduits,
Voiles substitués sur milieux N/1D en azote ajusté à pH — 1,5, les uns sans NaClI, les autres avec NaCI.
in N/NO3 Temps ! N/NH3 dé n Série ru pH Mycelium ÿ an te initial contact formé résiduel utilisé 94h. 2,05 0.249 1.20 30.50 4.04 A 2.07 0.979 1 28 31.20 3.80 1161 avec NaCI 48 h. 2,46 0.2780 4.04 26.64 9.36 954 0.2530 4.01 97 .96 7.04 24 h. 2.30 0.2878 109 29 .60 5.40 B 210 0.2500 1259 30.32 4.68 1.70 sans ; NaCl 48 h. 2,99 0.2850 7.45 24.88 10.12 9.46 0.2835 4 00 28 24 6.76
Aspergillus repens et milieu ordinaire sans sel.
Même technique et mêmes témoins que dans l’expérience précédente.
D’après les résultats inscrits au tableau 51 nous voyons que le mycélium a réduit aussi bien et sinon mieux que dans la série précédente le nitrate puisque 18 mmgr. sont absorbés en 48 heures.
Le mycélium n’a guère proliféré entre les 24 et 48° heures. L’alcalinisation du milieu semble plus forte que dans la série précédente passant de pH — 1,7 à 2,9 et semblant lié à unc assez forte dose d’ammoniaque retrouvée dans le milieu extérieur ; plus de 7 milligrammes à la 48° heure. Ceci n’a, du reste, rien d'étonnant puisque dans cette zone acide, l'NH3 de réduclion passe aussitôt formée dans le milieu extérieur.
Hu
Dans une autre série d'expériences nous avons utilisé la méthode de culture directe et opéré sur des milieux au nitrate
de potasse à concentration variable en NaCI nous avons fait un essai de plus longue durée que les précédents.
EXPÉRIENCE N° 32. — Culture directe d’'Aspergillus repens el
concentrations différentes de NaCl.
Nous avons préparé les milieux suivants comportant 3 doses
différentes de NaCI 0 %, 2 % et 10 %.
Constante minérale ........ 50 cc 50 cc NAGER MER de ea 0 20 gr.
rate de SOUdEL Te 20 gr 20 gr.
EDS CR TE en de 50 gr. 50 gr.
