LA DISSOCIATION

C’est la difficulté d'apprécier les modifications de virulence qui a donné une grande partie de son intérêt à la dissociation microbienne.

Si la réalité du pléomorphisme bactérien est maintenant bien établie, et si même cette notion a trouvé ses plus chauds partisans dans l’école allemande (1), jadis attachée à la fixité des espèces, c’est à Arkwright (2) qu’on doit la conception de la dissociation bactérienne, telle qu’elle est aujourd’hui comprise.

Etudiant le bacille de Shiga, il vit survenir des colonies qu’il dénomme Rough, colonies rugueuses, irrégulières, comme chagrinées, plates, dépassant à peine la surface de la gélose, s’opposant ainsi aux colonies Smooth, en calotte de sphère, à surface lisse, glissante, humide. Ce ne sont là que des différences morphologiques, qu'avait déjà vues Baerthlein, et la notion fondamentale apportée par Arkwright est celle de la structure antigénique particulière de ces formes R (Rough). En effet, de telles souches sont inagglutinables par les sérums habituels, mais donnent un sérum qui les agglutine, et elles seules. Enfin dès ce moment il nota que, en ce qui concerne le bacille de Shiga, la virulence des formes S dépasse de beaucoup celle des formes R. Un nombre considérable de travaux sont venus compléter et confirmer ces premières recherches, et on vit bientôt que ces phénomènes de dissociation s’appliquaient à tous les microbes.

(1) BAERTULEIN, Zentralbl. für Bakt., 1918, t. 81, p. 360. (2) Arkwrieur, Journ. of Path. and Bact., 1921, t. 24, p. 36.

Donc, schématiquement, les phénomènes de dissociation sont bien simples. On a, d’une part, la forme S, qui est la forme normale, virulente, et de structure antigénique bien définie et spécifique, d’autre part la forme R, forme ne survenant que dans certaines conditions, habituellement avirulente, différant des formes S au moins par certains de ses caractères antigéniques, qui sont en outre, beaucoup moins spécifiques que ceux des formes S (1).

En réalité, le problème est infiniment plus complexe. Sans vouloir envisager ici la question des caractères biologiques des formes dissociées du bacille de Koch, on remarquera que la forme virulente de la bactéridie charbonneuse est morphologiquement R. Mais c’est surtout chez les bacilles du groupe typhique paratyphique, où l’on avait peut-être un peu trop schématisé les phénomènes de dissociation, que des recherches récentes ont considérablement modifié la question.

Il y a déjà plusieurs années, Arkwright avait montré qu'il existait des formes qu'il appelait formes « médusoïdes », qui avaient sur gélose tout l’aspect des colonies R, mais qui pouvaient être émulsionnées même en présence de NaCI et qui contenaient l’antigène somatique des formes S. Mais surtout essentiels sont les travaux de Félix et de ses collaborateurs.

Félix et Pitt (2) remarquèrent que, en ce qui concerne le bacille d’Eberth, il y avait un parallélisme étroit entre la virulence pour la souris et la résistance à l’agglutination O. Poursuivant leurs recherches (3), ils arrivèrent à la conception qu’il s'agissait d’un antigène spécial, qu’ils désignent par antigène vi, qui conditionne à la fois la virulence pour la souris et l'inagglutinabilité O. Perry, Findlay et Bensted (4) montrent l’importance de ce facteur virulence dans l’immunisation. Enfin Kauffmann (5) a vu qu’il s’agissait là d’une véritable dissociation, d’ordre non plus morphologique, mais biologique. Il décrit une forme v,

(1) H. Scnürze, Journ. of Hyg., 1922, t. 20, p. 330.

(2) Féux et Prrr, Journ. of Path. and Bact., 1934, t. 38, p. 409.

(3) Féuix et Pirr, Lancet, 1934, p. 186. — Féuix, BanTNaGar et Pitt, Brit. Journ. exper. pathol., 1934, t. 15, p. 346.

(5) Kaurrmann, Zettschr. für Hyg., 1935, t. 116, p. 617.

Tagcrau 8. — Schéma des différents types de dissociation observés chez les bacilles du groupe typhique-paratyphique.

1° Dissociation O — H.

Formes Sérum O Sérum H MObDIIE OH) MP NET si A NHOIHOPLIER(O) PE NN RENE su —

20 Dissociation R — S$.

Formes Sérum O Sérum 6 Sérum H

SHOP NM AE NUE ct de R (6H).

R et S peuvent chacun exister sans antigène H.

3° Dissociation V — W.

Formes : Sérum O Sérum Vi Sérum H VONT) EE RE = + + NVA(OH) et TE COR as — + VMAIDENNIEEROH) EEE QE e —

Pour chaque forme, H peut être présent ou absent et l’antigène somatique peut être O ou 8.

pourvue d’antigène vi et inagglutinable par le sérum ©, une forme w, bien agglutinable et sans antigène vi, et une forme intermédiaire v-w agglutinable bien que possédant l’antigène vr. Le passage est possible de la forme v à la forme w et vice versa.

Ce nouveau type de dissociation, concernant avant tout la virulence, est essentiellement différent de la dissociation morphologique (R-S) ou antigénique (0-H).

C'est là une raison de plus pour ne donner aux désignations R et S qu'une signification morphologique, sans préjuger aucunement de la structure antigénique des germes appartenant à ces colonies et de leurs caractères biologiques.

Dans l’état actuel de nos connaissances, l’antigène thermostable des formes lisses habituelles doit être désigné par O, celui des formes rugueuses, si tant est qu’il ait une individualité propre, par 0 et l'antigène ciliaire thermolabile par H.

En ce qui concerne la virulence, les formes KR sont habituellement moins pathogènes que les formes S, mais, parmi celles-ci, l'est de grandes différences qui seraient liées à un facteur vi, lequel facteur existerait parfois dans les formes R, qui seraient alors virulentes.

3) EPIDÉMIOLOGIE EXPÉRIMENTALE

L'étude du rôle de la dissociation en épidémiologie expérimentale a été faite par Topley d’une part, Webster de l’autre.

Topley (1) fut le premier à étudier expérimentalement la dissociation. Il vit qu’il existait, en ce qui concerne le bacille d’Aertrycke, une opposition très nette entre les formes $ et R. Les souches pathogènes et « épidémigènes » étaient du type S. Les formes R, bien que moins virulentes, resteraient cependant douées d’un certain pouvoir toxique (2). L’existence de phases spécifique et non spécifique est indépendante à la fois de la virulence de la souche et de son caractère R ou $S (3).

(1) Torey et AyrTON, Journ. of Hyg., 1924, (a) t. 22, p. 234, (6) t. 23, p. 198.

(2) Br. Waure, Medical Research Council, t, 103, 1926, p. 51.

(3) Torcey et AYRTON, Journ. of Hyg., 1924, t. 23, p. 198.

Il faut aussi signaler que les formes À se trouveraient moins souvent dans les fèces que les formes S (1).

Topley pense, d’ailleurs, que les modifications de virulence, en dehors même de tout phénomène de dissociation, jouent un rôle important en épidémiologie.

Il a vu, en effet, que des souches, même très virulentes, laissent vivantes un certain nombre de souris, qui gardent cependant dans leur rate le germe pathogène dont la virulence reste inchangée. Mais surtout, il a observé qu'une souche, initialement non virulente, peut, en subissant des passages successifs dans un lot de souris limité, donner une souche virulente et « épidémigène » (2).

Ce phénomène, d’ailleurs, et c’est presque en cela que réside la majeure partie de son intérêt, est loin d’être constant. En effet, si le résultat fut extrêmement net dans une première série d'expériences, il ne put être vérifié lors de deux essais ultérieurs. Il est probable qu’interviennent des facteurs encore indéterminés dans ces phénomènes épidémiques extrêmement complexes. Ceci explique que Webster n’ait pas pu vérifier les observations de Topley. D’après ses expériences, en effet, Webster voit que, si la virulence des diverses souches de la même espèce bactérienne est variable (3), cette virulence, pour une souche donnée, reste toujours identique à elle-même, malgré les passages successifs sur la souris (4), et quelle que soit la phase de l’épidémie où est éprouvée cette virulence (5).

Une autre observation intéressante faite par Topley (6), peut aussi être interprétée en faveur du rôle des variations de virulence. Il voit que, dans un lot de souris sur lequel a sévi une épidémie, un certain nombre d'individus survivent à l’infection. Mais ces survivantes restent porteuses de germes, car elles peuvent être infectantes pour des souris neuves mises à leur contact. Leur immunité n’est cependant que relative et limitée. Elle leur

(1) Torzey et AyrTow, Journ. of Hyg., 1924, t. 22, p. 234.

(2) Torzey, GreeNwoon, Wicson et NewBozn, Journ. of Hug., :928, t. 27. p- 396.

(3) Wessrer, Journ. of experim. Med., 1923, t. 38, p. 45.

(4) Wessrer, Journ. of experim. Med , 1923, t. 37, p. 781.

(5) Wessrer, Journ. of experim. Med., 1930, t. 52, p. 301.

(6) Torcey, Journ. of Hyg., 1921, t. 20, p. 108.

permet en effet de traverser sans encombres les premiers stades de l’épidémie, mais si on continue à introduire des souris neuves, les souris partiellement immunisées sont atteintes à leur tour et succombent.

Cette expérience ne peut guère être comprise qu’en admettant la possibilité de variabilité dans la virulence du germe. Ne trouvant qu’un terrain défavorable, des individus partiellement immunisés, le microbe a peu à peu diminué de virulence. Mais, au contact d'individus neufs et susceptibles, la virulence s’est à nouveau accrue et a été suffisante pour conférer une infection fatale à des individus capables de résister au même germe dans sa virulence antérieure.

Les résultats des expériences de Webster et de Topley ne manquent pas, à vrai dire, d’être plutôt décevants par leur discordance, discordance d’ailleurs plus apparente que réelle. Ce qu’il faut surtout en retenir, c’est que l’épidémiologie expérimentale peut être d’un grand secours, mais n’apportera vraisemblablement pas à elle seule une solution définitive aux grandes questions épidémiologiques, d’autant plus qu’on ne peut que partager l'opinion de Stallybrass (1). « En matière d’épidémiologie, une observation expérimentale ne peut pas directement être appliquée à l’homme ».

4) ETUDE ÉPIDÉMIOLOGIQUE

Il semble que, malgré les apparences et la règle générale, l’observation des épidémies spontanées soit ici de plus de profit que les recherches expérimentales.

Nous avons déjà vu que les variations de virulence seraient, pour certains, parfois importantes dans l’évolution des épidémies, en particulier en.ce qui concerne la diphtérie. C’est sur la diphtérie encore que portèrent les études de Yü (2), qui, observant 31 cas, ne put isoler aucune souche rugueuse au stade aigu de la maladie, alors qu'il isola de telles souches en faisant un ensemencement des sécrétions pharyngées de ces mêmes malades avant de leur rendre la liberté.

(x) SrazzyBrass, The Principles of Epidemiology, 1931, p. 528. (2) Yü, Journ. of Bact., 1930, t. 20, p. 107.

Un argument important en faveur de l'influence des variations bactériennes en épidémiologie a été donné par Zinsser (1). Il remarque le parallélisme curieux qui existe entre les courbes de morbidité et de mortalité pour un grand nombre de maladies, en particulier, en ce qui concerne le typhus, la méningite cérébro-spinale, la pneumonie, ete. Pour lui, la chose peut S’expliquer ainsi : au début de l'épidémie, les individus susceptibles sont nombreux et le germe passe rapidement d’un malade à un sujet sain. La virulence s’accroît. Plus tard, au contraire, les individus réceptifs se font plus rares et le germe s’atténue en passant par des sujets qui sont au moins partiellement immunisés.

Nous prendrons pour exemple du rôle possible des variations microbiennes en épidémiologie, trois affections où cette variation se manifeste de façon différente, mais chaque fois caractéristique.

a) Pneumococcies. — La question du rôle des variations du pneumocoque dans les infections pneumococciques, peut s’envisager de deux points de vue.

D'abord, quel est le rôle respectif des différents types sérologiques ? Il est aujourd’hui bien établi que, chez les malades on ne trouve guère que des types I et IT, alors que chez les porteurs sains, les types IT et IV prédominent.

Cette constatation peut être interprétée de deux façons. Ou bien, les pneumocoques gardent toujours leur spécificité de type, et il faut opposer le I et le IT toujours pathogènes, au IT et au IV toujours saprophytes (2). On peut donc négliger de façon presque absolue ces deux derniers types, les pneumocoques saprophytes ne jouent aucun rôle et, devant une pneumonie, il faut rechercher le sujet infectant, porteur d’un pneumocoque I ou I.

Pour d’autres, au contraire, les types I et Il tendraient à être remplacés, au cours de la convalescence, par des types IV (3). Ces constatations nous conduisent à prendre en considération

(1) Zisser, Resrstance to Infectious Diseases, 1931, p. 18.

(2) Gunne, Ain. Woch., 1933, t. 12. p. 89. — Zinsser et BAYyNE-Jones, Text Book of Bacteriology, 1934, p. 385.

(3) Srizzman, d’après Zinsser.

les recherches de Griffith (1) sur les formes À et S du pneumocoque. Partant d’une souche S, l’ensemençant en immunsérum homologue, il obtient une souche À. Puis, de cette souche 2, il mélange une culture vivante à une émulsion tuée par la chaleur d’une souche S virulente et d’un type différent de celui dont il est parti antérieurement. Il transforme ainsi sa souche À en un type S', type S' non pas semblable au type de départ, mais à la culture tuée injectée avec la forme À. On conçoit ainsi comment pourrait se faire, dans les conditions naturelles, le passage d’un preumocoque saprophyte avirulent à un pneumocoque pathogène, en passant par la forme 2.

b) #. typhoide. — C'est à propos des bacilles gram-négatif, et en particulier du groupe coli-typhique-paratyphique, que se sont surtout affrontés et s'affrontent encore les partisans de la spécificité et ceux du pléomorphisme. Kauffmann (2), partisan de la spécificité, reconnaît parfaitement la possibilité de variations, variations parfois considérables, mais restant dans le cadre de l'espèce. Pour Sobernheim (3}, au contraire, la spécificité est un mythe, et il pense avoir observé une souche de bacille du côlon, qui, à un moment donné, a donné naissance à une souche de bacille para B du type Schottmüller.

Il semble que, dans certains cas, la variante flavus du bacille typhique, observée et étudiée par Dresel et ses élèves, puisse jouer le rôle que nous avons vu tenir par les formes À en ce qui concerne les pneumocoques. En effet, les formes À de ce groupe ne peuvent changer leur type sérologique (4). Par contre, le b. typhi flavum peut donner une souche typhique normale, en passant par exemple en milieu acide (5). On aurait même ainsi pu obtenir l’apparition d’une souche de para B (6).

Il faut d’ailleurs remarquer que ce type chromogène se rapproche, par certains de ses caractères, du type À. En effet, les

(1) Grirrire, Journ. of Hyg., 1928, t. 27, p. 113.

(2) KaAurrMaNN, Ergebnisse der Hygiene, 1934, t. 15, p. 219.

(3) Sosernaelm, Zentralbl. für Bakt., 1934, t. 132, p. 330.

(4) K. Meyer et GoznenBer6, Zeuschr, für Immunforsch., 1933, t. 80, Pain

(5) Von GarA, Zentralbl. für Bakt., 1933, t. 129, p. 81.

(6) Sosernaeim, Zentralbl. für Bakt., 1934, t. 131, p. 374.

bacilles semblent constituer une certaine entité sérologique. Ils ne sont agglutinés ni par les sérums anti-typhiques, ni par les sérums anti-paratyphiques. Si cependant on obtient leur retour à une forme achromogène, ils retrouvent leurs caractères sérologiques primitifs (1).

Dresel ne s’est pas contenté de l'étude bactériologique de ces bacilles typhiques chromogènes. Il a tenté d’éclaircir leur rôle en épidémiologie. Il fait remarquer que ces souches furent isolées dans une région où la typhoïde règne à l’état endémique (2). Le plus souvent, de tels germes furent isolés des urines, soit de malades, soit de leur entourage. Ils résistent plus longtemps dans l’eau et seraient moins sensibles aux influences extérieures. Enfin, leur moindre infectiosité conduit Dresel à les considérer comme des formes tendant au saprophytisme, bien qu'il les ait vu parfois être à l’origine de formes graves. Il semble enfin que le bacille d’Eberth puisse se transformer, dans l’organisme humain, en b. {yphi flavum, qui ne serait alors qu’une variante réversible du bacille d'Eberth (3), si bien qu’on peut se demander si cette variante ne jouerait pas un certain rôle dans l’évolution des épidémies.

Enfin, signalons que Vogelsang (4), cherchant le bacille para B chez 51 malades ou convalescents, n’a trouvé que des formes S. Au contraire chez des porteurs guéris depuis longtemps on trouve parfois S', parfois À, mais souvent À et S associés.

c) Le choléra (5). — Il est probable que, dans l’épidémiologie du choléra, les variations du germe jouent un rôle considérable. En effet, il est bien difficile d'admettre qu’il n’y ait aucune parenté entre les vibrions cholériques typiques et Les vibrions non agglutinables. Outre leur ressemblance bactériologique : même morphologie et mêmes caractères de culture, la différenciation reposant uniquement sur l’agglutination, ces deux types de

(1) SoerNxeIM, loc. cit., p. 61.

(2) Dresez, Zentralbl. für Bakt., 1931, t. 122, p. 158.

(3) Dresez, Archiv für Hyg., 1930, t. 104, p. 330.

(4) VoceLsanG, Zentralbl. für Bakter., 1932, t. 125, p. 513.

(5) Ce court aperçu a pu être rédigé grâce aux enseignements de notre Maître M. Salimbeni. Son expérience du choléra, dont il a observé de près trois épidémies (Pétrograd, Naples et Marseille), nous a été d’un grand secours.

germes présentent des rapports étroits au point de vue épidémiologique. Chez un malade donné, au cours d’une épidémie, on peut isoler simultanément une souche agglutinable et une souche non agglutinable. Mais surtout intéressant est le fait que, au début d’une épidémie, on n’observe habituellement dans les eaux que des vibrions non agglutinables et ceci malgré l’existence de cas de choléra authentique. Puis, peu à peu, à mesure que lépidémie s’étend, apparaissent des vibrions agglutinables. Il est fréquent d’ailleurs que les premières souches isolées et d’abord inagglutinables récupèrent à ce moment leur sensibilité au sérum spécifique. Plus tard, enfin, lorsque l’épidémie décroît, mais sans avoir encore disparu, les vibrions deviennent de nouveau inagglutinables.

Les recherches récentes de Doorenbos (1) ont apporté quelques précisions sur les rapports existant entre les deux types de vibrions : agglutinables et non agglutinables. Cet auteur, en effet, a pu montrer « qu’il était possible d'isoler de la même souche, « après contact avec le bactériophage, des vibrions agglutinants « et des non agglutinants, hémolytiques et non hémolytiques ».

Ces observations ont été, au-moins en partie, confirmées par N. Bernard et Wang Liang (2), qui ont soumis à l’action du bactériophage, seize couches isolées par eux en Indochine. Quatre n’ont présenté aucune modification du taux d’agglutination. Deux ont fléchi de 1/4000 à 1/2000 après 24 heures, trois sont passées à 1/1000, une à 1/500 et six n'étaient plus agglutinables.

De ceci se dégage une notion fondamentale : on peut, à l’aide du bactériophage, modifier dans une certaine mesure, les caractères biologiques du vibrion cholérique, et en particulier son agglutinabilité.

Mais, et c’est ici qu'est la difficulté de la question, quels sont les rapports entre l’agglutinabilité et la virulence ? Malheureusement, on ne peut établir aucune relation entre ces deux caractères du germe. On ne peut parfois isoler que des vibrions non agglutinables alors que se produisent des cas de choléra authentiques. D'autre part, au campement sanitaire d'EI Tor, on isole

(1) Doorensos, Etude sur le vibrion cholérique, Alexandrie, 1934.

(2) N. Bernann et WanG-Liaxé, Bull. Soc. Path. Exot., 1933, t. 26, p. 146. — N. BernarD, RAYNAL, WanG-Lianc, Bull. Soc. Path. Exot., 1933, t. 26, p. 896.

tous les ans des vibrions cholériques parfaitement agglutinables en dehors de toute épidémie de choléra.

Nous venons donc de voir trois exemples où des variations de l’agent pathogène paraissent avoir un rôle en épidémiologie, les trois types de variations étant d’ailleurs, au moins en apparence, différents les uns des autres :

Rens, Chromogène en incolore, Agglutinable en non agglutinable,

toutes variations réversibles.

Et il semble bien exact « qu’il y ait à redouter que, sous l’in- « fluence de la tendance présente, nous soyons portés à sous- « estimer les variations naturelles de l’organisme causal dans leur « influence sur les maladies épidémiques (1) ».

Mais, si nous quittons le plan général, si nous ne nous contentons pas de nous demander quel est le rôle des variations de virulence d’un agent pathogène dans l’évolution des épidémies qu’il provoque habituellement, si nous voulons savoir l'influence de ces variations quant à la périodicité saisonnière, il faut alors reconnaître que toute réponse précise est impossible et que nous devons nous borner à des hypothèses. Il reste encore à fixer l’influence des saisons sur les variations microbiennes.

II. — Rôle des variations de virulence du virus poliomyélitique.

S'il est difficile d'apprécier les modifications de virulence et le rôle de ces variations en épidémiologie en ce qui concerne les germes figurés, la difficulté est bien plus considérable encore lorsqu'on s’adresse à un virus filtrant. Nous tenterons cependant de préciser l’importance des variations de virulence du virus poliomyélitique et nous envisagerons d’abord les modifications

(1) H. Zinsser, Journ. of Prevent. Med., 1932, t. 6, p. 497.

de virulence du germe, pour voir ensuite le rôle de ces variations en épidémiologie.