RECHERCHES PERSONNELLES

À côté de ces exemples de modifications plus ou moins rapides de la virulence, mais modifications continues et irréversibles, il existe des faits de chutes de virulence, suivies de récupération du pouvoir pathogène. L'étude de semblables manifestations est d’un haut intérêt épidémiologique et c’est pourquoi nous ferons un examen détaillé des exemples qui en ont été rapportés.

La première de ces observations est due à Flexner (3). Une souche isolée par lui n’était virulente pour le singe qu’à la dose de plusieurs centimètres cubes. Puis cette virulence augmenta progressivement, et il ne fut plus nécessaire d’inoculer que

(1) E. R. Wever, Loc. cilalo.

(2) Pauz et Trask, Journ. of experim. Med., 1933, t. 58, p. 518. (3) Fzexner, CLarcr et Amoss, Journ. of experim. Med., 1914, 1. 19, p. 195.

o cm* 1 à o cm* oo1 de filtrat Berkefeld. Bien plus, alors que, au début, tous les singes n'étaient pas paralysés et que, parmi les paralysés, un certain nombre survivaient à la maladie, ultérieurement tous les singes furent atteints et succombèrent rapidement avec des manifestations de poliomyélite typique.

La souche MA qu’étudièrent Flexner et ses collaborateurs, augmenta ainsi de virulence depuis la fin de 1909 jusqu’à l’hiver de 1912. Puis cette virulence resta stable pendant environ trois ans. Au bout de ce temps, son pouvoir pathogène s’atténua progressivement, les inoculations devenant moins continuellement positives, et. la maladie n’étant pas toujours fatale. C’est ainsi que, peu à peu, la virulence se retrouva à son point de départ. Durant cette évolution, des fragments du cerveau et de la moelle de tous les animaux morts de poliomyélite expérimentale étaient conservés dans de la glycérine à 50 0/0 à une température constante de {4° centigr.

En 1918, donc après six ans de virulence atténuée, le pouvoir pathogène s’éleva à nouveau considérablement (r). Cette phase de nouvelle virulence maxima se maintint durant au moins quatre ans, puisque, en 1922, un autre fragment de matériel glycériné présenta encore une activité très élevée.

Comment interpréter ces faits? Flexner pensa qu'il fallait attribuer ces modifications à des changements du pouvoir pathogène du virus, la virulence parcourant ainsi une sorte de cycle, même le matériel virulent étant conservé dans la glycérine et à la glacière.

Rapprochant ces faits de l’évolution par vagues des grandes épidémies de poliomyélite, il fut naturellement conduit à penser que c’est à des modifications de la virulence du germe qu’il faut attribuer la survenue de ces épidémies.

Les choses en étaient là, lorsqu'il nous fut donné d’observer, dans le service du Prof. G. Levaditi, un phénomène comparable, que nous avons cru pouvoir interpréter autrement (2).

Nous avons vu en effet survenir, dans le courant des mois de novembre et décembre 1931, d’abord une atténuation, ensuite une véritable suppression de la virulence de notre souche de

(1) Fuexner et Amoss, Journ. of exper. Med., 1924, t. 39, p. 191. (2) Levaniri et Hornus, Bull. de l’Acad. de Méd., 1932, t. 107, p. 580.

virus poliomyélitique ZP. Alors que jusqu’au 17 octobre toutes les inoculations intracérébrales effectuées sur des catarrhiniens inférieurs (Macacus cynomolqus, Macacus rhesus, Cercopithecus callithrix) provoquaient des paralysies et déterminaient la mort de l’animal dans les délais habituels (du septième au douzième jour), à partir de cette date l’incubation devint plus longue et les décès manifestement retardés. Ultérieurement, survint un arrêt complet de la transmissibilité en série, quel que fût le matériel inoculé (émulsions névraxiques fraîches ou moelle glycérinée provenant des mêmes singes).

Caractéristiques de la souche de virus Levaditi-Paris. — Le virus poliomyélitique utilisé dans nos expériences est celui dont s’est servi Levaditi en 1910 et 1911 dans ses premiers essais avec Landsteiner (1) et Pastia (1). Ce virus provenait d’un enfant âgé de treize mois mort de poliomyélite le 6 novembre 1909 ; il fut entretenu par des passages sur singes (anthropoïdes et catarrhiniens inférieurs) à l’Institut Pasteur de Paris et à l’Institut médical de l'Etat, à Stockholm. Au cours de ces dernières années, cette souche a paru avoir une virulence constante. Inoculée par voie intracérébrale, elle provoquait des paralysies multiples et déterminait la mort du singe au septième, neuvième, dixième ou douzième jour. Les cas de poliomyélite chronique, avec conservation de séquelles (atrophies musculaires et déformation des membres), étaient rares. C’est, d’ailleurs, cette souche qui a servi dans les expériences de transmission de la paralysie infantile per os, de conservation du virus dans l’eau et le lait, d'infection par la voie digestive au moyen d’aliments contaminés (beurre, bananes) [Kling, Levaditi et Lépine (2)]. Elle s'était constamment montrée pathogène non seulement à l’Institut Pasteur [laboratoire de M. Levaditi et laboratoire de M. Plotz (3)], mais encore à l’Institut médical de Stockholm (M. C. Kling) et à Bucarest (expériences de M. Jonesco-Mihaesti). Rien ne laissait donc

(1) Lanpsreiner et Levaviri, Annales de l’Institut Pasteur, 1910, t. XXIV, p. 833. — LanpsreINER, LevapiTi et Pasria, Annales de l’Institut Pasteur, TOI, XX VE p. 809.

(2) Kuwé, Levaniri et LÉPiNE, Bull. de l’Acad. de Méd., 1929, t. CH, D'HHoONTO0S DL CVS p2/Ire

(3) Communication personnelle. M. Plotz s’est servi surtout de la transmission par les voies aériennes supérieures.

prévoir que la souche LP allait « flancher », lorsqu'une atténuation, puis une suppression de sa virulence sont apparues au début de novembre 1931, dans les conditions que voici :

ExPéRience I (Æchantillon glycériné moyen : 284, 285, 365). — Le 6 et le 17 octobre 1931, deux Macacus cynomolqus nos 405 et 425, inoculés par voie intracérébrale, le premier avec un mélange de moelles glycérinées

Moëlles conservees en glycérine,

des Singes 284 385 365

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SCcHÉMA [. — Noir : poliomyélite aiguë ; noir-blanc : poliomyélite chronique ; blanc : absence de poliomyélite.

(289, 385 et 365), le second avec le névraxe du singe 405, succombent de poliomyélite aiguë respectivement le septième et le neuvième jour (lésions caractéristiques du type aigu). Avec la moelle glycérinée du Macacus cynomolqus hk25, nous pratiquons, le 5 novembre, une inoculation intracérébrale au Macacus rhesus 448 (retenons ce changement de l’espèce de singe : rhesus au lieu de cynomolgus ; il aura son importance). Or, le rhesus 448 se paralyse le quarante et unième jour et ne meurt que le quarante-troisième jour. Sa moelle présente des altérations poliomyélitiques du type nettement chronique (très légers manchons périvasculaires, atrophie cellulaire, infiltration des cornes par de grosses cellules à noyau lobé). Absence d’altération de poliomyélite aiguë. Elle sert, le

19 décembre, à inoculer de la même manière quatre catarrhiniens : le Macacus rhesus 449 et les Macacus cynomolgus 469, 472 et 468. Or, de tous ces animaux, un seul, le Cynomolqus 469, fait une poliomyélite chronique (altérations cicatricielles) et meurt le dix-neuvième jour; les autres échappent à la maladie. Enfin, avec la moelle épinière de ce Cynomolgus 469, nous tentons, le 9 janvier 1932, un nouveau passage sur le Macacus cynomolqus 479. Le résultat est totalement négatif.

L'ensemble de cette expérience est représenté graphiquement dans le schéma I.

Ces données montrent que, sans nulle raison apparente, l'échantillon glycériné mixte (284, 385, 365) de notre souche LP s’est atténué progressivement à partir du 5 novembre 1931 et a perdu complètement son activité pathogène dès le 9 janvier 1932 (Cynomolqus k79).

ExPÉRIENCE II (£chantillon 423 de la souche LP). — Il s’agit, dans cette expérience, du névraxe d'un Macacus cynomolqus n° 423, lequel avait été contaminé par administration orale de beurre infecté, faite les 16, 17, 19, 20 et 21 octobre 1931. L’animal s’est paralysé quinze jours après le premier repas infectant et dix jours après le cinquième. Il est mort le vingtième jour ; sa moelle épinière offrait des altérations intenses de poliomyélite chronique. Or, la virulence de cette moelle (soit fraîche, soit conservée dans la glycérine) fut éprouvée à trois reprises, le 5 novembre, le rer décembre et le r8 décembre 1931, sur quatre simiens neufs, le Macacus rhesus 449 et les Macacus cynomolgus 468, 469 et 473. Les résultats furent totalement négatifs.

Ces données se trouvent résumées dans le tableau 9. Elles montrent que l’échantillon 423 de notre souche LP, après avoir provoqué la mort tardive du Cynomolgus 423 (vingtième jour), est devenu incapable de conférer la poliomyélite à quatre autres simiens inoculés par la suite (entre le 5 novembre et le 18 décembre 1931).

Expérience III. — Enfin, dans un troisième essai, le névraxe d’un Macacus rhesus n° 436, ayant contracté la poliomyélite à la suite d’une injection intrasciatique de beurre infecté et sacrifié le quatorzième jour (lésions aiguës intenses), fut inoculé, sans succès, dans l’encéphale d’un Cercopithecus callithrix n0 41r. Cet essai a été fait à la date du 20 novembre 1931 (schéma Il).

Il est donc évident que, par trois fois, à la même période de l’année, des échantillons de notre souche poliomyélitique LP ont perdu totalement leur pouvoir pathogène pour le singe. Voilà le fait. Quelle interprétation convient-il de lui donner ?

1° Hypothèse d'une atténuation progressive ou brusque du germe poliomyélitique lui-même. Cette hypothèse doit être rejetée. En effet, nous avons eu soin d'examiner la virulence de moelles glycérinées de cette souche (conservées à la glacière à — 2° — Be) le 6 octobre 1931, le 1°" etle 18 février 1932. Cette virulence a été appréciée par inoculation dans l’encéphale des Macacus cynomolqus n° 405, 485 et 479. Les animaux ont contracté la paralysie infantile et ont succombé le septième, le huitième et le quatorzième jour. Par ailleurs, le névraxe d’un de ces simiens, le Macacus cynomolqus 485, a été le point de départ de nouveaux passages dont les résultats furent tous positifs.

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ScHÉMaA Il.

Ces données se trouvent résumées dans le tableau 9. Elles permettent de conclure que, quel qu’ait été le moment où nous avons déterminé la virulence de notre souche LP, conservée dans la glycérine à basse température, cette virulence n'a pas sensiblement varié. Il ne saurait donc être question d'une atténuation du germe poliomyélitique hors de l'organisme du singe, par suite de changements concernant ses propriétés biologiques. Reste à envisager l'opportunité de la seconde hypothèse.

2° Hypothèse des variations de l’activité pathogène du virus s’effectuant iN ANIMA vicr. Il est vraisemblable que la réceptivité des simiens vivant en captivité doit, à l’exemple de celle de l’espèce humaine, varier dans des limites qu'aucune donnée ne permet de préciser actuellement. Partant de cette supposition, nous nous sommes demandé si l’atténuation de la virulence constatée dans nos essais n’était pas attribuable à un changement pareil

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de la sensibilité des animaux servant de test. En fait, jusqu’en février 1932, tous nos essais avaient été effectués sur un lot de catarrhiniens inférieurs qui, arrivé vers la fin octobre 1931 à l’Institut Pasteur, ont vécu dans la singerie au contact de simiens atteints de paralysie infantile. Or, c’est en expérimentant sur ce lot de singes que nous avons constaté cette extinction de lPactivité pathogène de notre souche LP. Mais à partir du 1° février 1932, un autre lot de singes inférieurs (Cynomolqus) nous est parvenu de M. Coque, zoologiste à Marseille, lot dont voici Phistoire :

Singes du lot C (Coque). — Macacus cynomolqus provenant de Sumatra, arrivés à Marseille le 17 janvier 1932 et envoyés à l'Institut Pasteur Île 29 janvier. Ils ont séjourné à Marseille pendant douze jours, dans des cages suffisamment spacieuses, placées dans une pièce chauffée.

Nous avons pu ainsi déterminer, par comparaison, la virulence de nos échantillons de la souche poliomyélitique LP, en les inoculant à des animaux qui, à peine arrivés à l'Institut Pasteur et n’ayant jamais vécu au contact d’autres singes poliomyélitiques, offraient un terrain absolument vierge et parfaitement réceptif.

Par ailleurs, nous avons invoqué la conception des « neuroinfections autostérilisables » formulée par Levaditi (1) en 1927 et appliquée dans le domaine de la poliomyélite par Ionesco- Mihaesti (2), afin d’élucider de la manière suivante le problème posé :

On sait qu’au cours de certaines neuro-infections à ultravirus neurotropes, ou à protozoaires | Veuroprotozooses de Levaditi et Schoen (3)], la mort peut survenir alors que les réactions défensives du système nerveux ont réussi à stériliser celui-ci (neuroinfections mortelles autostérilisables). D’autre part, dès ses premières recherches sur les encéphalites expérimentales, Levaditi avait constaté que de telles autostérilisations du névraxe peuvent s'effectuer sans que les animaux succombent. Compatibles avec la survie indéfinie des sujets [lesquels se montrent porteurs

(1) Levaniri, SANcHIS-BayaRRi, et REINIÉ. Annales de l’Institut Pasteur, 10270 Xl ED-R1202?

(2) lonesco-Minaesri, Toupa et Wiesner, C. R. de la Soc. de Biol , 1928, EXCIT SD TE

(3) Levaniri et Scnoen, C. R. de l’Acad. des Sicences, 1928, t. 186, p- 1584.

de lésions encéphaliques d’aspect chronique, souvent cavitaires : porencéphalie, Levaditi (r)}, ces autostérilisations engendrent l’état réfractaire et surviennent surtout lorsque le germe a subi une certaine atténuation.

Or, supposons qu’au cours de passages fréquents de singe à singe, une souche poliomyélitique de virulence moyenne (telle notre souche LP) entre en conflit avec un névraxe partiellement vacciné. Le résultat de ce conflit sera une autostérilisation, dont

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ScHÉMA III.

le degré sera proportionnel à celui de l’immunité naturelle ou acquise du sujet soumis à l’essai. La maladie aura une allure chronique, l’animal conservera ses paralysies et, au lieu de succomber du septième au douzième jour, il survivra indéfiniment, ou mourra bien longtemps après. À la nécropsie, on constatera des altérations chroniques de la moelle épinière, et le névraxe offrira une activité pathogène inférieure à celle du système nerveux d’un singe à réceptivité normale. Qu’un second passage soit effectué dans les mêmes conditions, sur un singe aussi peu réceptif que le premier, et l’on assistera à une autostérilisation de

(1) Levanimi, Annales de l’Institut Pasteur, 1980, t. XLV, p. 673.

plus en plus intense, jusqu’à l'épuisement total du virus névraxique.

C'est ce qui s’est passé, précisément, dans les expériences décrites ci-dessus. Ainsi, dans l'essai I, l'autostérilisation fut partielle chez le Macacus rhesus 448 (1), et apparemment totale chez le Macacus cynomolqus 469 (passage négatif sur le singe 479). Il en fut de même du névraxe du Macacus cynomolqus 425 de l’essai II et du Macacus rhesus 436 de l’essai III.

Si ce que nous venons d'affirmer est exact, nous devons constater un retour à la virulence initiale de nos échantillons « appa-

10 Fevrier 1932 Glycérines Cyn. 497 ee Mort 7{jour F æ æ

lésions aiques

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18 Fevrier

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