TABLEAU XXX
pH q (A pH q (2 2,6 94,8 5,2 4,6 15,4 84,6 2,8 92 8 4,8 10,3 89,7 5 87,9 HAL 5 6,8 98,2 3,2 Si 17,9 5,2 4,4 95,6 3,4 74,3 25,7 5,4 2,8 97,2 3,6 64,6 85,4 5,6 1,8 98,2 3,8 53,5 46,5 5,8 1,13 98,87 4 42 58 6 0,72, 99,2 4,2 31,4 68,6 6,2 0,45 | 99,55 4,4 22,4 77,6 6,4 0,28 99,72
Concentration pour 100
/ FIGURE 19 .— Courbe de djssociation de l'acide lactique en fonction du pH
Ce corps a une grande importance en physiologie. Il résulte comme la plupart des acides organiques, de la combustion incomplète des sucres. C’est un produit presque constant de la fermentation par les levures et par de nombreuses bactéries.
Sa consommation a fait l’objet de nombreux travaux. D’après BERNHAUER, elle se ferait soit par formation d’acide propionique, soit par scission de la molécule en acétaldéhyde et CO:.
Nous avons vu précédemment que la présence de glucose gênait beaucoup le dosage de l’acide lactique. J'ai donc été contraint de n’employer que l’acide seul comme source de carbone. Mais de tels milieux ne permettent qu’un très mauvais développement des divers champignons utilisés ; c’est pourquoi les expériences qui vont suivre ont été faites avec la méthode des voiles solides.
CHAPITRE I. — CONSOMMATION DE L’ACIDE LACTIQUE PAR L’ASPERGILLUS NIGER VAN TIEGHEM
J'ai fait réagir les voiles d’Aspergillus niger sur des milieux N/8 en acide lactique contenant les éléments minéraux indispensables et NO;NH, comme source d’azote.
La courbe d’ajustage de ce milieu (figure 20) m'a permis d’expérimenter facilement à différents pH.
& js
Milieu double dec.
Wal! Variable £au distillee ad cc.
AT
16 14 Ve l W fa 09
FIGURE 20. — Courbe d'ajustage des milieux de substitution
SN
EXPÉRIENCE XXX (Tableau XXXI, Figure 21)
Milieu de culture initial :
Constante minérale À ............ 5 ce.
Sol. de NO:NH2 3 51p 100)... 5 cc.
Glucose ES ARS RSS L6, 125
Eau distilées tr /#ne qu 25€
Milieu de substitution :
AC IACHQUEN V2 Lee. bice 2 Constante minérale À ............ SCC.
Sol: de NO;NH, à 5 p. 100 ..…. 5 cc.
ROIS LS Mere ORAN RS PRE Variable PAURdISHNÉe ee nn ds 125 CC.
TaBLEeau XXXI
Voiles de 5 jours à l’étuve à 30°, lavés 24 heures à l’eau distillée.
Acylachquennitial +, 2.0. 280 mg.
DHSTNUIA ES A remets Variable Dures dé contact. 7 2. 8 et 24 heures
Série pH. Durée pH Récolte | Ac. lactique Consom. initial en final en my. final mation heures en my. en mg.
Aux pH acides la culture est luxuriante, et le mycélium augmente de poids de façon sensible.
La consommation de l’acide est alors très importante (50 p. 100
Aide lactique consomme en mg.
FIGURE 21. — Consommation de l'acide lactique par l'Aspergillus niger en fonction du pH | : Consommation après 8 heures de contact
Il : Consommation après 24 heures de contact.
environ de la quantité mise en œuvre). Mais elle diminue rapidement lorsque le pH augmente ; elle n’est plus à pH 6,20 que du 1/30 ième environ de l’acide initial.
En se reportant à la courbe de dissociation de l’acide lactique (figure 19) on s’aperçoit que la consommation est très étroitement liée à la quantité de molécules non dissociées présentes dans le milieu.
Aux pH élevés, la consommation plus forte que ne le voudrait la courbe de dissociation, s’explique très bien par le fait qu’aussitôt l'absorption par le champignon de la petite quantité de molécules non dissociées (0,45 p. 100 à pH 6,20) il s’en reforme des quantités équivalentes en vertu de la loi d’action de masses.
Il est à remarquer que la consommation de l’acide ne commence pas tout de suite, car elle est très faible après 8 heures de contact et de l’ordre des erreurs d’expériences. Il était donc inutile dans ces conditions d'utiliser des voiles lavés la dernière fois avec une solution isotonique au milieu de substitution.
CHAPITRE II. — CONSOMMATION DE L’ACIDE LACTIQUE PAR L’ASPERGILLUS REPENS DE BARY
Les résultats obtenus avec l’Aspergillus repens sont résumés au tableau XXXII.
On s’aperçoit que, quel que soit le pH, ce champignon est incapable de consommer l’acide lactique.
Ces résultats sont en accord avec les expériences de BAcx (loc. cit.) quand il ne trouve à l’acide lactique qu’une toxicité pour l’Aspergillus repens uniquement en rapport avec les ions H du milieu.
Ce fait n’est pas isolé, et nous avons vu au début de ce travail que pour SMITH l’action de l’acide lactique est nulle sur les œufs d’Asteria et d’Arbacia.
Ce phénomène est-il dû à l’imperméabilité de la membrane à l'acide, ou bien à l’impossibilité pour le mycélium de la brûler ?
Il est évidemment difficile de se prononcer de façon certaine pour l’une ou l’autre de ces hypothèses. Cependant le fait que pour Bac et SmiTH l’acide lactique ne possède pas sensiblement de toxicité propre, semble bien indiquer qu’il est arrêté par la membrane cellulaire, car on voit mal ce qui l’empêcherait d’exercer son action si elle est due, comme le pense LILLIE, et la plupart des auteurs, à l’effet des ions H résultant de sa dissociation à l’intérieur de la cellule.
ExPpÉRIENCE XXX (Tableau XXXII)
Milieu de culture initial :
Décoction de carotte à 500 g.
PAL L'URSS SERA SRE 50 cc.
Constante minérale B .......... 2cc. 5 Glace tea 2 g. 50 Citrate de Na et NaCI ........ aâ lg.
CIN PEER EL Occ. 5
Ac lactique 2 ne 6 cc. 25 Constante minérale À .......... 5icc.
Sol. de NO;NH, à 5 p. 100 ...... 5 cc.
NOR eu he Variable
Hauedisnliéenesr ete gs 25cc.
Tagzeau XXXII
Voiles de 7 jours à l’étuve à 27°, lavés 24 heures à l’eau distillée.
Acutlactique mitials 1.200200 280 mg.
pk titan @etieis rates Variable Durée de contacte 7e mere 8 et 24 heures
Série pH Durée pH Récolte | Ac. lactique |Consominitial en final | en mg. final mation heures en MY. en mg.
8 3,95 138 279 1 8 3,54 145 279 il I 3,02 24 3,4 150 279 1 24 3,54 148 280 0 8 5,60 135 280 0 8 5,58 138 281 0 IT 5,37 24 5,88 140 279 1 24 5,88 138 280 0 8 5,15 141 278 2 8 5,72 145 280 0 III 5,95 24 6,26 148 27 2 24 6,25 140 219 1 8 6,54 139 | 280 0 8 6,52 142 | 279 1 IV 6,30 24 6,66 141 278 2 24 6,68 140 279 À
CHAPITRE III — CONSOMMATION DE L’ACIDE LACTIQUE PAR LE PENICILLIUM GLAUCUM LINK
La consommation de l’acide lactique par le Penicillimu glaucum est très rapide dans les milieux acides. Comme elle diminue rapidement lorsque le pH augmente, en suivant de très près la courbe de dissociation de l’acide on peut conclure qu’elle se fait uniquement aux dépens de la molécule non dissociée.
Cependant elle est encore nette alors que les molécules entières ne sont plus qu’à l’état de traces ; elle atteint, en effet, encore 1/30 ième de l’acide mis en œuvre à pH 6,6 alors que la quantité de molécules n’est plus que de 0,2 p. 100. Ce fait, que j'avais déjà signalé à propos de l’Aspergillus niger, est ici plus marqué à cause de l’absorption plus grande de l’acide, mais l’explication semble en être la même.
Acide lactique consomme en ma.
FIGURE 22. — Consommation de l'acide lactique
par le Penicillium glaucum en fonction du pH
| : Consommation après 8 heures de contact.
; Il : Consommation après 24 heures de contact.
EXPÉRIENCE XXXI (Tableau XXXIII, Figure 22)
Milieu de culture initial :
Milieu de RAULIN dilué à 1/2.
Milieu de substitution :
AGENT ER R 6 ce 25 Constante minérale À .......... 5\Cc:
Sol. de NO:NH;'à 5 p. 100 ...... 5 cc.
LE 0) 5 PA nn Variable
AVC Se ec oco so aber qs 25 cc.
