CHAPITRE V

De la Pluralité ou de l’Unicité des Produits toxiques du Bacille dysentérique Shiga

Nous abordons ici une question qui à déjà suscité de nombreux travaux et surtout de très norabreuses discussions. Il ne nous semble pas, pourtant, que cette question’ en ait reçu un complet éclaircissement. Pour la trancher, il faudrait encore beaucoup d'expériences. N'ayant pu le faire, nous avons hésité à aborder ce sujet. Cependant, comme il nous sera possible de tirer du débat une conclusion pratique, nous nous sommes décidé à examiner ce passionnant problème, encouragés par ce fait que notre conclusion se trouve contrôlée par les faits que nous aurons occasion de voir dans les chapitres suivants.

C'est à partir de 1903, depuis les travaux de ConrApDt, NEISSER et SHiGA, VAILLARD et DoPTER ?t ROSENTHAL, qu'il est fait mention du problème qui nous occupe ; mais pour la clarté de son exposé,

nous violerons encore une fois l’ordre chronologique des travaux pour exposer d’abord ceux de trois auteurs américains : Ozrrsky, KLiGcer- et Mc. CARTNEY, qui, en 1920 et 1923, eurent au moins le mérite d'exposer et de soutenir nettement une des solutions. | Partant de là, nous examirierons tous les travaux antérieurs ou postérieurs dont les conclusions s’ac- - cordent ou ne s'accordent pas avec les théories de ces auteurs.

: En 1920, Olitsky et Kligler écrivent : « Notre travail sur les toxines produites par le bacille de Shiga nous a amené à penser que ce microorganisme, in vitro, produisait deux poisons : une endotoxine et une exotoxine pouvant être séparées ot agissant sur les lapins par deux sortes de lésions ». Poug eux, l’exotoxine donnerait régulièrement des lésions du système nerveux chez les lapins, sans donner de lésions intestinales. Ils se gardent toutefois de décrire exactement ce qu'ils entendent par « exotoxine ». L'endotoxine, au contraire, serait enterotrope. Ils obtiennent la première en filtrant des cultures en bouillon: additionné de 1/3 de son volume d’une solution d'albumine d'œuf à 1%, de PH 7, 6, 7, 8 et largement acrées, âgées de 5 jours au maximum. L’endotoxine (obtenue pour OLrrsky et KLIGLER : « par la libération du contenu par autolyse ou dissolution des cellules bactériennes) se rencontrerait dans les vieilles cultuies en bouillon ou dans les produits d’une autolyse d=

A Te Da

AS heures d'une Culture sur gélose de 24 heures. Elle serai! séparée de l’exotoxine grâce à deux ‘artifices : 1°) le chauffage à 75° durant une heure qui détruirait l’exotoxine, alors que l’endotoxine ne se- rait touchée qu’au bout d'une heure de chauffage * 89,100

»°) la neutralisation de l'exotoxine par un sérum monovalent obtenu en immunisant un animal l’aide de filtrats de cultures jeunes en bouillon albumineux. Ce sérum laisserait intacte l’endotoxine enterotrope.

Ozrrsxy et KLIGLER notent également que l'exotoxine est précipitable -et qu’elle obéit à la loi des multiples lorsqu'on la neutralise par un sérum spécifique.

Un: sérum obtenu par immunisation à l'aide de bacilles neutraliserait à la fois l’exo et l’endotoxine.

En 1923, Mc CARTNEY et Orrrsky, déduisant des travaux ci-dessus, dont ils donnent confirmation, qu'une bonne oxygénation est nécessaire à l’obten-. tion d’une exotoxine, prétendent arriver à obtenir une endotoxine pure par culture de bacille de Shiga en anaérobiose. : CAES

Le filtrat d’une culture de 24 heures se montra atoxique. Les corps microbiens, centfrifugés, lavés el émulsionnés donnèrent des lésions intestinales et pas de lésions nerveuses.

En résumé, Orrrsky, KLIGLER et Mc CARTNEY sou-

tiennent que le bacille de Shiga : 1° secrète durant

sa vie un produil toxique neurotrope ; 2° a dars

bn

ses constituants une substance {oxique enterotrope qui n'est rendue libre que par la mort et la Iyse de la cellule bactérienne. Recherchons d'abord dans les travaux antérieurs ou postérieurs à cette publication les faits tendant à appuyer l'opinion des auteurs américains. |

Kraus et DoERR, en 1906, écrivent : « À côté de la toxine soluble, un second virus, endocellulaire, appartient probablement aussi au bacille de Shig®, virus qui:est contenu dans Je corps des bactéries ». Cette opinion est basée sur le fait que les cultures totales sont plus toxiques que les filtrats de culture en bouillon ou les produits d’autolyse privés de germes. DOoERR, l’année suivante, publie des essais qui ont dû servir de point de départ à OLrrsky el KriGLER. Il constate en effet que par un chauffage au-dessus de 70°, la toxine est affaiblie et ne donne plus que des accidents intestinaux, et. il émet l'hy- ‘pothèse qu'il existe un élément neurotoxique sensible à l’action de la chaleur et un élément enterotoxique relativement peu sensible.

PrEIFFER, en 1908, distingue la toxine-lapin « paretische Gift » et la toxine-cobaye « Marantische CHE:

Heller, en 1909, immunise trois chevaux

Le premier à l’aide de cultures sur gélose tuées ;

Le second à l’aide de filtrat de culture en bouiilon de 20 jours ;

Le troisième à l’aide du produit de lavage de cul-

tures sur gélose très fraîches.

Éube

Il constate par la suite que les sérums des deuxième et troisième chevaux neutralisent parfaitement le filtrat de bouillon et l'« eau de lavage », mais qu'il faut ro fois plus de ces deux sérums pour neutraliser la même dose de culture tuée ou de son extrait.

Inversement, HELLER aurait obtenu du premier cheval un sérum actif pour toutes les toxines, mais moins actif vis-à-vis des « toxines-bouillons » ou « eau de lavage » que les deux autres sérums.

Cet auteur écrit : « La production de Ia vraie toxine se fait à l’intérieur des cellules et le poison terminé est ensuite excrété. C’est pourquoi on ne peut enlever par lavage toute la toxine », et plus loin : « Nous avons donc à comptler avec deux poi-: sons différents : une véritable toxine dont lexistence peut être prouvée en dehors des cellules bactériennes et une endotoxine. Ce n’est pas seulement l’action neutralisante des divers sérums sur chaque préparation toxique de lagent dysentérique qui nous conduit à cette théorie, mais aussi l’action du poison dans le corps de Fanimal... par injection de l’endotoxine à la souris on voit surtout des phénomènes intestinaux.

KOLLE, en 1909, écrit : « Il y a deux poisons différents, la toxine soluble, séparable, qui est neutralisée suivant la loi des multiples, et l’endotoxine, moins bien neutralisée. L’'exotoxine est un corps simple ; ; l'endotoxine, la somme des différentes substances protoplasmiques toxiques ».

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SELTER, en 1910, tout en déclarant l’exotoxine une vue de l'esprit, pense que la toxine qui agit sur le lapin esi différente de celle qui agit sur le cobaye à cause des symptômes différents et parce que ja toxine tuant le cobaye résiste à des températures plus élevées.

THOMSON, essayant des vaccins en 1916, signale que chez le lapin les réactions du système nerveux furent plus marquées avec le vaccin sensibilisé alors que le vaccin non sensibilisé donne des symptômes intestinaux plus sévères. Il faut noter que le sérurn: qui lui servit à sensibiliser ses germes est un sérum agglutinant, donc préparé à l’aide de corps microbiens.

Tuyrra et FALSEN SUNDT trouvent que le filtrat d’une culture en bouillon de huit jours ne donne que lexotoxine et qu'un autolysat de 48 h. d’une culture de 24 h. sur gélose, chauffée à 60°, ne donne que de l’endotoxine. Ce résultat ne manque pas de nous surprendre d’ailleurs, car Orrrsky et KLIGLER eux-mêmes ont admis l'existence des deux produits dans ce genre d'autolysat. "

La même année, KARASAWA, répétant les travaux de Doprer sur les lésions du système nerveux, constate que la toxine neutralisée par le sérum ne donne plus ces lésions. |

Kawar, en 1921, parle de toxine-cobaye et de toxine-lapin.

Enfin, tout récemment, PERRY et COPPINGER, voulant confirmer les travaux de Me CARTNEY et Orrrs-

kY, constatent bien que les cultures aérobiés en couche mince donnent, au bout de trois jours un filtrat très toxique, particulièrement pour le système nerveux, alors que des cultures anaérobies ne donnent que de vagues symptômes intestinaux.

Mais ces auteurs anglais, se basant sur les travaux des américains, arrivent à immuniser des animaux contre | « exotoxine » au moyen de l’'endotoxine, ce qui est alors un démenti formel à la théorie sur laquelle ils s'appuient.

Et ceci nous amène à prendre l'étude des travaux infirmant la théorie des Américains OLiTrsKkY, KEi-

GLER et Mc CARTNEY.

VAILLARD el DOPTER, en 1903, ne croyaient pas à l'existence d’une toxine soluble parce que leur filtrat de culture en bouillon de 5 jours était atoxique. Ils conslataient que le chauffage à 75° n'’affaiblit pas leur toxine alors que 80° l'affaiblit notablement et qu'elle est détruite à 81°. Mais ces auteurs ne remarquent pas de changement dans les symptômes qui sont toujours nerveux et intestinaux. NEisser et SHIGA, en 1903, constatent que le chauffage à 75° affaiblit fortement la toxine et réussissent à précipiter celle-ci par l’alcool-éther. BEsREbKA, en 1906, dit que la toxine dysentérique est une endotoxine et constate que la température dé 78° la détruit au bout d’une heure.

. La même année, Varzzarp et Doprer expriment l'opinion que la toxicité du bouillon est due à l’endotoxine autolysée dans le milieu.

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KLEIN, en 1907, croit à l'identité de l'endotoxine et de la toxine parce que son sérum, obtenu en injectant les deux toxines (Corps «mierobiens el bouillon) neutralise les deux sortes de toxines. (Cela ne nous parait rien moins que démonstratif).

PFEIRFER et UNGERMANN, 8n 1909, montrent que c'est toujours la toxine totale (corps microbiens) qui est la plus forte alors que le filtrat d'une culture en bouillon n'est actif qu'après autolyse de nombreux bacilles. Ils rejettent donc l'hypothèse d’une sécrétion. |

PFEIFFER, répélant seul cette théorie, écrit : « Les poisons dissous qui se trouvent dans les vieilles cultures en bouillon sont des substances toxiques transformées autolytiquement en grande partie et provenant de cellules bactériennes ; ils sont de nature artificielle et sans doute sans signification pour la marche naturelle de la maladie ».

En 1910, SELTER, employant comme matériel toxique des cultures tuées par chauffage à 60° durant 2 heures, constate que la toxicité est à peine touchée à 70°, l'est peu à 80° et après une ébullition de 10 minutes il arrive à tuer l'animal, par injection de la valeur de deux tubes de gélose il est vrai. Il constate que son « extrait à 60° » (voir chapitre des toxines autolvsées), est plus toxique que les bacilles res- -tants, que les bacilles vivants sont un peu mieux supportés que les bacilles tués à 60°, que l'extrait est précipitable par l'alcool ou le sulfate d’ammoniaque et qu'il est vite rendu atoxique par l’ébullition. Il