II. — BACILLES PARATUBERCULEUX
Les bacilles paratuberculeux ont la réputation de n'être que des banaux saprophytes ; incapables de provoquer tant chez l’homme que chez les animaux d’affection locale ou générale. Cependant, toute une série d’observations relevées par Hauduroy (53) concernant les bacilles paratuberculeux peuvent permettre de douter de cette réputation ; un certain nombre de faits cliniques refutant même entièrement cette allégation.
Si, lorsqu'il s’agit d’une affection pulmonaire ou intestinale, un certain nombre de tests s'offrent au biologiste pour confirmer le diagnostic ; dans le cas d’affections rénales, les examens de laboratoire ont une importance considérable et c’est souvent la lecture du compte rendu analytique qui décidera de l'intervention.
La présence de bacilles paratuberculeux a été signalée un certain nombre de fois dans l’urine des malades. Une observation particulièrement importante à ce sujet est celle de Chauvin (25).
La jeune femme présentant de la pyurie, l’urine prélevée dans le bassinet contenant du pus, des hématies, des bacilles acido-alcool-résistants, mais ceux-ci n'étaient pas des bacilles de Koch. L’inoculation du cobaye s’est montrée négative. La clinique confirme le résultat du laboratoire. La guérison survient, en effet, quand, à l’aide de lavage, on fit disparaître à la longue les bactéries. Il est donc bien évident, à la lumière de cette observation, que le biologiste ne doit jamais conclure à la présence de bacilles de Koch, malgré un ensemble d’éléments convergeant, sans avoir confirmé ses résultats, par lPinoculation et par un examen systématique à l’autopsie de l'animal en expérience. En effet, certains acido-alcoolo résistants tels que Mycobactérium aquæ de Galli-Valéiro, présentent des caractères pathogènes pour les animaux le rapprochant du B. K. Ce germe est assez fréquent ; on le trouve dans les produits de raclage des robinets.
L’injection des cultures vivantes au cobaye, aux lapins (sous la peau), provoque la formation d’abcès, mais ceux-ci guérissent spontanément. L’inoculation intrapéritonéale peut provoquer des petits foyers dans les organes.
Les cultures, par contre, se différencient nettement de celles du B. K., typique. Elles se développnt à 20°, mieux à 37°, en particulier sur les milieux glycérinés ou glucosés. Le bacille
forme un dépôt sur le bouillon. Ne liquéfie pas la gélatine. Les cultures sont pigmentées en jaune orangé, les colonies sont brillantes, se détachant facilement du milieu : celles du B. K. sont blanches, assez mates et adhérentes.
Il résulte des travaux effectués par les divers auteurs et de la remarquable monographie de Hauduroy (cf) que les bacilles paratuberculeux sont peu dangereux pour les animaux de laboratoire cependant, les lésions observées à l’autopsie sont assez variables. Leur répartition et leur intensité semblent bien signifier qu'il existe de grandes variations dans le pouvoir pathogène des souches manipulées.
L’intradermo-réaction à la tuberculine ne permet pas, sur l'animal en expérience, de différencier les bacilles vrais des pseudo-tuberculeux ; en effet, des animaux inoculés avec certains bacilles paratuberculeux réagissent positivement et fortement à la tuberculine vraie.
Il semble donc que ces bacilles pseudo-tuberculeux élaborent des paratuberculines dont les constituants sont voisins de ceux des tuberculines. Il paraitrait intéressant de pouvoir essayer au laboratoire les acides gras de synthèse déjà étudiés en France par Paraf, Desbordes et Buu-Hoï (81) sur le cobaye infecté par le bacille de Koch. Ce qui pourrait permettre la discrimination entre les vrais bacilles et les pseudo-bacilles, en opérant sur une substance synthétique spécifique du germe pathogène dépourvue de protéines qui, elles, peuvent être identiques chez les différents types d’acido-résistants.
Il est bon de rappeler les caractères äes lésions observées en cas de mort de l’animal en expérience. L'aspect de lanimal à l’autopsie est déjà caractéristique et ne rappelle nullement celui mort de tuberculose.
On trouve presque toujours l’ensemble de lésions suivantes”:
Epanchement péritonéal parfois abondant (liquide quelquefois hémorragique avec de nombreux lymphocytes polynucléaires), fausses membranes épaisses, blanc-jaunâtre, recouvrant les faces inférieures du foie, l'estomac, la rate, le rein gauche, et rendant la dissection presque impossible.
Le foie est hypertrophié, souvent recouvert de fausses membranes disposées en tâches de bougies, non adhérentes. La face inférieure du diaphragme est souvent également recouverte par une fausse membrane. Les ganglions mésentériques sont toujours hypertrophiés et caséifiés en partie. Les poumons sunt, en général, hépatisés avec parfois des lésions blan-
ches, d'aspect tantôt en réseau donnant aux sections l'espect de noix muscades, tantôt formant des blocs de pneumonie caséeuse. L'examen microscopique révele la présence des bacilles acido-alcoolo-résistants et il est possible d'isoler les germes par culture.
Le peu de toxicité des bacilles paratuberculeux vis-à-vis des animaux, les caractères anatomiques des lésions à l’autopsie permettant seulement d'orienter le diagnostic vers ces germes encore peu ‘opnus, mais dont le biologiste ne doit pas ignorer l’existence. Les cas signalés dans la littérature sont encore peu abondants, mais cela ne tient-il pas à ce que le bactériologiste examinant une urine où il äécouvre des bacilles acido-alcoolo-résistants est, dans Fliminense majorité des cas, tenté de répondre « bacilles tuberculeux ». Souvent, les signes cliniques rappelés plus haut, coïncident avec ceux d’une tuberculose rénale vraie, et l’on sera tenté un peu vite de classer le germe reconnu par coloration.
Il faudra donc toujours effectuer, même si le médecin traitant ne le demande pas, une ou mieux, plusieurs inoculations au cobaye pour confirmer un résultat qui paraît acquis. On pourrait autrement involontairement, mais avec une part de responsabilité au moins morale, non négligeable — contribuer à des erreurs de diagnostic conduisant à une ablation rénale.
Rappelons à ce sujet, la belle observation de Dufour (35), portant sur un malade bacillaire à état général excellent et chez lequel 1l était rencontré constamment des bacilles atypiques. Les inoculations aux cobayes se montrèrent négatives et les animaux ne réagirent jamais à la tuberculine (92). Les cultures étaient abondantes, grasses, pigmentées en rouge.
Cette observation montre bien les pièges que peuvent tendre
ces germes curieux mal classés, mais auxquels le biologiste doit toujours penser lorsqu'il rédige son compte rendu analytique.
Nous rappelons que les tests biologiques habituels : réaction de Besredka, réaction de Vernes à la résorcine, vitesse de sédimentation sont, chez les tuberculeux rénaux, souvent très peu perturbées. Il a été constaté chez un malade cliniquement et bactériologiquement confirmée : un Besredka négatif, un Vernes résorcine à 14 et une vitesse de sédimentation absolument normale avant tout traitement, ces résultats confirment ceux de Legueu, Vrignaud, Maisonnet et Thevenard (75). Ces réactions ne peuvent donc pas être d’un grand ser-
vice pour le biologiste. Seuls, les caractères différentiels des cultures et l'aspect particulier des lésions de l'animal autopsié permettent l'établissement du diagnostic.
Note. —- Milieu de culture pour bacilles paratuberculeux :
Milieu de Ashby (liquide) Milieu de Dorset (solide) Phosphate bipotassique 0,20 | Phosphate bipotassique 1 gr. Sulfate de magnésium. 0,20 | Sulfate de magnésium. 1gr.
sulfate de calcium... G10MMCitraté de sodium. 0,50 CArbonatesdescalcium "5097 PASpDaragine ........... 5 gr. Chlorure de sodium... 0,20 | Citrate fer ammoniacal: traces CMOS RCE LOSC INCe Mer 76 cm3 DUO AO HR EME OOD'éMSMEAURr NET ee 1.000 cm3
Le milieu est solidifié par addition de gélose.
Milieu de Cosin (solide)
CElOS CPR PR ne Éréenue FAITS CGINCÉTIRERR NP 0. MECS T 1 UC Phosphate de potassium ........ iv SD DA DORE TE Tee 1Sor PR TU ee one 1.000 cm3 GEST IANRO IE HERRrE TE 1 p. 1.000
Les cultures peuvent être effectuées également sur milieu classique de Lowenstein ou sur milieu de Sula. Le milieu de Sula expérimenté à l’Institut d'hygiène de Prague par plus de 30.000 cultures, s’avère particulièrement favorable à l'ensemensement des produits pathologiques présumés bacillifères.
Milieu original de Sula
Phosphate disodique....... D ET OÙ ÉhosphatéesDipolassique 7 rc 1650 SUItate deUTASNésilin........... 0600 GCitrate de sodium.:.-....… Mes ESP AN SDAE AO OST etre ee se PTE RORTENS PE 0 EEE RE CORSr am) CVS LTÉE En. dau decee seen AXE) Citrate ferro-ammoniacal ......... 0 gr. 05 GIVcéRineR EC he 20 cm3 Vert malachite une solution aqueu-
SORA ID PL OUUPE EEE he ere 2 cm3
Fauidistilieen 7... M ne ; 1 litre
Causes d'erreur dans le diagnostic de la tuberculose expérimentale du cobaye
Pour éliminer des causes d’erreur dans le diagnostic de la tuberculose expérimentale du cobaye il faut connaître
1) La pseudo-tuberculose du cobaye. Souvent aigüe, épidémique, présente aussi des formes chroniques avec cachexie progressive. À l’autopsie : sérosité péritonéale ; granulations épiploïques ; foie et rate hypertrophiés avec gros nodules blancs, mamelonnés, saillants ; gros ganglions mésentériques suppurés ; parfois nodules pulmonaires. L'examen microscopique ne révèle pas de bacilles de Koch mais le bacille de Malassez- Vignal en amas compacts ou en courtes chaînettes ; bacille immobile, gram négatif, à coloration bipolaire, se développant facilement sur tous les milieux usuels et ne liquéfiant pas la sclatine.
2) Les adénites du cobaye dues à des pyogènes banaux ou à des streptobacilles anaérobies, gram-négatifs, disposés en chaînettes. Ce sont le plus souvent des adénites cervicales suppurées.
3) Les nodules du foie dues à la coccidiose du cobave.
4) La tuberculose spontanée du cobaye. Exéeptionnelle. Elle n’apparaît qu'après un contact d’au moins six mois avec des cobayes tuberculeux. L'évolution clinique est longue, pouvant dépasser un an, sans symptômes apparents. (Gardner L. N. et Fox F. W. 1925 (45).
À l’autopsie : tantôt tuberculose pulmonaire avec gros nodules caséeux ou même des cavernes ; atteinte des ganglions trachéo-bronchiques ; lésions de dissémination discrète (rate).
Tantôt tuberculose digestive avec caséification des ganglions mésentériques et adénopathies plus ou moins généralisees.
5) La possibilité de bacilles acido-résistants saprophytes dans la rate des cobayes neufs. Ce sont des bacilles qui se rapprochent des bacilles aviaires ou des paratuberculeux. Ils ne déterminent aucune lésion apparente chez le cobaye mais pourraient le rendre allergique ; la culture de la rate les met en évidence. La contamination des animaux est probablement d'origine alimentaire.
Lorsque la mort de l’animal est survenue dans les premiers jours qui ont suivi l’inoculation, le bacille tuberculeux n’est jamais responsable de ce décès. L’autopsie révèle habituelle-
Fer ment une suppuration putride étendue de la région inoculée avec parfois foyers métastatiques (foie, etc... On peut chercher à éviter ces infections en traitant systématiquement les cobayes par les sulfamides ou la pénicilline chaque fois que l’on injecté un produit infecté ou que l’on constate un abcès au point d’inoculation.
D'autre fois le décès est dû à une maladie spontanée du cobaye. '
Maladies spontanées des cobayes. — Il n’est pas rare que lautopsie d’un cobaye neuf trouvé mort révèle une pneumonie, une broncho-pneumonie, une pleurésie, une péritonite.. L’ensemencement du sang du cœur met alors souvent en évidence un pneumocoque ou un paratyphique B. Il faut en rapprocher la maladie du nez (jetage séreux, puis purulent, amaigrissement, dyspnée, lésions hépatiques, péritonéales ou pleuro-pulmonaires-. Dans ces cas on isolera les animaux ayant été en contact avec l’animal mort car il s’agit d'infections épidémiques. À
Si les recherches bactériologiques courantes restent négatives il faut penser à une infection à virus, en particulier à la pneumopathie des cobayes ou à l’action du froid.
Il faut savoir que l'injection d’un matériel infectieux quelconque peut mobiliser, un germe vivant à l'état latent dans l'organisme du cobaye. C'est là une cause d'erreur générale de l’expérimentation sur lanimal.
Néanmoins aucune erreur n’est à craindre si l’on exige pour le diagnostic, la constatation d’une adéropathie régionale caséeuse et la mise en évidence de bacilles acido-résistants sur les frottis.
