MATERIEL ET TECHNIQUES
Nous avons entrepris l'étude des cellules de Kultschitzky au niveau du duodénum de Cobayes adultes et d’embryons de Cobayes de sept centimètres de longueur.
A) De minces fragments de duodénum furent prélevés et aussitôt fixés.
1° Au liquide de Bouin et au formol à 10 %, inclus en paraffine et débités en coupe mince.
Nôus avons pratiqué les trichromes usuels:
Hemalun-Eosine-orange; Prenant; Mallory.
2° Au liquide de Regaud. Post-chromisation 10 jours dans le bi-chromate de potasse à 3 % et inclusion en paraffine.
Sur coupes de 3 y furent pratiquées les colorâtions électives à l’hématoxyline de Regaud. |
3° Au liquide de Cajal et de Da Fano, suivi d’imprégnation au nitrate d'argent à 1,5 % selon la technique employée pour la mise en évidence de l'appareil de Golgi.
B) De minces fragments de duodénum fraîchement prélevés furent traités suivant diverses modalités techniques employées pour l'étude histo-chimique des enclaves granuleuses des cellules de Kultschitzky.
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1° Réactions des Polyphénols.
Réaction chromaffine et iodaffine.
A) Après trois jours de fixation au liquide Regaud et inclusion à la paraffine les coupes furent montées sans aucune coloration. |
B) Après une fixation de trois jours au formol jiodate (Lison 1931).
OT RE ue PR RU re 10 cc ROMATÉL TON DRE to Ve LU) hr Gr.
2 BIS AUS FAST U D LR RE RSA RCE 70 100 cc
et inclusion à la paraffine les coupes furent montées sans coloration. Ces deux modalités techniques permettent de colorer en brun (technique A) et en rouge foncé (technique B) les granulations argentaffines.
2° Réaction argentaffine:
a) Après fixation au liquide de Bouin et inclusion à la paraffine les coupes furent traitées par les modalités techniques indiquées par Masson.
48 heures dans le liquide de Fontana.
Lavage rapide à l’eau distillée.
Viro-réaction et coloration à l’'Hémalum-Erythrosine.
b) Après fixation au formol, acétate de plomb. Même technique qui ci-dessus les granulations argentaffines sont: noir foncé
3° Azo-Réaction.
Après fixation dans le liquide suivant
Acide acétique . ... 5 cm Acétate de plomb... 5 grs Formol à 40 % .... 10 cc.
Aer sn ect 100 cc
et inclusion à la paraffine les coupes furent traitées selon les modalités indiquées par Lison.
Le sel de diazonium employé étant le diazo de la diani-
zidine.
Préparation du réactif :
Diazotation. — Dianizidine en solution dans l’eau: + HCI à 36° B refroidi à + 4. |
Ajouter progressivement et en agitant NO?-Na à 5 % refroidi à 4°, maintenir le mélange vingt ou trente minutes à la glacière.
Au bout de ce temps, la diazotation est faite. Le mélange ne se conserve que 24 à 48 heures à la glacière.
Réaction de coapulation. — La solution diazotée froide est alcalinisée par une solution concentrée et froide à 4° de CO“ Na’. |
Il se dégage CO? et la solution jaunit légèrement lorsque l’alcalinité voulue est atteinte. Cette solution ne se conserve qu’un quart d'heure à froid. à
Plonger les coupes 30 secondes dans le réactif, rincer sérieusement, déshydrater et monter; les grains sont colorés en jaune verdâtre.
