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mité avec précision. On se contente d'observer une dissolution plus ou moins complète de l’albumine et nous verrons, du reste, que bien des essais des pharmacopées étrangères employant l'albumine d'œuf présentent cette même imprécision. En se basant sur des remarquesanalogues à celles que nous venons designaler, MM. Castille et Pourbaix [8] ont préconisé un essai plus précis, que nous allons décrire :

On maintient pendant 10 minutes dans l’eau en ébullition un œuf de poule conservé au frais et vieux de deux à dix jours.

Après refroidissement, on enlève le blanc qu'on divise en le faisant passer par frottement dans le tamis n° 100. On introduit 10 grammes dans un mortier, on y ajoute 0 gr. 10 de pepsine puis, petit à petit, tout en triturant vigoureusement, 60 cm° d’eau distillée chauffée à + 50° contenant 3 cm° 5 d'acide chlorhydrique dilué officinal. On introduit ce liquide dans un matras d'environ 250 cm et on rince le mortier avec 40 cm? d’eau distillée chauffée à + 50°. On plonge le ballon dans un bain d’eau, chauffé de telle façon qu'un thermomètre maintenu dans le liquide pepsique marque constamment + 45°. On agite de une à dix minutes. Après deux heures de digestion, on verse le contenu du ballon dans une éprouvette cylindrique de 100 cm de capacité et d’un diamètre qui ne dépasse pas trois centimètres. On laisse reposer pendant 4 heures; le dépôt ne peut être supérieur à deux centimètres cubes.

Ainsi, MM. Castille et Pourbaix prescrivent de triturer l'albumine avec la pepsine dans la solution acide comme dans le procédé anglais et américain.

Eu outre, ils opèrent la trituration de l’albumine et de la pepsine dans l’eau préalablement portée à la température de + 50°. La digestion est opérée à + 40e.

La pepsine, de cette façon, n’a pas son pouvoir digestif modifié par le contact de l’eau acidulée avant d'entrer en digestion, et l’atbumine ne risque pas d’être plus ou moins transformée avant l'introduction de la pepsine.

Cet essai se rapproche, comme nous le verrons par la suite, de celui de la pharmacopée des Etats-Unis, quant au contrôle de la digestion; on observe, en effet, le dépôt d’ailbumine au bout

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d’un temps donné. Il a l'inconvénient de demander plusieurs heures avant qu’on puisse faire la lecture, et on a ainsi, un essai aussi long et moins précis que celui de la pharmacopée anglaise.

C) Essai de la Pharmacopée Anglaise

D'après la pharmacopée anglaise, la pepsine est une diastase obtenue avec les estomacs frais et sains de porc, mouton, veau.

« C’est une poudre brun jaunâtre, pâle, ou écailles translucides, ayant une odeur faible. Elle doit être capable dans les conditions ci-dessus, de liquéfier 2500 fois son poids de blanc d'œuf en l’espace de six heures. La solution obtenue étant faiblement opalescente ».

La pharmacopée anglaise prescrit pour la pepsine le mode d'essai suivant :

1° Blanc d'œuf. — Préparer un blanc d'œuf coagulé en faisant bouillir des œufs frais dans l’eau pendant 15 minutes. Les tremper dans de l’eau froide jusqu'à ce qu'ils soient froids. Séparer les blancs; les passer à travers un tamis ayant 12 mailles au centimèêtre. Le produit doit être utilisé avant qu'il ait perdu de l’humidité par évaporation.

2° Solution de pepsine. — Triturer 0 gr. 25 de pepsine avec 1 gramme de chlorure de sodium dans un petit mortier jusqu'à mélange intime. Ajouter de l’eau acidulée (3°) et continuer à triturer ; transvaser dans un flacon jaugé de un litre. Laver le mortier à l’eau acidulée et ajouter les eaux de lavage au contenu du flacon de façon à obtenir 1000 cm.

Agiter fréquemment pendant 6 heures et immédiatement avant de s’en servir.

3° Eau acidulée. — Obtenue en préparant et diluant 6 cmÿ 5 d'acide chlorhydrique à 1000 cm° avec eau distillée.

4 Titrage. — 20 cm° de la solution de pepsine ainsi obtenue (2°) sont introduits dans un flacon de 250 cm°. Triturer d'autre part, 12 gr. 50 de blanc d'œuf fraîchement préparé (1°) dans un petit mortier avec 50 cm d’eau acidulée jusqu’à obtention de granules uniformes.

2e AU =

Transvaser dans le flacon de 250 cm, rincer le mortier avec 50 cm° nouveaux d’eau distillée acidulée, les ajouter dans leflacon. Immerger ce flacon dans un B. M. de telle façon que son contenu soit à un niveau plus bas que l’eau dans le B. M., faire

digérer à + 40-44° en agitant à intervalles de 15 minutes pendant 6 heures.

REMARQUES AU SUJET DE CET ESsal. — Ce procédé est remarquable par la précision de ses détails ; mais il a l'inconvénient d'être très long.

Dans ce procédé on laisse la pepsine en contact avec la solution chlorhydrique pendant 6 heures.

Nous nous sommes demandés si en variant légèrement ce temps de contact, nous n’aurions pas de différence dans nos résultats.

Pratiquement, les résultats que nous avons obtenus sont les mêmes avec des solutions de pepsine vieilles de 6 heures, 12 heures et 24 heures.

Ainsi, dans l'essai anglais, entre 6 et 24 heures, le pouvoir digestif de la pepsine ne semble pas modifié; on peut donc laisser la pepsine toute une nuit en contact avec la solution chlorhydrique et commencer l'essai le lendemain matin, à condition d’agiter le plus souvent possible cette solution.

La matière passive est préparée en coagulant exactement pendant 15 minutes un œuf de poule frais. La pharmacopée anglaise fait remarquer judicieusement que l’albumine doit être employée avant qu’elle ait perdu de l’eau par évaporation.

On peut préparer la solution acide en mesurant à l’aide d’une bonne burette les 6 cm°5 d’acide chlorhydrique dans un peu d’eau distillée et en complétant le volume à 1000 cm*.

. Nous employons dans cet essai 20 cm de solution de pepsine à O0 gr. 25 pour 1000, ce qui correspond à 0 gr. 005 de pepsine.

Ces 5 cg. devront dissoudre dans les conditions du Codex

anglais 12 gr. 50 de blanc d'œuf, soit 2.500 fois leur poids.

D) Essai de la Pharmacopée des Etats-Unis

Cette pharmacopée exige que la pepsine digère au moins 3000

ANS fois son poids d’albumine d'œuf fraichement préparée et désagrégée.

Il ne s’agit pas là d'une vraie digestion, mais en réalité d’une tranformation peu profonde de la matière passive, puisque cette pharmacopée n’admet, comme nous allons le voir, qu’une liquéfaction approximative de l’albumine.

Essai. — Mélanger 25 cm° d’acide chlorhydrique re avec 275 cm® d’eau distillée.

Dissoudre 0 gr. 10 de pepsine dans 150 cm de cet acide.

Choisir un œuf de poule qui ait entre 5 et 12 jours et ait été conservé en lieu frais, et l'immerger dans l’eau bouillante durant 15 minutes.

Aussitôt que l'œuf est suffisamment refroidi pour qu'on puisse le saisir, enlever la coque, la pellicule et tout le jaune et passer l'albumine à travers un tamis n° 40 soit de.crin, soit métallique, bien propre et bien sec.

Rejeter la première portion qui passe, et placer 10 gr. de la suivante dans un flacon de 100 cm° à large ouverture.

Ajouter immédiatement 20 em de l'acide et bien agiter le mélange avec un agitateur rodé à bout de caoutchouc de façon à séparer soigneusement les particules d’albumine les uns des autres.

Rincer l’agitateur avec 15 cm° nouveaux de l'acide, et après avoir chauffé le mélange à + 52°, ajouter exactement 5 cm* de la solution acidulée de pepsine. Enfin boucher le flacon soigneusement, le renverser trois fois et le placer dans un bain soigneusement réglé dé façon qu'il se maintienne à + 52.

Laisser le flacon à cette température pendant 2 h. 1/2 en agitant le contenu toutes les dix minutes en le retournant.

L'enlever alors du bain, verser le contenu dans une fiole conique d’un diamètre ne dépassant pas un centimètre au sommet, et transporter l’albumine d'œuf non digérée qui adhère aux parois du flacon dans la fiole à l’aide de petites quantités d’eau distillée, (15 em® environ à la fois) jusqu’à ce que la masse totale employée mesure 50 cm*. Bienagiter le mélange et laisser déposer 1/2 heure.

L’albumine déposée non digérée ne doit pas mesurer plus de 1.cm. de hauteur.

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