CHOIX DE LA METHODE

Plusieurs procédés ont été préconisés pour doser exactement les albumines totales, la sérine, la globuline.

Les techniques très nombreuses peuvent être ramenées à 3 méthodes type:

méthode réfractométrique ; méthode azotométrique ; méthode gravimétrique.

Les auteurs français sont unanimes à n’accorder une valeur entière qu’à la méthode pondérale, la. seule qui, dans les mêmes conditions et chez le même sujet, donne toujours des résultats essentiellement comparables.

Les procédés de dosage pondéral même, s'ils arrivent tous à des résultats sensiblement analogues, varient considérablement dans les matériaux et la marche employés.

Notre but n’est pas de les énumérer ici.

Il faut en effet, pour qu’une méthode de laboratoire présente un réel intérêt clinique, qu’elle remplisse un minimum de conditions:

valeur scientifique reconnue suffisante tout d’abord,

réalisation aisée avec un petit nombre d'appareils et de réactifs dans un laboratoire outillé en vue d'analyses de chimie biologique courante, quodidienne, clinique, répétons-le.

Le procédé de KAySER, qui permet une évaluation exacte par pesée, nous a paru à la fois le plus simple et le plus fidèle. C’est celui qu’emploie toujours notre ami le Docteur RIBERE. Ses résultats lui ont toujours donné toute satisfaction. La vérification a été effectuée sur le même sérum par 2 et même plusieurs dosages. Des sujets normaux ont régulièrement fourni des chiffres d’albumines parfaitement acceptables.

Cette méthode pondérale a été modifiée dans quelques détails par le D: RIBERE qui s’est efforcé de simplifier tout en supprimant des causes d’erreur minimes sur lesquelles nous n’insisterons pas.

Nous ne saurions d’ailleurs mieux faire que réprendre ici l’exposé de son travail décrit par le D' CH. IMBERT dans sa thèse inaugurale.

Principe de la méthode de Kayser

1)Dans un premier temps, on précipite les albumines totales du sérum par l’action d’un mélange à parties égales d'alcool à 95° et d’acétone. Après dessication, on pèse le coagulum albumineux ainsi obtenu. Un tel mélange paraît réaliser la floculation de la totalité des albumines; d’autre part, comme cette floculation s’opère au voisinage du point isoélectrique moyen des albumines (Sérine, pH=4.7; Globuline, pH — 5,4), celles-ci sont précipitées à l’état de pureté sensiblement absolue.

D'ailleurs, que l’on utilise le mélange précité, l’al-

cool à chaud ou l’ébulition en milieu acide chargé de sels neutres, les résultats sont comparables.

2) Dans un deuxième temps, on sépare sérine et globuline en précipitant celle-ci par du sulfate de magnésie à saturation et en retenant par filtration le précipité obtenu de la sorte.

Puis, on coagule par simple ébullition la sérine en solution dans le filtrat; pour plus de sécurité on débarrasse de ses impuretés le précipité de sérine qui est ensuite desséché et pesé.

Technique de la méthode de Kayser

On prélève par ponction veineuse 40 cc. de sang environ que l’on recueille dans un verre à pied conique, bien sec pour éviter le laquage du sérum.

Dès coagulation, on facilite la rétraction du caillot et la séparation du sérum en détachant le caillot des parois du verre à l’aide d’un agitateur.

Le sérum décanté et centrifugé à grande vitesse pendant 10 minutes (on élimine ainsi les globules rouges qui auraient pu demeurer en suspension), sera maintenant utilisé pour les 2 dosages: albumines totales et sérine.