I. — Dosage des protéines totales
1) On équilibre 2 filtres Berzélius de 11 cm. de diamètre, desséchés au préalable une demi-heure à l’étuve et parfaitement équilibrés, et on les dispose, intimement appliqués l’un contre l’autre, sur un entonnoir à filtration rapide de 60° d’angjle, puis on les imbibe d’eau distillée. L'avantage d’employer 2 filtres superposés réside dans ce fait que le filtre inférieur qui sert de tare subit exactement les mêmes opérations que le filtre supérieur qui retient le précipité.
2) Dans un verre cylindrique on verse successivement: 25 ce d'alcool à 95°, 25 cc d’acétone purifiée, en ayant soin d’agiter le mélange.
Puis on fait tomber goutte à goutte 5 cc de sérum avec une pipette à filtration lente en agitant sans arrêt.
Un coagulum albumineux se forme que l’on jette, au bout d’un certain temps, sur les 2 filtres Berzélius précédemment préparés.
On filtre alors au moins à 2 ou 3 reprises en détachant chaque fois du verre qui contenait le mélange primitif, grâce à un agitateur et quelques centimètres cubes d’alcool, les fragments de précipité qui adhèrent aux parois et au fond du verre.
Lorsque le filtrat est parfaitement clair, op lave plusieurs fois le précipité à Palcool à 95° puis à léther pour débarrasser le coagulum des traces de matières grasses qu’il peut avoir entraînées par adsorption.
Séchés d’abord à l'air libre, les filtres sont ensuite placés dans la même capsule de porcelaine et
portés à l’étuve à 110° pendant 24 heures, c’est-àdire jusau’à dessication complète,
Le lendemain, on sépare les filtres avec des pinces à dissection et on les pèse séparément à plusieurs heures d'intervalle jusqu’à ce que le précipité ait un poids constant, ce qui représente la dessication totale.
A la microbalance, le filtre supérieur aui a re-
tenu le précipité montre un excès de poids sur le
filtre inférieur. Cette différence représente la masse d’albumines totales contenue dans 5 ce du sérum à examiner.
Le chiffre obtenu exprimé en milligrammes et multiplié par 200 représente en grammes le poids d’albumines totales contenu dans un litre de sérum. Soit P.
IT —— Dosage de la sérine.
Dans une éprouvette graduée de 125 ce à bouchon, on mesure 100 cc d’une solution sursaturée de sulfate de magnésie à laquelle on ajoute 10 cc de sérum.
On agite lentement pour éviter la formation de mousse albumineuse et on laisse au repos une heure. La globuline s’est séparée sous forme de fins flocons qui tombent au fond du récipient.
Ce temps passé, et après avoir agité de nouveau, on verse d’un seul coup le contenu de l’éprouvette sur un filtre Chardin plissé et on reprend le filtrat jusqu’à ce que le liquide soit parfaitement limpide.
50 cc du filtrat sont alors prélevés dans une cap: sule de porcelaine et additionnés de:
Formol neutralisé à 20 % = 2 cc. Acide acétique à 1/10 — XV gouttes.
Le pH de notre filtrat est alors aux environs de 4,7, chiffre optimum.
La capsule de porcelaine est mantenant chauffée jusqu’à petite ébullition durant une minute environ, tout en agitant. La sérine précipite rapidement et trouble la liqueur.
On filtre sur 2 filtres Berzélius préparés comme il a été dit précédemment pour le dosage des albumines totales.
On rince alors la capsule à l’eau distillée acétique à 1 0/00, bouillante, de façon à entraîner toutes les parcelles de coagulum adhérentes aux parois . du récipient.
Pour cela on rassemble vers le fond conique du filtre, sous le jet d’une pissette, la sérine coagulée en réalisant un dispositif pratique qui permette de régler à volonté le débit d’eau acétique bouillante. L’épurage s'effectue ainsi presque automatiquement avec un minimum de surveillance.
On poursuit l’opération jusqu’à ce aue l’eau de filtration ne contienne plus trace de sulfate de magnésie, c’est-à-dire lorsque le liquide additionné de quelques gouttes de chlorure de baryum à 1/10 ne provoque plus le moindre louche.
On fait alors passer successivement 10 cc environ d'alcool à 95° puis un même volume d’éther.
On opère ensuite de la même façon que pour les albumines totales: étuve, pesée.
Si p représente le poids du précipité de sérine après dessication complète, exprimé en milligrammes,
V le volume total du mélange (solution de sulfate de magnésie + sérum) contenu dans l’éprouvette graduée; soit 110 cc,
v le volume du prélèvement effectué dans ie filtrat contenant en solution la sérine; soit 50 cc,
le poids de la sérine par litre de sérum est donné par la formule
p X V X 100 Ps.= Y ou encore p X 110 X 100 Ps =
Ps = p X 2,2 exprimé en grammes. La teneur du sérum en globuline par titre est donnée pat simple soustraction Pa — P — Ps.
IT. — Le quotient albumineux du sérum.
Connaissant dès lors le taux de sérine et de globuline par litre de sérum, il convenait d'exprimer par un chiffre le rapport de ces 2 variétés.
Certains auteurs le représentent ainsi
Globuline 0/06
Sérine 0/00
Avec ACHARD et ses collaborateurs qui le désignent sous le nom de « quotient albumineux du sérum» nous préférons choisir conventionnellement le rapport inverse:
Sérine 0/00 S ou Globuline 0/00 G
L'équilibre protidique du sérum chez l'individu à l’état de santé
Détermination du taux des albumines totales
Détermination du quotient albumineux
Même en ne tenant compte que des résultats acquis par la méthode pondérale, la plupart des expérimentateurs donnent des chiffres sensiblement comparables en ce qui concerne les albumines totales, mais en désaccord fréquent pour ce qui est du quotient albumineux.
En partant de la méthode que nous venons d’indiquer, les moyennes calculées sont les suivantes chez les sujets normaux:
Albumines totales :.... 75 à 89 0/00 Sétihe L RSAlE etil 45 à 54 0/00 HOTELS bis à ea 27 à 38 0/00
Quot. albumin. du sér. : 1,30 à 1,95
Ce sont d’ailleurs les chiffres aue donne WALLICH . dont la thèse fait autorité en la matière.
Précisons, avant de présenter nos observations et les résultats de nos dosages, dans quelles conditions ils ont été faits:
1° Il ne nous a pas été possible de placer nos malades dans les conditions souhaitées par WALLICH, en ce qui concerne leur régime. L’indocilité des sujets indigènes rend difficile l'emploi d’un régime restrictif tel que le conseille WALLICH (régime lacto-
végétarien). Tous nos malades ont été laissés à un régime hospitalier commun, en réalité nettement hypoazoté. à
2° Nous avons été très strict, par contre, quant à la seconde condition: prise de sang pratiquée le matin entre 9 et 10 heures, le sujet étant à jeun depuis la veille au soir.