METHODES DE DOSAGE
1. — DES PROTEINES TOTALES DU SERUM 2. — DE LA SERUM ALBUMINE 3. — DE LA SERUM GLOBULINE
Pour déterminer les albumines du sérum, nous disposons de méthodes physiques, colorimétriques et chimiques. Nous énumérerons simplement les deux premières, leur intérêt et leur précision étant de beaucoup inférieurs aux méthodes chimiques seules employées à l’heure actuelle.
Méthodes densimétriques
Les variations de concentration du sérum en albumines entraînent une variation de densité. Les procédés à la goutte de Hammeschlag et Lloyd Jones consistent à faire tomber une goutte de sérum dans une série de tubes contenant un mélange en proportions variables de benzine et de chloroforme, ou bien des dilutions variables de glycérine et d’eau. Lorsque la goutte reste sans monter, ni descendre, on en conclut qu’elle a la même densité que le mélange.
os
Outre qu’elle ne renseigne que sur le taux total de protéines, cette méthode manque complètement de précision.
Méthode néphélométrique
Elle consiste à mesurer au néphélomètre l’intensité du trouble obtenu en faisant floculer à la limite les albumines du sérum et à la comparer à celui réalisé sur des solutions titrées d’albumine traitées dans les mêmes conditions.
Cette méthode a les mêmes défauts que la précé-
dente.
Méthode réfractométrique
Cette méthode a été autrefois très employée. Elle est basée sur le pouvoir de réfraction des albumines. On emploie l’appareil de Zeiss à immersion et a prisme auxiliaire. Cette méthode rapide et ne nécessitant que quelques gouttes de sérum, a le grave défaut d’être influencée par les autres corps du sérum ayant une influence sur la réfraction (lipides en particulier) ainsi que l’ont montré Achard et Grigaut [1], Chiray et Demanche {7], Cowaerts [11] et Guillaumin [15].
[1] AcHARD, GRriGAUT et Copounis. C. R. Biol., n° 9, 1930, p. 679.
[7] CHiRay et DEMANCHE. C. R. Biol. 1907, t. 68, p. 235.
[11] Gowazrts. C. R. Soc. Biol. 1923, p. 24-28.
[15] GuizLaumin, R. WaHL et LAURENCIN. Bul. Soc. Chi. Bio., t. 11, mars 1929. p. 387.
Cette méthode ne renseignant d’ailleurs que sur la totalité des albumines est donc complètement à abandonner.
Méthode colorimétrique
Cette méthode décrite par Wu [32], puis par Greenberg [13] est basée sur la réaction que donne l’acide phosphomolybdotungstique avec les phénols et en particulier avec la tyrosine. La séparation des différentes protéines se fait par l’un des procédés usuels. L’étalon servant à la comparaison colorimétrique est préparé avec de la tyrosine et l’on a déterminé les coefficients exprimant la sérum-albumine et la sérumglobuline.
Cette méthode assez rapide est très imprécise et peut amener des erreurs assez importantes, aussi estelle presque complètement abandonnée.
Méthodes chimiques
Ces méthodes peuvent se diviser en méthodes gravimétriques et en méthodes azotométriques. Elles dérivent des travaux de Piettre et Vila [25], de Pinkus [26], de Porges et Spiro [27], de Homer [16], Mel-
[32] H. Wu. Jour. Biol. Chemi., t. 33, 1922.
[13] GREENBERG. Jour, Biol. Chemi., LXXXII, 595, 1929.
[25] PreTrRe et Via. C. R. Ac. Sc., 14 juin 1920. Bul. Soc. Chi. Bio., mars 1921, 483.
[26] Pinus. J. Physiol. 1901, t. XXVIL, p. 57.
[27] Porces et Spiro. Phys. u. Pathol. 1903, t. IIX, p. 2717.
[16] Homer (A.). Biochem. 1909, t. XIII, p. 278.
lamby [24] et surtout de Howe [17]. Toutes sont basées sur les faits suivants :
La sérum-albumine est soluble dans l’eau, les solutions salines diluées, la solution saturée de sulfate de magnésie, la solution de sulfate d’ammoniaque au 1/2 saturée, la solution de sulfate de sodium à 222 %0, la solution aqueuse saturée de CO?. Elle est insoluble dans la solution saturée de sulfate d’ammoniaque.
La sérum-globuline est soluble dans les solutions salines diluées, elle est insoluble dans l’eau pure, dans la solution saturée de sulfate de magnésie, dans les solutions saturées et 1/2 saturées de sulfate d’ammoniaque, dans les solutions de sulfate de sodium à 222 060, dans la solution saturée de CO".
Seules ces méthodes sont capables de donner des indications exactes sur les matières protéiques du sérum.
