INCONSTANCE DU CORPS PARABASAL

1° Les Trypanosomes aparabasaux des souches normales

Depuis longtemps on à remarqué, dans le sang de l'homme ou autres mammifères renfermant naturellement ou expérimentalement des trypanosomes, des individus dont lé corps parabasal n'apparaissait pas sur des frottis colorés par la méthode de GiEmsa. Ce fait signalé par Kunicke pour Tr. brucei fut confirmé

(1) WENRICH (1921) a signalé ce fait également à propos de TRICHOMONAS MURIS.

pour les espèces pathogènes par Lavier (1927 a et 1928 d) qui en a compté 0,5 à 10 % selon les souches. Que cette disparition soit due à une suppression pure et simple ou à une perte de colorabilité il y avait là une modification digne de retenir l'attention. Mais la rareté relative de ces individus permettait de les regarder comme des monstres, au même titre, par exemple, que ceux dépourvus de noyau (observés également assez souvent (1) et n’autorisait pas à affirmer la conservation de leur vitalité et de leur pouvoir de reproduction.

2° Souche naturelle primitive de Trypanosomes aparabasaux

Il faut, pour apprécier efficacement ces individus exceptionnels, les rapprocher du Trypanosoma equinum. Ge protiste est l'agent pathogène découvert par ELMASSIAN (1901) chez les chevaux atteints du mal de caderas, en Amérique du Sud.

VOcEs (1902), décrivant le parasite, ne parle pas de corps parabasal. Mais LIGNÈRES (1902), puis ELMASSIAN et MIGONE (1903) soulignent l’absence de cet organite, ce que confirment BACHMANN et de ELIZALDE (1903). LAVERAN et MESNIL (1902) affirment qu'ils en voient un. Il n’est pas douteux qu'ils interprètent ainsi le grain basal, avec qui ils l'ont confondu (1904 et 1912) (2).

(1) LAVIER (1927 et 1928) e‘tnous-même chez des souches de TR, du groupe BRUCEI, Sur des souches ‘de TR. EVANSI et de TR. FQUIPERDUM.

(2) En 1912, dans leur traité « Trypanosomes et trypanosomiases » ; à la page 58 ils écrivent : le centrosome, chez TR. EQUINUM « est assez peu visible pour que quelques observateurs aient pu nier son existence. En réalité, le centrosome existe, mais il est très petit, et il se colore comme le flagelle, ce qui le rend moins visible encore ».

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Il n’est pas contesté actuellement que le Tr. equinum soit dénué de corps parabasal. Il ne s'agit plus ici de cas rares ou exceptionnels.

Voici donc un flagellé possédant d'autre part tous les autres éléments morphologiques des tyrpanosomes, et qui, quoique privé de tout corps parabasal, jouit d’une vitalité, d’une mobilité, d'une virulence comparables à celles de ses congénères.

Cette espèce pouvant se passer des services du corps parabasal, les autres espèces pourraient-elles survivre sans son secours ? Les faits répondirent quelques années plus tard.

3° Souches artificielles de Trypanosomes aparabasaux

WERBITZKI (1910) chservant une souche de Trypanosoma Brucei utilisée pour l'étude de la résistance aux médicaments, et qui avait subi un traitement prolongé à la pyronine, remarqua que la plupart des individus étaient dépourvus de corps parasal (il le nomme blépharoplaste). Il réalisa expérimentalement cette disparition par injection à des souris naganées de différents produits chimiques de la série de l’oxazine et de celle de l’acridine (voir chap. III, les formules de ces corps).

L'autorité d'EHRLICH, sous la direction de qui se faisaient les expériences, attira l'attention de quelques protistologues sur ces résultats. Les travaux de WER- BITZKI, poursuivis par KUDICKE (1911) furent repris et étendus par LAVERAN (1911, 1911 a) puis LAVERAN et Roupsky (1911, 1911 a). Tous ces auteurs avaient saisi l'importance théorique de cette modification quant à la valeur du corps parabasal.

WERBITZKI constate que le traitement d’une souris

uaganée par la dose maxima de pyronine (1) fait disparaitre le corps parabasal chez la moitié environ des trypanosomes. Mais le premier passage à une autre souris amène le retour à une souche normale. De même par passage à travers quelques souris d’un mélange de la souche traitée et de la souche normale, la première est bientôt complètement supplantée par la seconde. Cela tendrait à prouver une diminution de la vitalité des trypanosomes privés de leur corps parabasal.

Cependant, en traitant par le colorant non seulement la souris initiale mais encore celles qui héritent de son virus, on obtient rapidement une race complètement « ablépharoplastique » (pour employer un terme dérivé de la nomenclature de l'époque et employé par tous les auteurs qui se sont occupés de la question).

Une première race ainsi créée s’est conservée intacte sans nouveau traitement à travers 15 souris, puis revint peu à peu au type normal, à travers les 6 à 8 souris suivantes.

Une seconde race, due aussi à la pyronine, gardera ses Caractères pendant de nombreuses années, et semblera définitive.

Dans ces souches, les trypanosomes, observés à l’état frais, témoignent d'une mobilité aussi grande que celle de la souche normale. Cela est incompatible avec l'hypothèse d’une fonction cinétique externe du corps parabasal. Dans le sang des rats et des souris la progression du nombre des parasites est du même ordre que pour une souche normale, et les hôtes meurent dans le même temps (LAVERAN 1911). La faculté de

(1) W. considère Comme telle une dose de 6 mg. Nous avons impunément administré à des souris une ou plusieurs doses de 15 mg.

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reproduction et la virulence ne semblent donc pas dépendre de la présence du corps parabasal. Cependant LAVERAN notait une plus grande survie moyenne des cobayes infectés par le trypanosome de WERBITZKI que chez ceux infectés par la souche mère de Trypanosoma& brucei var. ferox (EHRLICH) et cela par une plus grande tendance aux infections sub-chroniques (ce qui n'exclut pas l'existence de formes aiguës).

Des expériences de LAVERAN il résulte que les propriétés sériques des animaux infectés par la souche « ablépharoplastique » sont moins intenses que celles provoquées par l’action de la souche normale.

Tous ces travaux de WERBITZKI, KUDICKE, LAVERAN et ROUDSKyY se ressentent quant à l’hétérogéneité de la nouveauté du problème et mériteraient, après l'abandon où ils sont tombés, d’être repris d’une façon méthodique et soutenue, avec l’aide des dernières connaissances acquises sur la morphologie et la biologie du corps paräbasal.

Il est établi que les substances colorantes déterminant la disparition du corps parabasal agissent directement sur ce dernier. {n vivo et in vitro ils colorent rapidement l'organite en question, sur le trypanosome encore vivant, à l'exclusion de toute autre partie du parasite.

WERBITZKI envisageait trois raisons possibles à la disparition du corps parabasal : 1° destruction in situ ; 2° conservation avec perte du pouvoir de fixer les couleurs ; 3° émigration dans le noyau.

KUDICKE ajouta une hypothèse qui semble correspondre à la réalité : lors de la division du trypanosome le corps parabasal ne suivrait pas le granule basal et le flagelle dans leur processus de multiplication.et, l’un

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des flagelles restant associé au Corps parabasal, l’autre en serait dépourvu (1).

Ce mode de genèse des individus incomplets coexiste sans doute avec le premier mode considéré par WERBITZKI. En effet on peut observer, au cours de l'action des produits provoquant la disparition des corps parabasaux, toutes les dimensions du corps arabasal intermédiaires entre la normale et la disparition totale. Cette atrophie progressive serait due à une attaque chimique qu'on peut considérer comme une auto-oxydation, Car la présence de réducteurs tels que le cyanure de potassium ou les alcaloïdes empêche même la coloration (LAVERAN et Roupskv, 1911 a). Mais on peut l'observer aussi dans les souches normales non traitées.

Quant aux autres processus supposés par WER- BITZKI, 1lS ne sont pas probables. Comment supposer la conservation d'un organe alors qu'aucune coloration vitale ni aucun procédé de coloration sur frottis, quelque soit le mode de fixation, ne peut plus le révéler et que le protoplasme, là où le corps apparaissait d’abord, ne présente pas de solution de continuité dans ses réactions colorées ? D'autre part aucun auteur n’a pu faire la démonstration de la migration dans le noyau de l’organe disparu.

La suppression pure et simple du corps parabasal des trypanosomes traités par les colorants orthoquinoïdiques semble donc établie. Les races obtenues diffèrent

(1) Cette arythmie dans le temps de division des différents organules du trypanosome a été relevée aussi par ALEXEIEFF (1910) et STEKKOVEN (1919). LAVIER (1928 c) a invoqué, pour expliquer l'existence des individus normalement aparabasaux, ce « jeu indépendant des constituants cellulaires et nucléaires » dont parle CHATTON.

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quelque peu des races normales quant à certaines propriétés (1) mais il n’est pas nécessaire de supposer une relation de cause à effet entre ces légères modifications biologiques et la disparition du corps parabasal.

Un fait relativement récent vient compléter les données de ce problème des trypanosomes ablépharoplastiques.

4° Transformation spontanée d’une souche normal: e

en Souche aparabasale

WENYON (1928) rapporte le cas de la transformation spontanée d’une souche normale en race « ablépharoplastique » pure. fl s’agit d’une souche de Tr. evansi, var. Mmarocanumi isolée en 1922 par VELU, à partir d'un cheval, rapportée à Paris au laboratoire de M. le professeur BRUMPT, et de là amenée en Angleterre au laboratoire de WENYON en 1923. Celui-ci la maintint par passage sur des rats et surtout sur des cobayes. En 1926 un frottis du sang d'un des cobayes n'avait révélé aucune anomalie. Une série de frottis exécutée un an plus tard et envoyée au D' KEILIN se montra porteuse uniquement d'individus « ablépharoplastiques » (2). On se reporta à un frottis exécuté peu après le dernier frottis où les parasites se soient montrés normaux, et

(1) C’est le sort de toute collection d’êtr?s vivants soumise à une influence étrangère à laquelle échappent leurs congénères; même si cette influence n'est que passagère, les caractères acquis peuvent se fixer, en l'absence de tout contact avec les individus normaux. i

(2) WENYON propose, puisque le « blépharoplaste » des anciens auteurs se nomme maintenant « corps parabasal » d'attribuer aux trypanosomes qui n’en possèdent pas, le nom de tr. aparabasaux, Nous adoptons cette nomenclature.

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on constata que la modification complète s'était opérée dans ce court espace de temps.

Cette mutation s’est effectuée en l'absence de tout traitement, de toute intervention expérimentale. Une explication partielle est possible et fut fournie par WENYON : alors que les souches normales se maintiennent telles par une plus grande fragilité ou une moindre faculté multiplicative des individus sans corps parabasaux, ceux-ci, sous une influence physique ou biologique, dans la souche considérée auraient vu cette propriété l'emporter sur celle des individus complets. Car cette souche, avant sa mutation comportait, comme la plupart des souches normales, des trypanosomes dépourvus de Corps parabasaux. LAVIER 1928 d) étudiant la même souche à Paris en 1922, en avait trouvé 8 %, proportion relativement élevée. On comprend qu’une sélection naturelle ait rapidement multiplié leur nombre et les ait amené à supplanter les autres.

On n’a pas encore, que nous sachions, étudié les propriétés biologiques de ce nouveau virus. Cependant nous avons pu constater que les cobayes sur lesquels nous l'avons conservé pendant six mois en mouralient, en moyenne, en 31 jours, tandis que ceux infectés avec une souche originaire de l'île Maurice duraient 34,5 jours, en moyenne ; BROUDIN et PEYTAVIN (1926) ont même étudié en Indochine une souche qui ne les tuaient qu'en 36 jours. On peut donc considérer que la perte du corps parabasal n’a en rien diminué la virulence des trypanosomes dans la souche de WENYON.

Mais il faudrait établir si les différences biologiques qui distinguent la souche de WENYON de la souche mère

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sont du même ordre que celles qui distinguent, d’après LAVERAN, la souche de WERBITZKI de sa souche mère, ce qui se réduit à peu de chose, ou si elles sont de l'ordre de celles qui séparent le Tr. equinum des autres trypanosomes, ce qui correspondrait à L'apparition d'une « espèce » nouvelle.

D'autre part LAVERAN (1919) a signalé ce fait très important que la souche de nagana WERBITZKI, qu'il considérait, en 1915, comme permanente, avait soudain régressé, en 1918, vers le type normal, entre le 945° et le 978° passage sur souris. Seule l'épreuve du temps dira si la souche de WENYON est capable d’une personnalité définitive. On n'a pas encore cherché à élucider cette disparition naturelle, au bout de plusieurs milliers de générations de trypanosomes, d’un caractère artificiellement acquis.

5° Conséquences théoriques et pratiques

de cette inconstance du corps parabasal

Toute cette série de faits — existence d'individus aparabasaux dans les souches normales, existence d’espèce entièrement dénuée de ce corps, possibilité de créer artificiellement des races « ablépharoplastiques », cas d'apparition spontanée d’une telle race — semble plaider pour l'inutilité complète du corps parabasal dans la biologie du trypanosome.

On peut invoquer, après MESNIL, analysant dans le Bulletin de l'Institut Pasteur le travail de WERBITZKI (1910), des suppléances fonctionnelles chez les organismes qui en sont privés. Si ce point de vue n'a pas encore reçu confirmation (et la preuve en est difficile), il faut cependant relater l'observation suivante : une

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race aparubasale créée par WERBITZKI à l’aide de la pyronine et revenue spontanément à l'aspect normal après une vingtaine de passage sur souris, fut soumise par l’auteur à l’action de l’arsacétine ; alors que ce produit n’a aucune action sur le corps parabasal des trypanosomes de la souche mère, il a le don de faire disparaître celui des trypanosomes de la souche antérieurement traitée à la pyronine. On pourrait donc, selon MESNIL, supposer que les corps parabasaux réapparus chez cette souche, seraient d’une origine différente, ne seraient que des organes de suppléance, ne possédant pas toutes les propriétés des corps parabasaux primitifs.

Une autre hypothèse) est possible et cadre mieux avec d’autres observations ; elle envisage une sensibilité plus immédiatement apparente des parasites aparabasaux :; c’est elle que nous étudierons plus loin (v. p. 84).

KUDICKE (1911 à) citait une action analogue du trypanbleu, qui ne supprime pas les corps parabasaux des souches normales, mais transformait chez un hôte un mélange artificiel d’une race normale et d’une race aparabasale en race aparabasale pure. L’explication en sera tentée au troisième chapitre.

Un corollaire, que l'expérience n'a pas confirmé, c’est que, les races normales renfermant un certain pourcentage d'individus aparabasaux, cette sélection artificielle devrait jouer sous l'influence de tous les médicaments.

Aussi nous garderons-nous d'invoquer cette sélection comme seul processus dans la création des souches aparabasales.

Que le corps parabasal ait, chez les trypanosomes, un rôle biologique ou qu'il ne soit que le témoin d'un

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organe autrefois utile et dont l'activité est probable chez d'autres flagellés, il est vraisemblable que par sa seule présence, par ses affinités chimiques, il peut jouer un rôle dans le comportement du parasite à l'égard des influences extérieures.

Nous avons vu que les colorants vitaux se fixent électivement sur le corps parabasal, tant pour le colorer que pour le dissoudre. Pourquoi une telle affinité n'existerait-elle pas à l'égard des autres agents actifs, mème si cette électivité ne pouvait se manifester par une réaction colorée ou une dissolution ? Le point d'attaque étant le même, la différence de fonction chimique des réactifs donnerait des résultats différents. Précisons notre conception de cette différence.

Les colorants acridiniques et autres peuvent être considérés comme des médicaments au même titre que les composés arsenicaux, antimoniaux ou même que des corps complètement organiques tels le « Bayer 205 ». Pourquoi l’activité thérapeutique des premiers apparaîtelle moins nettement que celle des seconds ? Tandis que ceux-ci, contractant, en grande quantité, une combinaison lâche avec la substance du corps parabasal, seraient rapidement diffusés, en nature ou plus ou moins modifiés, dans tout le parasite, et le tueraient, ceux-là, au contraire, réagissant profondément sur la matière parabasale, ne seraient libérés que peu à peu, ou bien, seul, l’excès de ce qu'avait pu fixer ce corps contribuerait à l’action sur la vitalité du protiste (1).

Ainsi, même au cas où le corps parabasal n'aurait

(1) Cette explication cadrerait avec le fait, relaté au Chapitre III, que, chez deux rats également infectés, la disparition du trypanosome est réalisée plus vite par l’atoxyl (8 h.) que par la gonacrine (plus de 24 h.) avec des doses équivalentes.

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aucune ullité pour la biologie du trypanosome, sa masse et ses affinités chimiques lui conféreraient une grosse importance au point de vue de la thérapeutique. On conçoit que cette importance méritât d’être contrôlée, et c'est elle que nos expériences ont tenté de faire ressortir. En effet, si la démonstration en était faite, faudrait-il créer, par des traitements prolongés aux médicaments tels que les couleurs d’acridine, des races aparabasales de parasites, offrant plus de prise à toute médication.

Un autre phénomène vient se greffer sur celui de l'existence des trypanosomes aparabasaux : c’est celui de la résistance acquise aux médicaments. Nous en faisons mention car il intervint constamment dans nos expériences et l'on doit en tenir compte dans l’appréclation des résultats.

Par là nous avons eu l'occasion de le considérer accessoirement et il n’est pas impossible qu'une relation pût exister entre cette résistance et le corps parabasal.

On sait, par EHRLICH et ses disciples, qu’en traitant un hôte trypanosomié par des doses subthérapeutiques répétées, la dose thérapeutique et même des doses supérieures deviennent impuissantes ; l'infection ne fléchit même plus. Cette sorte de mithridatation, cette résistance de la souche ainsi traitée est héréditaire pour une même espèce d'hôte, avec éclipse pour les passages intermédiaires par une espèce d'hôte différente.

La résistance acquise pour un médicament peut s'étendre à un autre médicament du même groupe, ou même d'un groupe tout à fait différent. C’est ainsi que LEUPOLD (1924) a établi un voisinage d'action entre la

trypaflavine (= gonacrine) et certains arsenicaux (arsacétine) (1) et conclut à une identité du « point d'attaque » (angriffpunkte) de ces deux substances, Celui du premier médicament étant le corps parabasal, on conçoit tout l'intérêt qui s'attache à une étude parallèle de la résistance aux médicaments et du rôle du corps parabasal dans l’action de ces médicaments. LEUPOLD, COLLIER, etc. qui se sont attachés à l'étude de l’une sans considérer celle de l’autre y ont certainement perdu en méthode et en résultat. Cette double étude méthodique sera entreprise par la suite.

(1) COLLIER (1924) signale que des souches devenues résistantes au « Bayer 205 » le sont en même temps aux arsenicaux, à l’antimoine, aux colorantes azoïques et acridiniques.

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