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Ces chiffres représentent ce que Tillmann et ses colla- . borateurs appellent la « valeur en couleur » f de la tyrosine et du tryptophane aux divers pH.

Nous donnons ci-dessous la liste des valeurs en couleur établies par les auteurs :

pH f Tyrosine f Tryptophane 1,8 0,10 0,40 2,1 0,20 OAI 3,5 0,35 0,43 22 0,50. 0,50 4,0 0,63 0,60

pH Î Tyrosine îÎ Tryptophane 6,0 1,5 0,70 7,0 2,5 0,85 8,4 4,2 0,95 9,5 6,2 1,10 10,0 6,5 720 II,5 7,0 1,23 12,9 74 1,30

Nous avons pu à l’aide de ces résultats établir deux courbes en fonction du pH et du poids de m. nitrophénol pur relatif à chaque acide aminé. Ces courbes permettent d'apprécier les accroissements de coloration de la tyrosine et du tryptophane nitrés au fur et à mesure que l’alcalinité des solutions augmente.

42 545% 7 8 9 10 412 pH Nous donnons ci-dessous les courbes qu’ont publiés Tillmann, Hirsh et Stoppel.

Ü = poids de métenitrophénol pur correspondant à 1 milligrame me d'acide eaminé

É=D 1: 2,54 EN EN lire nt D... 1.2 V5 14 AS Nc PRE MOTO MATRA ITR

On peut constater que dans notre dessin la courbe relative à la tyrosine, après avoir été très voisine de celle du tryptophane, s’élève bien plus rapidement que cette dernière, chose qui d’ailleurs était prévue.

Les courbes, que les auteurs ont obtenues par le même procédé, sans addition de soude, ont une allure qui dans l’ensemble est à peu près la même que celle des nôtres. Notre dessin montre toutefois que pour la tyrosine il y a un maximum pour le pH 8,6 et qu’ensuite les deux courbes semblent se rapprocher, ce qui ne se retrouve pas dans les dessins de Tillmann, Hirsh et Stoppel. Cette divergence tient peut-être à ce que nos conditions expérimentales diffèrent de celles qu’emploient Tillmann et ses collaborateurs, qui contrairement à nous n’utilisent pas le nitrite de sodium.

Les chiffres obtenus nous permettent d'effectuer le dosage de la tyrosine et du tryptophane dans les protéines.

Nous suivons pour cela la méthode décrite par Tillmann, Hirsh et Stoppel.

Les points de la courbe entre lesquels la tyrosine offre le maximum de variation d'intensité de coloration sont ceux qui correspondent aux pH 1,8 et 8,6. Nous pouvons donc porter nos solutions d’albuminoïdes nitrées et neutralisées à ces deux pH. Les intensités respectives de coloration étant représentées par leur poids de m. nitrophénol correspondants, soit S;,, et 54,4, nous devons pouvoir écrire les équations suivantes :

d,8 X + D; Le S1,8 4,6 * + bs,e == Ss,6

x étant le poids de tryptophane en milligrammes et y étant le poids de tyrosine en milligrammes, contenus dans la prise d’essai.

a, et 4,4, étant les poids de m. nitrophénol représen- . tant l'intensité de coloration de 1 milligramme de tryptophane aux pH 1,8 et 8,6.

b, ,. et b,,, étant les poids de m. nitrophénol représentant l’intensité de coloration de 1 milligramme de tyrosine aux pH 1,8 et 8,6.

En résolvant ce système d'équations, nous devons avoir pour la quantité de tryptophane contenue dans la prise d’essai :