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Or, comme nous avions 160 cc. de solution neutralisée, les quantités de tyrosine et de tryptophane contenues dans la solution sont les suivantes : |

x — 0,00845 X 160 — 1 mgr. 35 de tryptophane. y—0,0401 X 160 — 6 mgr. 41 de tyrosine.

Les quantités de ces deux acides aminés que nous avions mises en solution étaient de 1 mgr. de tryptophane et de 7 mgr. de tyrosine.

Nous avons ensuite réalisé des concentrations différentes de tyrosine et de tryptophane et nous avons obtenu |

les résuitats suivants : ; |

Quantités Quantités Quantités

Tyrosine en mg..... 1,0 0,72 5,0 4,93 2,5 2,02 Tryptophane — ,... 7,0 7,74 25 2,92 5,0 571

On voit que la méthode ne parait pas susceptible d’une bonne précision. Il est d’ailleurs facile de se rendre compte que le moindre changement dans l’appréciation de la teinte retentit d’une façon considérable sur les résultats. En effet, si nous reprenons les calculs en sens inverse, nous constatons que nous aurions dû obtenir pour le pH 1,8 une hauteur, au colorimètre, égale à 5 cc. 13 au lieu de s cc. 47 et pour le pH 8,6 une hauteur de 3 cc. 74 au lieu de 3 cc. 71. Ces différences de hauteur sont, on le voit, très minimes et cela prouve malgré tout que l’on

peut se contenter de cette méthode si on ne lui demande pas plus de précision qu’elle ne peut en fournir.

Application à diverses matières protéiques :

Nous indiquerons tout d’abord qu’il n’y a pas de procédé uniforme de dissolution des matières protéiques. Tillmann et ses collaborateurs conseillent de dissoudre chaque substance albuminoïde dans de l’acide azotique décinormal. Nous avons constaté que dans bien des cas il nous était impossible d'obtenir des dissolutions complètes et claires permettant de bonnes lectures au colorimètre, en n’employant que de l’acide nitrique décinormal. Souvent il nous a fallu recourir à de courtes digestions à la soude ou à l’emploi d’acide acétique. Cela ne nous a d’ailleurs

pas empêché d'obtenir par la suite de bonnes nitrations avec No° H o,r N.

Nous avons donc appliqué les méthodes des auteurs de la façon suivante :

Opérer la dissolution de 25 milligrammes de matière protéique. À la liqueur obtenue et neutralisée, ajouter 100 cc. de No° H o,1 N additionnés de o gr. 20 de nitrite de sodium. Porter 45 minutes au bain-marie bouillant. Laisser refroidir et mesurer le volume de la liqueur. En prélever une quantité aliquote et l’amener au pH 1,8. Pour cela utiliser le comparateur. Verser dans le tube 3 (voir page 73) la liqueur à titrer additionnée de 2 gouttes d’une solution de bleu de thymol, dans le tube 4 introduire la même quantité de solution tampon à pH 1,8 additionnée

LHMONN

de 2 gouttes de bleu de thymol. Dans le tube 2 introduire le même volume de liqueur à titrer, mais sans colorant. Verser peu à peu dans le tube 3 de l’'HCI o;1 N, ainsi que dans le tube 2, jusqu’à ce que les colorations obtenues de part et d’autre soient identiques. Noter le volume d’acide chlorhydrique décinormal ajouté. Mettre cette même quantité d'H Cl o,r N avec le même volume de la liqueur à titrer, afin que cette dernière soit ainsi au pH 1,8. ;

Opérer de la même façon avec de ia soude o,1 N pour le pH 8,6 en utilisant alors une solution tampon à pH 8,6 et comme colorant du bleu de bromothymol.

Comparer ensuite les deux liqueurs amenées à leur pH respectif avec une solution de m. nitrophénol pure ou diluée au dixième. En déduire pour chaque pH la quantité de m. nitrophénol correspondant à 1 cc. de solution pure nitrique neutralisée, soit S 1,8 et S8,6-

On obtiendra les quantités de tyrosine et de tryptophane exprimées en milligrammes contenues dans 1 cc. de liqueur nitrique en portant les valeurs S,,, et Ss,s dans les équations suivantes :

S:,8 — 0,16 y x (tryptophane) — O,I4 O,14 SP RES 1,46 S 1,8 y (tyrosine) —

Rapporter ensuite les valeurs obtenues à 100 milligrammes de matière protéique.

Résultats obtenus :

Nous donnons ci-dessous les résultats que nous avons obtenus en appliquant cette technique à diverses matières aibuminoïdes. Dans plusieurs cas (albumine de l’œuf, gélatine, fibrine) nous avons dû calculer l’azote total de ces substances pour obtenir le pourcentage d’albumine vraie qu’elles contenaient. Pour cela nous avons multiplié ce chiffre d’azote total par 6,25, qui est un coefficient moyen applicable à la plupart des matières albuminoïdes.

Nous avons réuni nos résultats dans le tableau suivant :

Méthode Tyrosine Tryptophane de dissolution pour cent pour cent

{22 mg. 3 3 data Albumine d'œuf...{+ NaOH à à \ 5 P :

10 cc.

Gélatine + acide acétique 30 cc.

Edestine 250 mgr.

Edestine + NaOH à 5 % 257 CC.

Fibrine 400 mg.

+ NaOH à 25 % FOVCC:

| Caséine 250 mg.

+ acide acétique : 0,09 50 cc.

Chiffre négatif

On peut constater que, parmi tous ces résultats, quelques-uns sont très éloignés de ceux que donne, par