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exemple, la réaction de Millon-Zuwerkalow. L'on ne s'attendait pas au premier abord à ce que les équations de Tillmann, Hirsh et Stoppel nous conduisent à des chiffres négatifs comme nous l'avons constaté pour la fibrine. Ces chiffres négatifs qui, tout d’abord, nous ont surpris, nous ont amenés à étudier dans quels cas les deux équations, qui doivent être résolues au cours des calculs, pouvaient nous donner des résultats de cet ordre.

Il était possible de prévoir que la réaction xanthoprotéique donnerait dans certains cas des résultats négatifs. En effet ces deux équations peuvent s’écrire sous la forme suivante :

a Ty+b Tr—S à pHLi8

a Ty + b’ Tr — S’à pH 8,6 dans lesquelles a et a’ représentent les poids de m. nitrophénol pur correspondant à 1 mgr. de Tyrosine et b et b’ les poids de m. nitrophénol pur correspondant à r mgr. de Tryptophane. Ty et Tr étant les poids de Tyrosine et de Tryptophane contenus dans la prise d’essai.

Supposons que Ty -- o, dans ce cas on a :

bireS ét bD'Tr=S>" d'où S’ H 1,46 Ges=) pres == 10,4 S b O,14 Si au contraire Tt — o, on a :

AEES et à Ty — S’ d’où S a 4,75 — = == 29,6

On en conclut donc que moins la substance albuminoïde contiendra de tyrosine, plus le rapport tendra vers le minimum 10,4, et que moins elle contiendra de tryptophane plus le rapport tendra vers le maximum 20,6. Autrement dit la variation du maximum d'intensité de coloration en fonction des pH est forcément comprise entre deux limites extrêmes, l’une inférieure, c’est-à-dire 10,4, dans le cas où le milieu ne contient que du tryptophane, et l’autre supérieure, soit 20,6 dans le cas où il n’y a que de la tyrosine. En dehors de cet intervalle nous devrons trouver des chiffres négatifs pour la tyrosine si le rapport est inférieur à 10,4 et pour le tryptophane si le rapport est plus grand que 20,6.

Nous avons établi ce rapport pour un certain nonibre de matières protéiques. Nous avons obtenu les chiffres

suivants :

Ds NE D DURE 20,5 Gélatmer rt sir: 127 Albumine d'œuf ........... ra?

GENS Vos ER Pre 29,9 et 21,8 HIDEINE Re ee TE US 40

La variation de l'intensité de coloration en fonction du pH est donc trop forte dans certains cas. Il faut donc admettre soit que la coloration obtenue en milieu acide est trop faible, soit que celle produite à pH 8,6 est trop forte, soit que ces deux causes se produisent simultanément. Comme les essais obtenus avec le mélange des acides aminés sont satisfaisants, on en vient donc à incriminer le milieu dans lequel on opère (hydrolyse incom-

SO 0 ee

plète changeant la valeur en couleur déterminée pour les acides aminés purs — action empêchante des substances voisines — action de corps donnant une réaction xanthoprotéique avec une valeur de rapport plus forte, etc..).

Malgré cet échec qui ne nous a pas permis de retrouver les résultats satisfaisants annoncés par les auteurs, nous avons continué cette étude dans l’espoir, d’ailleurs déçu, de trouver au cours de comparaisons avec d’autres méthodes la raison de nos insuccès.

ESSAIS D’ADAPTATION DE LA MÉTHODE DE TILLMANN, HIRSH ET STOPPEL DE FAÇON À PERMETTRE L'EMPLOI SIMULTANÉ D’AUTRES MÉTHODES

1. - Emploi simultané de la réaction xanthoprotéique et de la réaction de Zuwerkalow rendant possible l’utilisation du colorimètre de Duboscq.

Pour permettre une comparaison plus précise de la réaction xanthoprotéique ainsi établie, nous nous sommes demandés si l’on ne pourrait pas associer les réactions de Millon-Zuwerkalow et xanthoprotéique, en opérant pour toutes les deux sur des solutions acétiques. Nous avons donc opéré des dissolutions acétiques à des concentrations telles qu’elles puissent être utilisées aussi bien pour la réaction de Millon que pour la réaction xanthoprotéique.

Puis nous avons cherché à nous rendre compte si lacide acétique ne nuisait pas à la réaction.

Nous avons préparé pour le tryptophane le mélange suivant :

A RDIODRANES TR CU ue 5 mgfr.