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dosage ‘du tryptophane par réaction sur les aldehyces ieur ont donné des couleurs trop variables pour qu’elles se prêtent à un dosage exact.

Les auteurs, opérant sur des farines et non sur des matières protéiques pures, se heurtent à de nombreuses difficultés et établissent que dans la technique de Folin et Marenzi l’hydrolyse acide ou alcaline provoque la formation de produits agissant sur le réactif, une partie de ces substances pouvant être éliminées par le toluène. C'est pourquoi ils ont recours à l’hydrolyse diastasique. On trouvera plus loin la description de cette technique.

Méthodes de Séparation de la Tyrosine et du Tfryptophane

Dans tous les procédés publiés sur le dosage colorimétrique de la tyrosine et du tryptophane et basés sur l’une des trois réactions suivantes : réaction de Millon, réaction xanthoprotéique et réaction phosphomolybdotungstique, seuls le nitrate mercurique et le sulfate mercurique ont été employés pour la séparation de ces deux acides aminés : le tryptophane en effet peut être précipite dans les hydrolysats par l’un ou l’autre de ces sels mercuriques qui l’entraîne sous forme d’un complexe mercuretryptophane. : |

Thomas [20] est le seul a avoir employé le nitrate mercurique, et n’élimine pas le mercure puisqu'il se contente d’opérer une réaction de Millon.

En dehors de cette exception, la principale différence que l’on constate entre les divers procédés publiés réside soit dans le mode d'élimination postérieure du mercure,

soit dans le mode de dissolution du complexe mercure-

tryptophane : nous allons passer en revue les diverses techniques préconisées.

Procédé de Folin et Looney [7] :

Le précipité obtenu après addition de sulfate mercurique est dissout dans un excès de cyanure de sodium ; mais dans ces conditions l'intensité de coloration fournie par le tryptophane est plus élevée, il convient donc de soumettre la solution étalon de tyrosine au même traite-

ment par le cyanure de sodium.

Procédés de Folin et Cioccalteu | 5] :

1. — Le tryptophane est précipité par le sulfate mercurique. On dissout le précipité dans 10 * d’acide chlorhydrique normal, on chauffe au bain-marie bouillant pendant 10 minutes et on fait passer un courant d'hydrogène sulfuré jusqu’à obtention d’un précipité noir de sulfure

de mercure ; on laisse reposer une heure et on centrifuge.

2. — Le tryptophane est précipité par le sulfate mercurique. On dissout le précipité dans 10 “ d’acide chlorhydrique normal. On porte au bain-marie bouillant pendant 30 minutes. On refroidit ensuite et l’on effectue la réaction phosphomolybdotungstique sans éliminer davantage le mercure. ;