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de sérum physiologique. Dans la première case, on ajoute 25 mm’ du sérum du malade, on mélange et l’on reporte 25 mm’ dans le seconde, ainsi de suite jusqu’à la dernière (ou l’avant-dernière, celle-ci pouvant servir de témoin). Les titres sont alors de 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64. On ajoute à chaque goutte 25 mm° de sang témoin infecté avec le streptocoque. En l’absence de pipette graduée, on peut se servir d’une goutte de pipette Pasteur, calibrée de façon qu’elle reproduise le volume désirable.

Ce sang témoin défibriné doit être de groupe O pour ne pas provoquer d’agglutination des hématies. De plus, FLeminG insiste beaucoup sur le fait qu’il doit être débarrassé de ses leucocytes qui peuvent avoir un effet bactériostatique sur les streptocoques. On peut les éliminer soit par chauffage à 50° pendant trente minutes, soit en le conservant à 4° pendant trois jours, soit en le filtrant sur coton, soit, surtout, en ajoutant 1/1.000 à 1/2.000 de hiquoïd. Le liquoïd a de plus l’avantage de rendre inutile la défibrination.

L’ensemencement se fait en ajoutant environ 5 mm° d’une culture de streptocoque en bouillon par ce. de sang. Il y aurait peut-être intérêt, comme dans la méthode de U. Wizson, de partir d’une culture en gélose et de laver plusieurs fois une émulsion pour éviter les hémolysines préalablement formées.

Pour le remplissage, on fait glisser la lame supérieure qui est ensuite replacée. On scelle enfin très soigneusement les lames avec le mélange employé pour imbiber les bandes de papier afin d’éviter toute évaporation.

La lecture se fait après dix-huit heures d’étuve à 37°. Quand le taux de Pénicilline dans le sérum est suffisant le sang n’est pas hémolysé, mais quand le taux est inférieur, les streptocoques se développent et hémolysent le sang.

Le calcul se fait soit en connaissant le taux nécessaire au développement du streptocoque, soit en faisant une

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gamme étalon en remplaçant le sérum par une goutte de Pénicilline titrant 1 U.O. par cc.

B. Tubes capillaires :

Cette méthode consiste à réaliser l’hémolyse dans des tubes capillaires de 0,8 mm. de diamètre et de 3 pouces (7,62 cm.) de longueur. Dans chacun de ces tubes, on introduit par capillarité 25 mm° de sérum à examiner ou de ses dilutions mélangées au préalable avec 5 mm° de sang ensemencé avec du streptocoque hémolytique. Cela fait, on ferme les extrémités des tubes, on les pose horizontaiement sur un porte-objet et on les met à l’étuve à 37° pendant la nuit. Le jour suivant on examine l’hémolyse et le calcul se fait comme à l’ordinaire.

Ces méthodes par hémolyse réalisent un net progrès sur les méthodes par dilution simple sans indicateur. L’hémolyse est en général un phénomène assez net qui permet d’apprécier plus facilement la dernière dilution ou la croissance du germe test est nettement inhibée. Il nous semble cependant que cette hémolyse est un phénomène sujet à des irrégularités que l’on ne rencontre pas dans les méthodes utilisant un indicateur de pH.

Cependant, les méthodes de FLEmIxG, surtout les « Slide Cells » sont susceptibles de donner entre les mains d’un expérimentateur entraîné des résultats nettement suffisants en clinique. Le fait de n'avoir à recueillir que quelques gouttes de sang à l'oreille, permet de répéter cette opération sans ennui notable pour le malade, ce qui est d’un intérêt primordial quand il est nécessaire comme nous le verrons plus loin, de ne pas se contenter d’un chiffre, mais de faire une courbe d'élimination.