L — LES TRAVAUX ANTERIEURS
Heckel et Schagdenhauffen (15) étudiant les feuilles de kinkéliba ÿ trouvent : tanin, phlobaphène et nitrate de potasse en grande quantité.
Beaucoup plus tard, Valetas décrit l’existence d’une cire, d’une matière grasse orangée, de cristaux solubles dans l’éther, de tanin catéchique et phlobaphène, d’un liquide volatif irritant soluble dans l’eau et l’éther de pétrole. Il recherche les hétérosides après défécation plombique et conclut que les principes actifs doivent être de nature hétérosidique, l’abondance du nitrate de potasse expliquant l’action diurétique de la drogue.
Une étude extrêmement sérieuse, due à Paris (21) apporte plus de lumières sur la composition chimique de la feuille. En voici l’essentiel :
Les cendres, dont la teneur est de 4,80 p. 100 renferment chlorures, sulfates, phosphates, nitrates, calcium, magnésium, potassium, sodium.
L'application de la méthode de Bourquelot montre la présence de saccharose et infirme celle d’hétérosides.
La recherche des alcaloïdes par la méthode de Stass-Otto souligne l'existence d’un corps ne précipitant pas par lPacide silicotungstique, mais donnant un louche accentuê par Tes réactifs iodo-ioduré et iodo-mercurique, ce qui permet de conclure à la présence d’alcaloïde à l’état de traces.
L'expérience ayant démontré que les propriétés cholagogues et diurétiques étaient surtout le fait de la fraction précipitable par le sous-acétate de plomb, amena lPauteur à s’attacher tout particulièrement à l’étude des substances tanniques, une fois vérifiée l’absence de flavones ou flovonosides et
d’anthocyanes.
L’infusé de feuilles donne les réactions des tanins (précipitation par la gélatine salée, en particulier). Il s’agit d’un tanin catéchique, fait démontré par l’absence de coloration par lalun de fer en milieu acétique dans le filtrat, après précipitation par le formol chlorhydrique (R. de Stiasny).
Par épuisements successifs à l’éther, puis à lPester acétique d’un extractif aqueux, à l’ampoule de décantation, le tanin total au taux de 8,2 p. 100 dont 2,8 p. 100 non précipitable par la gélatine, put être séparé en deux fractions : la première soluble dans l’éther obtenue à l’état cristallisé après purification par le noir diamant dans l’eau bouillante est la Combretum catéchine ; la deuxième précipitée par le chloroforme dans l’ester acétique est le Combretanin.
La Combretun-catéchine se présente sous la forme d’une poudre cristalline, blanche, présentant au microscope de petits cristaux prismatiques, perdant 12 p. 190 de son poids à 100, de P. F. — 218° — 2200. Le rendement est de 0,15 p. 100. Peu soluble dans l’eau froide, soluble dans l’eau bouillante, très soluble dans l'alcool, lacétone, l’ester-acétique, assez soluble dans Péther, elle est insoluble dans le chloroforme, le benzène et l’éther de pétrole. Les solutions aqueuses légèrement colorées en jaune foncent à Pair et virent rapidement au brun en milieu alcalin ; par addition de Fe: Clé il se déveleppe une coloration verte, virant au rouge puis au brun par addition d’acétate ou de carbonate de sodium. Elles précipitent par le formol chlorhydrique, mais non par la gélatine salée. Si à une solution chlorhydrique on ajoute un copeau de sapin, celui-ci se colore en violet. Cette substance ne contient pas de groupe methoxyle et donne par addition de Panhydride acétique, en présence d’acétate de sodium anhydre, un dérivé acétylé critallisé de P. F. = 153° — 160° et un dérivé benzoylé de P. F. — 183° — 1840.
Le Combretanin se présente sous laspect d’une poudre amorphe, blanc rosé, devenant rougeâtre à l'air, de P. F. voisin de 100°. Le rendement est environ de 0,30 p. 100. Il est assez peu soluble dans Peau froide, plus soluble à chaud, soluble dans lalcool, lacétone, l’ester acétique, peu soluble dans l’éther, insoluble dans le chloroforme, le benzène, léther de pétrole. La solution aqueuse jaune-rougeâtre précipite par le formol-chlorhydrique, la gélatine salée, Pacétate de plomb, l’eau de brome, réduit le nitrate d'argent et la liqueur de Fehling ; elle devient brun foncé en milieu alcalin et jaune orangé avec l’hypochlorite de sodium. Avec Pacide chlorydrique à chaud, il ÿ a formation d’une coloration puis d’un précipité rouge intense (phlobaphène) se dissolvant dans Palcool amylique. Avec le perchlorure de fer on obtient une colora-
Différentes formes de feuilles de kinkéliba observées sur une même branche (d’après J. Valetas).
Rire
tion vert brunâtre virant rapidement au brun noir. Par fusion alcaline, le Combretanin, tout comme la Combretun catéchine du reste, fournit acide protocatéchique et phloroglucinol. Par hydrolyse fermentaire il donne de Pacide gallique, mais pas de sucre réducteur. Ce n’est donc pas un tannoside.
Lehmann à son tour en 1943 reprend Pétude de la feuille de Combretum et aboutit aux résultats suivants :
Les cendres dans la proportion de 3,8 p. 100 dont 0,25 p- 100 solubles dans lPacide chlorhydrique renferment : silice, chlorures, sulfates, phosphates, nitrates, calcium, magnésium, potassium, sodium, fer, manganèse, aluminium.
La recherche des tanins conduit à l’obtention d’un tanin catéchique dans la proportion de 19,25 p. 100 (méthode de Schülte) ou de 9,8 p. 100 (méthode de Paessler).
L’extraction par les solvants donne : eau : 22,5 p. 100 — alcool : 33 p. 100 —— alcool méthylique : 39,5 p. 100 — éther de pétrole : 3,45 p. 100 — éther : 6,2 p. 100 — chloroforme : 6,78 p. 100.
Par distillation et reprise au pentane, il obtient 0,03 p. 100 d’une essence d’odeur aromatique.
La recherche des saponosides par la méthode de Kôfler et celle d’un hétéroside cyanogénétique conduit à un résultat négatif. De même celle des alcaloïdes volatils par distillation en milieu sodique ne donne rien.
Pour rechercher les alcaloïdes fixes et les hétérosides lauteur s'adresse à la méthode de Stass-Otto modifiée. Partant d’un extrait alcoolique tartrique purifié par Peau il fractionne par l’éther et le chloroforme en milieu acide, puis par les mêmes solvants en milieu sodique, enfin par le chloroforme en milieu ammoniacal.
La recherche des hétérosides dans les deux premières fractions conduit à des résultats négatifs, celle des alcaloïdes dans les trois dernières à des résultats positifs.
Pour extraire la fraction alcaloïdique Pauteur opère ainsi : Purification de la drogue par épuisements successifs à l’éther de pétrole, léther, le chloroforme, puis extraction à l’alcool tartrique. Celui-ci distillé abandonne un résidu qui est repris par Peau. On purifie aprè5 concentration par reprises à l’alcool absolu et l’eau alternativement.
La solution tartrique obtenue en dernière analyse est perforée ne léther et le chloroforme, puis par léther en milieu sodique. Le résidu jaunâtre laissé par celui-ci après distillation est repris par l’eau chlorhydrique. Sur cette solution, les essais suivants sont pratiqués :
Ac. picrique : ppté jaune — tanin : ppté — chlorure
d'or : ppté — R. de Bouchardat, Mayer, Dragendorff : ppté
eine
— R. de Frôhde : coloration jaune or passant au vert puis au bleu. Les acides sulfurique et nitrique fournissent des colorations Jaune puis brune sans intérêt.
L'auteur conclut à la présence d’un alcaloïde réducteur pour lequel il propose le nom de Combretin et dont il prépare un picrate non cristallisé soluble dans les alcools méthylique, éthylique, amylique, l’éther et le benzène. M
En 1946, Balansard et Delphaut essaient par les méthodes ordinaires d’extraction d'obtenir l’alcaloïde. Devant les résultats décevants obtenus, ils essaient d'isoler bases aminées ou bétaïnes. L'utilisation de la méthode de Schültze (précipitation par le chlorure mercurique de la base en solution alcoolique) les conduit à l'obtention d’une bétaïne.
Plus tard, ces mêmes auteurs, en collaboration avec Arnoux et Bernard (2-3-4-5) recherchant les facteurs responsables de l’action diurétique, mettaient en évidence la présence d’acides malique, glycolique, glycérique dans la drogue.
