I-ALANINE

Dans un premier essai j'ai employé de l’alanine synthétique Kahlbaum ; mes Proteus ne se sont pas développés dans les milieux

Gr que j'avais préparés avec ce produit. J'ai fait alors une nouvelle expérience avec une alanine naturelle de Schuchardt que j'ai purifiée de mon mieux en la recristallisant trois lois dans l'eau elen rejetant à chaque cristallisation les premiers cristaux formés. Le produit que j'ai finalement oblenu contenait certainement encore de la valine et de la leucine, mais, comme il s'agissait seu lement d'étudier comparativement mes deux /roteus, je m'en suis

contenté et J'ai préparé avec Jui le milieu suivant :

LEATAMNE MT Rene an Cr ste nee 145 PhOSPhateMDIPOLASSIQUe EE ET 18,40 Sulfate de magnésium cristallisé............. 0,70 Ghioruretdercalcrumecristallisé "2er eee te 0%,010 HAurdISDIIÉe TES ND PE PEN PE PRE 700

Après avoir alcalinisé très légèrement cette solution avec quelques gouttes d’une solution de phosphate tripotassique, je l'ai distribuée par 100°% dans six ballons de 200%". Jai stérilisé ces six ballons à 115° pendant une demi-heure, puis J'ai vérifié leur stérilité et j'en ai ensemencé quatre comme d'habitude; je les ai tous mis côte à côte à l’étuve à 35° pendant 15 jours, après quoi j'ai dosé l’alanine par la méthode de Sürensen en me conformant aux indications données par MM. Gab. Bertrand et Thomas (!).

J'ai d’abord stérilisé les cultures en les maintenant, ainsi que le témoin, une demi-heure à 100°; le volume des milieux ayant notablement diminué pendant ce séjour à l’étuve, je les ai après refroidissement transvasés dans des ballons jaugés de 100°%-1 10% el j'ai complété à 100°" en rinçant les trois ballons avec de l’eau disullée. Après avoir rendu les trois liqueurs homogènes j'ai prélevé de chaque 50°" que J'ai concentrés au bain-marie dans des capsules de porcelaine. Après évaporation de plus de moitié, j'ai ajouté dans chaque capsule 1%,50 de magnésie fraîchement calcinée, puis en agilant très fréquemment j'ai continué le chauffage aa bain-marie Jusqu'à siccité.

Jai alors introduit dans chaque capsule 50°" d’eau disullée et

(1) Gabriel BERTRAND et Pierre Tomas, Guide pour les Manipulations de Chimie biologique.