CHAPITRE III

DES PROCÉDÉS DE LABORATOIRE EMPLOYÉS POUR LE DIAGNOSTIC DE LA FIÈVRE TYPHOIDE

Avant la découverte du séro-diagnostie, c’est-à-dire avant 1896, les procédés employés étaient compliqués et inconstants d'où leur pauvreté comme élément de diagnostic.

M. Hayem avait signalé la ténuité, presque l'absence du réseau: fibrineux dans le sang des lyphoïdiques ; mais s’il y a là un élément important de diagnostic avec certaines maladies telles que grippe, appendicite, et surtout pneumonie, 1l n’est malheureusement pas de même avec une autre maladie dont la différenciation clinique d’avec la fièvre typhoïde est souvent si difficile et toujours si importante : la granulie. D'ailleurs il est démontré aujourd'hui qu'un réseau très nel de fibrine peut se voir dans la fièvre typhoïde.

Quant à la formule leucocytaire certains (Thèse de

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Bonne, 1NS76), admetllaient une hyperleucocytose très marquée au.cours du premier seplenaire avec atlénuation brusque, vers le S° jour, puis hypoleucocytose dans la suile, jusqu'à la convalescence, où le taux redevenait normal: d'autres, Lel que M. Chantemesse affirmait que « l'hypoleucocytose est légère dans le cours de la prémière semaine; elle va en augmentant à mesure que la maladie progresse, el elle persiste longtemps pendant le cours de la convalescence » et nous savons aujourd'hui que c'est cette dernière opinion qui prévaut, car en dehors des lésions suppuralives, il n'y à jamais d'hyperleucocylose dans la fièvre {vphoiïde même à la période fébrile où Le nombre de polynueléaires est augmenté il est vrai, mais par rapport seulement à celui des mononucléaires et le nombre total de leucocytes est au contraire diminué.

Quant aux tentalives d'HÉMOCULTURE, dans les années qui suivirent la découverte du bacille {vphoïdique, leurs insuccès élaient st fréquents que l'on admettait que & dans la fièvre {vphoïde, le bacille d'Eberth est absent de la circulation générale et n'y apparait qu'exceptionnellement » (Wyssokowiteh) et lon put ainsi lire dans le Traité de Bactériologie de M. Macé, édition 1897 : « Le bacille.de la fièvre typhoïde ne paraïl se trouver que rarement el, alors, accidentellement, ou temporairement, dans le sang. Les ensemencements, même d'une goulle de sang sont presque toujours négatifs » et © élit À l'opinion générale, quoique certains auteurs (Neuhaus, ISK6, Neufeld, 1895), avaient trouvé d’une

façon presque constante le bacille dans les tâches rosées

Cette opinion règna jusqu'à 1900, — c'est-à-dire après l'avènement du séro-diagnostic — où une modification heureuse de la technique intervenant, le bacille fut dès lors trouvé d’une façon constante dans le sang, comme le montre le travail de Busquet, en 1902, qui obtint 83 résultats positifs sur 83 cas étudiés. Quant à la recherche dans les matières fécales nous verrons plus loin à propos du gelo-diagnostie, de Chantemesse, qu’elle ne fut bien faite qu'à parlir de 1901. Aussi lorsque le séro-diagnoslic de Widal apparut, le diagnostic positif de la fièvre typhoïde fit un grand pas.

Le séro-diagnostic est un de ces bienfaits de la médecine, qui plonge ses racines dans l'ère pasteurienne; en effet, c’est la découverte durôle des infiniment petits dans la pathologie, qui a orienté les recherches des bactériologistes de la première heure et qui a amené la découverte du bacille de la fièvre typhoïde, dont l'aboutissant a été cette merveilleuse application à la elinique de la méthode que M. Widal présentait le 26 juin 1896 à la Société médicale des hôpitaux et qu'il baptisait luimême du nom de séro-diagnostic.

L'avidité avec laquelle cette méthode a été aussitôt accueillie, tant en France qu'à l'étranger, est bien la preuve qu’un moyen de contrôle simple et sûr manquait à la solulion du diagnostic des nombreux états typhoïdiques, et l'unanimité avec laquelle cette méthode a élé adoptée, est le meilleur certificat de la contribution qu'elle apportait à cette solution.

« Voici par exemple un jeune garçon de vingt ans, il a été pris il y a quelques jours, de fièvre, céphalalgie

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violente, de vomissements; il tousse, l’auscultation de la poitrine décèle des râles sibilants disséminés; la température atteint le soir 40°; il n'y a point d’épistaxis, point de diarrhée, l’insomnie est persistante, et on se demande avec anxiété si l’on se trouve en face d'une fièvre typhoïde, maladie le plus souvent curable, ou en face d’une granulie, maladie presque fatalement mortelle. Sur quoi baser le diagnostic? Est-ce sur la courbe de la température? mais elle est loin de suivre dans l’un et l’autre cas le schéma classique que nous lui connaissons. Est-ce sur l'apparition des taches rosées lenticulaires? mais elles n’ont point encore apparu et ne paraïtront peut-être pas. Et cependant les râles augmentent, la dyspnée apparaît, tout fait redouter la granulie, les jours se succèdent et le diagnostic reste toujours indécis.

« Qui de nous, je le répète, en pareille circonstance, n'a pas souhaité avoir à son service un moyen sûr de diagnostic » (Dieulafoy).

Eh bien! aujourd’hui plus de ces incertitudes, car ce moyen existe, c'est le séro-diagnostic.

La masse sanguine qui est constituée de globules rouges et blancs baigne dans un liquide spécial, le plasma, qui constitue également la partie liquide de la lymphe. C'est dans ce plasma, qui se transforme en sérum après coagulation du sang, que les moindres éléments de nos {issus sont baignés et c’est lui qui sous des influences nouvelles, acquiert des propriétés nouvelles. Qu'un corps étranger soit introduit au sein de notre organisme, si ce corps n'est pas fait pour être

assimilé par nos tissus, comme cela a lieu pour les

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microbes pathogènes, 1l se forme aussitôt au sein de notre plasma des substances particulières qui ont recu le nom imagé d’ « anticorps », ce sont des corps de défense, contraires à celui introduit dont ils sont chargés d'aider à la destruction. Cette destruction se fait par les globules blancs à qui on attribuait autrefois le rôle de disséminer les infections, parce qu’on avait constaté qu'ils étaient chargés de microbes, alors que nous savons depuis la « phagocytose » de Metchnikoff que c'est le contraire et que les microbes inclus ne sont pas véhiculés, mais détruits.

Une des propriétés fondamentales que manifeste alors le plasma, consiste à immobiliser, puis à agglutiner les microbes (antigènes), action qui vraisemblablement doit rendre plus effective la phagocytose en rendant moins diffus l’action des microphages (leucocytes polynucléaires), qui comme l'ont montré Bordet et Gengou sont les premiers à soutenir la lutte qu’achèvent les macrophages ou leucocytes grands mononucléaires.

Le corps qui produit ainsi cette agglutination se nomme l’agglutinine, c'est un produit existant normalement dans le sérum de l’homme d’une façon très marquée vis-à-vis de certaines espèces microbiennes comme pour la bactéridie charbonneuse par exemple, et d’une façon très atténuée, vis-à-vis d’autres microbes, tel que le bacille d'Eberth, où cette action ne se manifeste qu'avec une grande quantité de sérum pour une petite quantité de microbes.

Cette agglutinine est un corps brut au chauffage on a pu chauffer du sérum jusqu'à 63° (Hayem), du lait

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jusqu'à 70° (Widal et Sicard) et même 80° (Achard et Bensaude), sans faire perdre à ces liquides leur pouvoir agglutinatif; cette agglutinine n’est donc pas assimilable au complément ou alexine du sérum qui est, au contraire un corps fragile se détruisant par la chaleur à 55°, d'ailleurs le complément a surtout un pouvoir bactéricide, c'est-à-dire pouvant empêcher le dévoloppement d'une culture, qualité qui est thermolabile, alors que le pouvoir agglutinant ne l’est pas, si bien que MM. Widal et Sicard ont pu conclure que « dans un même sérum propriétés immunisantes (1), bactéricides et agglutinantes jouissententre elles d'une indépendance relative ». C'est Le 26 juin 1896, avons nous dit, que M. Widal présenta à la Société Médicale des Hôpitaux sa méthode de séro-diagnostic, c'était là la première application à la chnique du phénomène de l’agglutination des microbes, phénomène qui n’était pas une nouveauté; en effet, dès 1889, MM. Charrin et Roger l'avaient constaté avec le bacille pyocyanique : « la culture du bacille pyocyanique dans le sérum de l'animal immunisé est claire et transparente. Les microbes sont réunis en petits grumeaux qui s’éparpillent quand on agite le tube, mais retombent au fond quand on le laisse au repos; les bacilles qui se sont développés dans le sérum normal ne présentent rien de spécial. Dans le sérum des animaux réfractaires, l'aspect est tout autre : les microbes sont réunis en chaïnettes etc. » (2), quelque temps après, M. Metchni-

(1) Le sérum antidiphthérique qui a un grand pouvoir immunisant est dépourvu de pouvoir bactéricide.

(2) Charrin et Roger. Annales de la Société de Biologie, 1889.

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koff (1) observe la même chose avec le vibrion avicide et avec le pneumocoque « cette différence de croissance se rencontre aussi pour le microbe de la pneumonie, dit-il, qui forme dans le sérum des lapins vaccinés des paquets ». Isaëf, en 1892 (2) et Wesbourn, en 1895, confirmèrent le fait pour ce dernier microbe et Ivanoff, en 1894 (3), observa encore le phénomène pour un type spécial de vibrion cholérique.

Peu de temps avant la communication de M. Widal, en 1896, Pleiffer et Koll (4), constatent que si on injecte dans le péritoine d'un cobaye une culture de bacilles d'Eberth en même temps que du sérum provenant soit d'un animal immunisé contre la fièvre typhoïde, soit le sérum d'un typhique convalescent, les microbes ainsi injectés s'agglutinent et se déforment. Grüber (5) et Durham (6) montrent que ce pouvoir agglutinatif du sérum des animaux immunisés se manifeste également in opitro VIsà-vis du bacille d'Eberth et, de plus, qu'aux mêmes doses il est sans action sur diverses espèces de colibacille. Pleiffer et Koll (7) s'aperçoivent encore que si on additionne de sérum d'animaux immunisés du bouillon et qu'on l’ensemence ensuite du bacille d'Eberth il se forme un agrégat de petits flocons au

(4) Annales de l'Institut Pasteur, 1891, p. 473-474.

(2) Annales de l'Institut Pasteur, 1892, p. 269.

(3) Zeitschrift für Hygiene, 1894, p. 122.

(4) Ueber die specifische Immunilaets réaction. Zeitschrift für Hygiene, 1896, B 21, H 2, p. 203.

(5) Active und‘passive immunitaetgegen choléra und typhus, etc. Wiener Klinische Wochenchrif!, 1895, n° 11 et 12 p. 183 et 201.

(6) Société Royale de Londres, 3 janvier 189,6.

(7) Zur differential des typhus bacilles, etc., Deutsche medinische Wochenschrift, 9 mars 1896, p. 185.

fond du tube, alors que la partie supérieure demeure claire au lieu de se troubler comme à l'ordinaire, Grüber et Durham (1) continuent leurs recherches, mais au lieu de persister dans la voie dans laquelle ils commençaient à s'engager s'en détournèrent, aucontraire, en ne reconnaissant plus cette fois à la réaction un earactère spécifique; cette spécificité de la réaction non encore éclos était frappé dans l'œuf par la communication de M: Bordet (2) qui ne vit là qu'un phénomène moléculaire sans importance de l’ordre de celui qui se’ produit lorsque, ajoutant quelques gouttes du sérum d’un animal au sang d'un autre animal d'espèce différente, on constate parfois un amoncellement de globules rouges.

Donc lorsque M. Widal reprit la question, la réaction était loin d’être considérée comme spécifique, on était loin de s'entendre sur le sens à donner à cette propriété agglutinante et surtout on était loin de se douter qu’allait naître ce procédé merveilleux, dont la clinique est aujourd'hui dotée et que le monde médical universel a consacré du nom de «séro-diagnostic de Widal », du nom de l’auteur qui démontra que la réaction d'agglutination n'est point une réaction d'immunité comme on le croyait jusque là (3), mais une réaction d'infection spécifique de l'infection qui la provoque et contemporaine

(1) Eine neue Méthode zur raschen Erkennung etc., Munchener medinische Wochenschrifl, 31 mars 1896, p. 285.

(2) Annales de l'Institut Pasteur, 24 avril 1896.

(3) Comme on peut s'en convaincre en lisant la communication de Grüber au Congrès de Weisbaden, 9 avril 1896. « La principale raison qui me fait apparaitre parmi vous, c'est d'engager Messieurs les Cliniciens, à rechercher la réaction agglutinante dans le sérum sanguin des anciens cholériques et des anciens typhiques ».

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de cette période d'infection et se prolongeant habituellement dans la convalescence au lieu d'y naître comme on le croyaitégalement et c'est cette double constatation qui pernut d'utiliser la réaction pour dépister une fièvre typhoïde.

Rappelons qu'à cette époque on ne disposait pour cela que des moyens difficiles, aléatoires ou dangereux; difficiles puisqu'il s'agissait de différencier et d'identifier un microbe comme le bacille d'Eberth qui a tant de ressemblances avec ses voisins du groupe Eberth-Coli; aléatoire lorsqu'on s'adressait à la recherche du bacille dans le sang; dangereux lorsque pour arriver aux fins du diagnostic bactériologique, on s’adressait à la ponction de la rate.

L'origine de cette idée que le sérum des typhoïdiques possédait au cours de la maladie des propriétés spéciliques, appartenait à MM. Chantemesse et Widal puisqu'en 1892 (1) ces auteurs montrèrent que le sérum des malades atteints de fièvre typhoïde pouvait immuniser les animaux.

On a longuement discuté sur la signification et l’origine du phénomène de l’agglutination, Dineur (2), avait attribué ce phénomène de l’agglutination au rôle joué par les cils vibratifs du bacille d'Eberth, mais on ne tarda pas à démontrer que des bacilles immobiles et dépourvus de cils comme le pneumocoque présentait aussi ce phénomène. Grüber (3) l’expliquait par une modification

(4) Annales de l'Institut Pasteur.

(2\ Bulletin de l'Acad. Royale de Belgique, 1898, p. 602. (3) Wiener Klin. Woschenschr., 1896, p. 183, 204.

de la membrane des bactéries qui se gonflerait sous l'action du sérum; mais Bordet (1) montra que si le sérum était privé de son complément parle chauffage, 1l ne gonflait plus les microbes qui continuaient pourtant à être agglutinés. È

On se demanda également à quelle partie du sang devait être attachée l'agglutinine : pour M. Bordet c'était aux leucocytes. « La transformation extracellulaire des vibrions dans la cavité péritonéale est due à cette circonstance assez fortuite qu'il y a, dans cette cavité, au moment de l'infection, suffisamment de leucocytes pour que le liquide ambiant devienne bactéricide et qu'il y en à trop peu pour que la phagocytose se fasse sur une grande échelle » (Bordet), mais MM. Achard et Bensaude filtrent le plasma et le liquide filtré, dépourvu de leu- | cocytes agglutine tandis qu'au contraire les globules blancs retenus n’agglutinent pas (2), ce qui dénote que cette propriété tient au sérum.

MM. Widal et Sicard en étudiant séparément les trois albumines du sang, constatent que : 1° le sérum-globuline, qu'on précipite par le sulfate de magnésie à saturation retient à peu près tout le pouvoir agglutinatif tandis que :

2 Le sérum albumine retenu ne le possède presque plus.

3 Quant au‘fibrinogène, qui n'existe que dans le plasma, et qu’on peut obtenir en empêchant le sang de coaguler par l’oxalate de potasse, par exemple, séparé

(1) Annales de l'Institut Pasteur, 1899, p. 225. (2) Presse Méd., 1896, n° 80.