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par du chlorure de sodium en solution, possède lui aussi le pouvoir agglutinatif à un degré élevé. Le pouvoir agglutinalif est, comme on le voit, dansle sang, surtout la propriété du sérum globuline et du fibrinogène qui sont des albuminoïdes, donc toutes les humeurs qui découlent du sang, larmes, sérosités, etc., et qui conliennent des substances albuminoïdes possèdent ce pouvoir, tandis que d’autres dérivés, tels que liquide céphalo-rachidien, - salive, qui sont pauvres en substances albuminoïdes, en sont à peu près dépourvus.

Voici en quels termes, M. Widal, expliquait la TECHNIQUE DU SÉRO-DIAGNOSTIC

« Je commence par l'examen extemporané au microscope, après mélange du sérum à une culture en activité dans la proportion de 1 pour 10 et même 1 pour 5. Lorsque la préparation est agitée de nombreux mouvements browniens on a tout intérêt à la laisser reposer un quart d'heure à une demi-heure, pour bien saisir la formation des amas. On doit toujours examiner par comparaison une préparation de la culture faite avant l'addition du sérum.

L'usage d'une culture jeune, datant d'un ou deux jours est préférable. Je dirai même que, si le développement d’une culture est suffisamment riche, plus elle est jeune, meilleure elle est. Une culture en bouillon ‘bien neutre, vieille de plusieurs jours, peut permettre le diagnostic, pourvu qu'on se conforme aux indications fournies plus loin. En pratique, dans un laboratoire d'hôpital, on peut toujours avoir des cultures datant

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de quelques jours, suffisantes pour permettre l'examen immédiat.

« Si l'examen extemporané me montre les amas nombreux et confluents franchement bactériens et parsemant tous les points de la préparation à la façon des îlots d’un archipel, mon diagnostic est fait. Si les amas tout en étant caractéristiques, ne sont pas très confluents, ou si je ne trouve que des bacilles mobiles ou isolés, j'examine de nouveau le mélange après plusieures heures; à l'œil nu et au microscope, après ce temps, le phénomène, lorsqu'il existe, est souvent apparent. En cas de résultat négatif, je réitère plusieurs jours de suite l'examen, tant que les symptômes suspects persistent. Si l’on ne possède qu’une culture très ancienne ou même une culture datant de quelques jours mais donnant par le microscope avant l'addition du sérum, des précipités de faux amas, il ne faut pas hésiter à rajeunir la culture et à remettre la réponse au lendemain.

«On peut mélanger le sérum au bouillon, ensemencer et mettre à l’étuve, en quinze heures et même moins, les microbes se sont amassés au fond du tube, pour y former de petits flocons blanchâtlres, et laissent le bouillon presque complètement clair; par agitation ces flocons n'arrivent pas à se dissoudre complètement, ils laissent toujours un précipité nageant dans lé liquide sous forme d’une très fine poussière.

« J'emploie constamment ce procédé, concuremment avec le procédé extemporané, quand je dispose d'un sérum pris dans des conditions d'une pureté absolue.

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La prise dans la veine donne seule une certitude à peu près complète.

« Si je ne suis pas sûr de l’aseptie de mon sérum, je rajeunis une culture en l’ensemençant en bouillon simple.

« En moins de 24 heures, j'ai une culture nouvelle, suffisamment troublée pour donner le phénomène au microscope, immédiatement après l'addition du sérum des typhiques.

« J'ajoute que quelques heures après ce mélange les grumeaux peuvent être visibles à l'œil nu.

Un résultat négatif obtenu avec le sérum d’un malade suspect fournit une probabilité contre le diagnostic de la fièvre typhoïde, maisce n’est qu’une probabilité, surtout si la recherche n’a été faite que dans les premiers jours. La probabilitéest d'autant plus grande que l’examen est pratiqué à une époque plus avancée de la maladie ».

D'ailleurs il est toujours nécessaire, en cas de résultat négatif, de procéder à plusieurs examens car « non seulement le pouvoir agglutinatif présente des variations considérables et rapides, mais il peut momentanément disparaître en un point quelconque de la courbe. Une séro-réaction négative, prise isolément, ne signifie donc rien quant à l'absence d’une typhoïde. (1)

Aux trois procédés plus haut décrits : procédé extemporané, procédé lent d’ensemencement sur bouillon additionné du sérum et procédé macroscopique, addition du sérum à une culture en bouillon déjà formée, MM. Widal et Sicard ajoutèrent deux modifications :

(4) Pamart, thèse Paris, 1898-1899.

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1° L'emploi du sang desséché (1) qui peut l'être soit sur de petites éponges, soit sur du papier et qui mis en présence d'une petite quantité d'eau fournit une solution capable de donner la réaction d'agglutination qui n’est pourtant jamais aussi nette qu'avec du sérum frais. MM. Widal et Sicard (2) s'expliquaient à ce sujet en ces termes :

« Nous imprégnions de petits fragments d'éponges avec 4 ou.5 gouttes de sang que nous laissions dessécher; nous imbibions d'abord ces petits morceaux d’éponge pendant une demi heure avec 10 ou 15 gouttes de bouillon simple, puis une goutte du mélange était ensuite versée dans 5 gouttes de culture de bouillon de bacille d'Eberth ».

Ou «après piqûre du doigt on laisse tomber quelques gouttes de sang sur une feuille de papier à intervalles espacés, on laisse ces gouttes complètement dessécher à l’air, pendant 6 heures environ. Pour la recherche de la réaction on découpe exactement avec des ciseaux une rondelle de papier contenant une goutte de sang desséché, puis dans un godet en verrede montre, contenant deux gouttes d'eau, on place une de ces rondelles, de façon à ce que la face recouverte par la goutte de sang soit tournée vers le fond.

Avec une baguette de verre on agite pendant quelques minutes la rondelle de papier en la comprimant contre les parois du godet, jusqu'à ce que le sang desséché ait été complètement dissous dans les deux gouttes

(1) Soc. Méd. des Hôpitaux, 31 juin 1866.

(2) Soc. de Biol., 9 janvier 1897, p. 20.

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d'eau, que l’on mélange alors à 8 gouttes de culture de bouillon de bacille d'Eberth » etc.

2° L'emploi des bacilles morts (1) qui supprime les dangers de contamination qui existent en manipulant les cultures vivantes et qui facilite la conservation des cultures « si l’on tue une culture de bacilles d’Eberth vieille de 1 à 2 jours, en l’exposant pendant une demi heure à la température de 60°, ou en l’additionnant d'une goutte d'essence de moutarde ou mieux d'une goutte de formol pour 5 centimètres cubes de bouillon, les bacilles continuent à s'agglomérer ».

Plus tard vinrent s’adjoindre trois autres procédés : l’hémolyso-réaction de Widal et Lesourd ; l'ophtalmodiagnostic de Chantemesse et Le gelo-diagnostic de Chantemesse.

L'HÉMOLYSO-RÉACTION est une application du phénomène de Bordet et Gengou quiest basé sur la déviation du complément par la fixation de l’anticorps sur l’antigène. Si nous prenons du sérum contenant de l'anticorps (sérum de typhoïdique) et que nous le mellions en présence d'antigène (bacilles d'Eberth), l'anticorps se fixe sur l’antigène en s’aidant du complément contenu dans tout sérum qu'il dévie à son profit et dont on peut s’en assurer, grâce à une réaction colorante, l'hémolyse. Tout sérum possède de l’hémolysine, substance qui produit Ia dissolution ou hémolyse des globules rouges d’une espèce différente, cette puissance hémolysante variant d'une espèce à l’autre et se manifestant également à des

(1) Société Méd. des H6p., oct. 1896.

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degrés divers vis-à-vis des globules des différentes espèces. De même que la propriété agglutinante habituellement latente se renforce sous l’action de la présence d'un microbe, de même la qualité hémolysante se renforce sous l’action de l'introduction des globules rouges d’une espèce différente, dans l’un et l’autre cas ce renforcement est spécifique, c’est-à-dire dirigé seulement contre l'espèce microbienne ou globulaire introduite. C'est ainsi que l'on prépare artificiellement une hémolysine anti-mouton très active, dans le sérum d'un lapin en y injectant à plusieurs reprises des globules rouges de mouton. Pour se produire, cette action hémolysante a aussi besoin de complément, puisqu'elle ne se produit plus après chauffage à 55° à laquelle température le complément est détruit, Donc comme d’une part c'est une action colorante, vu que le sérum surnageant les globules est teinté de rouge lorsque l’'hémolyse est produite et que d'autre part elle réclame du complément pour se produire, il nous sera ainsi facile, en nous adressant à cette réaction, de savoir si le sérum examiné con-

tient de l’anticorps, — c’est-à-dire si c’est celui d’un typhoïdique, — car dans ce cas l’anticorps s'étant fixé

sur l’antigène le complément n’est plus libre et l'hémolyse ne se produit pas. | Prenons donc :

1° Sérum du malade à examiner, chauffons-le à 55° pour détruire le complément. Ce sérum contient de l’anticorps éberthien, si c’est celui d'un typhoïdique et n'en contient pas si le malade n’a pas la fièvre typhoïde. 2° Bacille d'Eberth (antigène).