‹ Contribution À L'Étude Toxologique Du BenzèneChapitre 44 sur 84 · TECHNIQUES HÉMATOLOGIQUES ET CHIMIQUES UTILISÉES · texte numérisé non relu

TECHNIQUES HÉMATOLOGIQUES ET CHIMIQUES UTILISÉES

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Le benzène étant un poison du sang nous avons suivi, sur nos animaux d'expérience, les phases de l’intoxication par de fréquents examens hématologiques effectués parallèlement avec les dosages chimiques. Dans la plupart des cas, nous avons également procédé à l'examen des urines, sur les Chiens en particulier. Afin d'éviter des modifications sanguines d’origine digestive, tous les prélèvements en vue des examens hématologiques ou chimiques étaient effectués le matin, sur des animaux à jeun depuis douze heures au moins.

[. EXAMENS HÉMATOLOGIQUES

Nous avons effectué les examens hématologiques suivants : temps de saignement, temps de coagulation, numération des hématies et des leucocytes.

établissement de la formule leucocytaire, taux d’hémoglobine à l’échelle de TALLQvisr, vitesse de sédimentation globulaire.

Chez le Chien et chez le Lapin, les quelques gouttes de sang nécessaires à ces examens étaient prélevées par incision, au vaccinostyle, d’une veinule auriculaire ; pour la détermination de la vitesse de sédimentation, les 2 em de sang nécessaires sont prélevés à la saphène du Chien et au cœur, pour le Lapin. Chez le Cobaye et chez le Rat, les prélèvements sont effectués

à la saphène externe.

Les différents examens ont été effectués selon les techniques classiques que nous nous bornerons à rappeler brièvement.

Pour la numération globulaire, le sang est prélevé à l’aide du mélangeur de Porain et dilué au 1/200€ dans le liquide de MarcANo, pour les hématies, et au 1/10€ dans l’eau acétique à 1 p. 100, colorée au bleu de méthylène, pour les leucocytes.

La numération est effectuée à l’aide de l’hématimètre de Mazcassez. Nous faisions toujours, pour les hématies, la numération des éléments de 3 rectangles, correspondant chacun à un centième de millimètre cube et nous comptions les leucocytes de 50 de ces rectangles.

Les résultats expriment le nombre d’éléments (hématies ou leucocytes), par millimètre cube de sang.

Pour l'établissement de la formule leucocytaire, les étalements de sang, sont fixés et colorés par le procédé de MAY GRUNWALD- GIEMSA.

Le temps de saignement est établi par incision d’une veinule auriculaire, la gouttelette de sang s’écoulant est aspirée, toutes les trente secondes, à l’aide d’un papier buvard, jusqu’à l’arrêt spontané de l’écoulement. Le temps de saignement normal est de 2 à 3 minutes.

Le temps de coagulation est déterminé par le procédé de la lame couverte. On observe la déformation d’une grosse goutte de sang déposée sur une lame de verre et protégée de l’évaporation par un petit cristallisoir. La coagulation est terminée lorsque la gouttelette ne se déforme plus sensiblement par inclinaison de la lame. La coagulation nécessite normalement 6 à 7 minutes.

La mesure du temps de sédimentation des hématies a été effectuée par la méthode de WESTERGREN, modifiée par J. FoRESTIER [71].

Le sang est prélevé à l’aide d’une seringue graduée spéciale, dans laquelle on à préalablement aspiré 0 em”, 4 d’une solution anticoagulante de citrate de soude à 5 p. 100. On prélève

exactement 1 cm’, 6 de sang, de manière à obtenir 2 cm° de liquide au total. Le sang citraté est mis dans un tube et agité soigneusement. On l’aspire dans des tubes de verre dits de WESTERGREN, longs de 30 cm. et larges de 2 mm., 5, ouverts aux deux extrémités et portant un trait de repère situé exactement à 20 mm. de l’extrémité inférieure. Le sang prélevé est amené exactement au trait de repère, les tubes sont bouchés aux deux extrémités et maintenus verticalement à l’aide d’un statif spécial.

Après une heure de repos, on mesure, au moyen d’une réglette métallique, le nombre de millimètres qui séparent le niveau supérieur du culot globulaire, du niveau primitif de la colonne liquide. Ce nombre exprime ce que l’on est convenu d'appeler le temps de sédimentation. On répète cette mesure après deux heures et après 24 heures.

Les chiffres normaux sont, pour le Lapin, 1 à 2 après une heure et 10 à 15 après 24 heures. Ils sont un peu plus faibles pour le Chien.

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