II. — EXAMENS CHIMIQUES DU SANG

Pour les dosages chimiques, les prises de sang sont effectuées de la manière suivante :

sur le Chien, prélèvement de 100 em”, par ponction de la veine Jugulaire externe ;

sur le Lapin, 20 cm° sont prélevés par ponction cardiaque ;

sur le Rat, on obtiendra 5 em de sang environ, par section des carotides.

Le sang est recueilli dans des récipients, soigneusement nettoyés au mélange chromique et rincés à l’eau bi-distillée.

Les dosages suivants ont été effectués sur chaque prise de sang : — sur le sérum: dosages de l’urée, du cholestérol, des lipides, du calcium et détermination du rapport sérine /globuline ;

— sur le sang total : dosage du fer et du glucose.

Nous avons également déterminé, à la fois sur le plasma et sur le sang total, les taux de chlore, de potassium et de sodium. La teneur des globules en ces différents éléments était obtenue par le calcul.

Enfin le phosphore minéral a été dosé sur le plasma fluoré.

Ces dosages ont été effectués selon les techniques classiques bien établies, certaines cependant, d’un maniement délicat, ont nécessité de notre part, une étude préalable parfois longue.

Le sang obtenu au cours des prélèvements était traité différemment selon les cas.

Pour l'obtention du sérum, le sang est recueilli dans des tubes à centrifuger, puis laissé une heure, à la température du laboratoire, pour que s'opère la coagulation. Le sérum est alors séparé par centrifugation.

Dans les cas où nous devions opérer sur le plasma ou le sang total, nous avons rejeté l'emploi des anticoagulants salins qui modifient la répartition initiale de certains éléments entre plasma et globules, sauf pour la glycémie et la phosphatémie où l'utilisation de fluorure est indispensable pour imhiber l’action des diastases,

Nous ne disposions pas d’hirudine et nous n'avons pu pratiquer, d'une façon courante, en raison des difficultés de prélèvement sur l’animal, le procédé préconisé par Ch.-0. GUILLAUMIN [83] : prélèvement du sang dans un tube gradué bien sec, refroidi, centrifugation immédiate, décantation du plasma et prélèvement des globules à l’aide d’une pipette de GUILLAUMIN, avant toute coagulation.

Nous avons donc dû adopter une technique déjà utilisée au laboratoire pour des recherches analogues : la défibrination, par agitation modérée avec des perles de verre, le sang étant ensuite passé sur une gaze. Une portion est rapidement versée dans un ou plusiurs tubes à centrifuger, d’une contenance de 10 em’, gradués à 1/10 cm’, on centrifuge 5 minutes à 5.000 tours et on note le volume total et celui du culot globulaire. On détermine ainsi, avec une précision de 2 p. 100, le volume globulaire ou rapport entre le volume occupé par les globäies et le volume occupé par le plasma.

Les dosages sont effectués sur le sang total et sur le plasma, le taux des divers é'éments des globules étant déduit par le calcul.

Tous les résultats sont exprimés en grammes par litre, du

constituant ou de l'élément dosé, sauf pour le fer où il est exprimé en grammes pour 1.000 g. de sang.

La plupart des techniques utilisées sont trop connues pour que nous Jugions utile de les détailler. Nous nous contenterons donc de les indiquer, on trouvera les détails opératoires dans les Fiches de Chimie biologique de P. FLeury [64]. Nous développerons les techniques qui sont moins connues ou qui auraient fait l’objet d'observations personnelles.