TROISIÈME PARTIE

Protéines thyroïdiennes

L'étude des protéines thyroïdiennes présente des intérêts multiples. En effet, la formation biologique de ia thyroxine s'opère dans une molécule protéique en quelque sorte spécialisée, présente dans les vésicules colloïdes de l’organe : la thyroglobuline. Il est, de ce fait, important de définir cette protéine dans la mesure du possible et d’étudier sa composition et ses propriétés. Par ailleurs, on sait depuis longtemps que le corps thyroïde est susceptible de présenter des variations importantes dans sa teneur en iode, et il y a lieu de préciser si celle-ci relève d’un défaut de sécrétion d’une thyroglobuline iodée en proportions invariables ou si le degré d’halogénation de cette protéine est susceptible de se modifier sous diverses influences.

Ceci étant, nous nous sommes proposés d'étudier dans un premier temps la préparation de la thyroglobuline pure et non dénaturée, les méthodes décrites jusqu'ici ne paraissant pas satisfaisantes à cet égard. Ayant obtenu des produits pouvant être considérés comme purs, nous avons, dans un second temps, étudié leur composition en acides aminés et leurs caractères physicochimiques, ce qui nous a permis de proposer une définition de la thyroglobuline reposant sur des critères de pureté aussi bien définis qu'il soit possible d’en disposer actuellement en biochimie des protéines.

Etude de la préparation de la thyroglobuline.

I. — L'isolement d’iodoprotéines thyroïdiennes a été opéré par diverses techniques dont les modalités reflètent deux préoccupations dominantes : d’une part obtenir des produits homogènes pouvant être considérés comme des corps purs ; d’autre part rechercher si la glande renferme ou non un mélange d’iodoprotéines correspondant à divers degrés d’halogénation et, le cas échéant, les séparer. La solution de l’un et l’autre problèmes est nécessairement liée à l’obtention de protéines pures.

Après les travaux préliminaires de BAUMANN et Roos [17], de BuBxow [38], de GourLAY [60], d’'HUTCHISON [87-88], montrant le caractère globulinique des fractions iodées de l’extrait thyroïdien, OswaLD [145] entreprit l’étude de la thyroglobuline, qu’il proposa de séparer par précipitation acétique après fractionnement au sulfate d’ammonium à demi-saturation. Le mode opératoire d'OswALD conduisant, selon HEIDELBERGER et RALMER [80] à un produit dénaturé, ces auteurs. lui ont substitué la précipitation de la thyroglobuline au sulfate de sodium à 21 g pour 100 cm après délipidation au toluène et séparation d’un nucléo-protéide insoluble à pH — 4,8-5,0. Pour CAVETT et SELJESKOG [41] les préparations ainsi obtenues sont en partie dénaturées et renferment des lipides en quantité appréciable. Il n’en serait plus ainsi lorsque la protéine est préparée par extraction à 9° au moyen d’une solution isotonique de chlorure de sodium, de coupes minces de l’organe congelé, et précipitation de la thyroglobuline entre 35 et 45 p. 109 de la saturation des solutions en sulfate d’ammonium.

Bien que cette protéine (HEIDELBERGER et PALMER) soit homogène au regard de l’ultracentrifugation et de l’électrophorèse (HEIDELBERGER et SVEDBERG [82], HEIDELBERGER et PEDERSEN [81], LUNDGREN [120]), la question de la présence de plusieurs thyroglobulines dans le corps thyroïde demeure ouverte. ABE- LIN et KELLER [8], BLUM, LEHMANN et LEISTNER [27] et, plus