‹ Contribution à la Biochimie des Iodoprotéines et des Acides Aminés iodésChapitre 53 sur 79 · LOG · texte numérisé non relu

LOG

récemment, RIVIÈRE, GAUTRON et THELY [175], ont séparé d’extraits d'organes ou de thyroglobulines des produits de degrés d’ioduration diverses et pensent, de ce fait, avoir montré l’'hétérogénéité de l’iodoprotéine thyroïdienne. Leurs conclusions ne sauraient être adoptées sans réserves, la pureté des préparations employées par ces auteurs et le caractère protéique de toutes les fractions iodées obtenues reste à démontrer. L’absorption d'acides aminés iodés ou d’ions iode à certaines de celles-ci peut en effet être à l’origine des faits observés. Néanmoins, il est très probable que le degré d’ioduration physiologique de la thyroglobuline peut subir des variations importantes et l’on peut envisager que le corps thyroïde d’un même animal renferme un mélange de protéines plus ou moins richement halogénées.

Il y avait intérêt à reprendre l'étude de la préparation de la thyroglobuline pour diverses raisons. D’une part, le contrôle de l'efficacité des moyens de purification adoptés jusqu'ici s'avère nécessaire pour établir une méthode permettant d’obtenir de la thyroglobuline pure et non dénaturée ; aucune des techniques actuelles n’offre de garanties à cet égard. D'autre part, la préparation de l’iodoprotéine thyroïdienne pure permettrait seule d’étudier avec sécurité le problème de l’unité ou de la multiplicité des thyroglobulines. Il convenait pour entreprendre ce travail de disposer de critères d’homogénéité ou d’hétérogénéité des milieux protéiques, et ni l’ultracentrifugation, ni l’électrophorèse n’avaient permis à cet égard une analyse fine des préparations obtenues par HEIDELBERGER et PAL- MER. Nous avons employé dans ce but le test de solubilité des protéines en fonction de la concentration en sels neutres élaborés par E. J. Conn [42, 43, 44, 45, 46, 47, 48] et appliqués sur une large échelle par ROCHE et DERRIEN [177, 178, 179, 180, 181], sous la forme récemment développée par DERRIEN [54]. L'établissement des diagrammes de solubilité en fonction de la concentration en protéines dans un milieu de teneur constante en sel neutre (NoRTHROP [144]) a été mise en œuvre par ailleurs.

Certains problèmes devaient nécessairement être abordés à propos de ce travail en dehors du domaine technique. La teneur en iode des thyroglobulines s’est avérée variable (de 0,07 à 0,8 p. 100 selon OswaLp [145]) et de nombreux auteurs admettent avec HARINGTON [67] que « cette variabilité seule : suffit à indiquer que la thyroglobuline est mal définie et que,

oe

même à l'heure actuelle, aucune preuve de l'isolement d’un produit homogène n’a été apportée ». Par contre HEIDELBERGER et PALMER [80], CAVETT Mac CLENDON et RICE [40], considérant que la pureté d’une thyroglobuline peut être appréciée au moyen de son taux en iode, les derniers auteurs ayant obtenu à partir d'animaux d’abattoir des préparations renfermant jusqu’à 0,69 p. 100 de celui-ci. En l’état de nos connaissances sur l’ioduration physiologique de la thyroglobuline, on peut penser que la fixation de l’halogène s’opère avec une intensité variable sur un produit de composition en acides aminés et de structure constantes. 11 en découlerait que cette protéine est bien définie, à sa teneur en dérivés iodés près. Notre travail était susceptible d'apporter une contribution à la solution de ce problème. De plus l'étude des thyroglobulines de quatre mammifères (Bœuf, Cheval, Chien, Porc) devait permettre de préciser l'existence éventuelle de caractères spécifiques de celles-ci ; d’autres protéines, comme les hémoglobines présentant à cet égard une grande diversité.

Nous avons, dans une première série de recherches, défini et localisé les protéines iodées dans les extraits thyroïdiens. Nous avons ensuite préparé des thyroglobulines par les méthodes d’OSWALD, d'HEIDELBERGER et PALMER, de CAVETT et SELJESKOG et identifié dans celles-ci les impuretés ou les fractions dénaturées. Cette étude ayant précisé les facteurs de dénaturation et les caractères de solubilité de la thyroglobuline, nous avons élaboré une méthode de préparation de cette protéine pure non dénaturée, ce qui n'avait pas été réalisé auparavant. Un examen général des résultats obtenus a permis de définir la thyroglobuline au regard de critères chimiques, physico-chimiques et discuter le problème de son homogénéité.

Il. — Recherches personnelles.

Page 1