À. — TECHNIQUES

Les préparations d'extraits thyroïdiens et de thyroglobuline ont été obtenus selon les techniques précisées plus bas à partir de glandes (*) de taille et de poids normaux (Bœuf 10-14 g,

(*) Nous remercions MM. les Vétérinaires des Abattoirs de Marseille en particulier le Docteur PLaGipi, d’avoir assuré le contrôle de l’état el de la taille des corps thyroïdes destinés à nos recherches et M. le Professeur MERCIER (Pharmacologie, Marseille), d’avoir bien voulu nous fournir les organes de chiens utilisés pour ce travail.

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Cheval 8-12 g, Porc 12-14 g) sur des animaux sains ou de glandes de Chien.

Elles ont fait l’objet de recherches sur la solubilité de leurs constituants protéiques en fonction de concentrations croissantes en sulfate d’ammonium ou en milieu équimoléculaire de phosphates mono et dipotassique à pH = 6,5 et à 22°, ou en sulfate de sodium à PH =00,5%etta 8e poursuivies selon les modalités réglées par Y. DERRIEN [53] (temps d'équilibre 20 heures à température réglée à + 0,05° pH défini à + 0,05 près. concentration en N protéique 0,8-1,4 Mg par cm). Les dosages d’azote protéique qu’elles ont comportés ont été opérés par microkjeldahl dans des conditions techniques rigoureuses ; l'erreur relative dont leur précision est entachée ne dépasse pas 0,5 p. 100, sauf en présence de sulfate d’ammonium. Dans ce dernier cas, l’application de la méthode d'A. ROCHE et MAR- QUET [176] a permis d'obtenir des résultats à 1 p. 100 près.

L'expression graphique des résultats de ces dosages a été pour chaque expérience, établie simultanément selon la représentation classique de la variation de la solubilité S (Mg N protéique dissous par em“) en fonction de la concentration en sel neutre C.

Dans le cas d’une protéine homogène, la courbe s = f (ec) est formée par un segment d’exponentielle tendant asymptotiquement vers l’ordonnée zéro (E. J. COHN). Dans le cas d’un mélange de protéines de solubilité différentes, ce mode de représentation graphique conduit au tracé d’une courbe discontinue, formée par une succession de segments raccordés par des points particuliers (ROCHE et DERRIEN [177]). Les courbes s — f (c) se prètent assez bien à la détermination quantitative des divers constituants d’un mélange protéique et permettent d'entreprendre le fractionnement rationnel de ce dernier [178, 179, 181, 127].

Afin d’alléger la présentation de ce travail, nous nous sommes bornés à y insérer une série de clichés sans y joindre de valeurs numériques. Ces figures rendant compte des résultats de nos recherches sont constituées dans chaque cas par la représentation du type de courbe décrit ci-dessus. Les valeurs de S définies plus haut ont été portées en ordonnées en fonclions des concentrations en sel C porté en abscisses. C est exprimé en p. 100 en volume de solution saline stock (SO, (NH): saturé,, SO{Na; à 25 g pour 100, mélange équimoléculaire de POIKH + POKH, 3,5 M). Cette définition des systèmes de

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cordonnées adoptés ne sera pas répétée dans la légende de chaque figure, laquelle ne comporte que l'indication du produit étudié et des conditions de l’expérience. L’iode total a été dosé par les méthodes de LEIPERT [106] et de MICHEL et LAFON [135] et le phosphore total par la méthode de NEUMANX (technique de MOURGUE [139]) dans les extraits thyroïdiens ou leurs produits de fractionnement. Le contrôle du pH (+ 0,05) a été opéré par potentiométrie (électrode de verre).

B. —— ETUDES DES PROTÉINES DES EXTRAITS THYROÏDIENS.

La méthode d'HEIDELBERGER et PALMER [80] comporte dans un premier temps l’extraction à la presse de pulpe de corps thyroïde finement haché après lavage à l’eau glacée, cette opération étant répétée après mise en suspension de l’organe pressé dans une solution à 1 pour 100 d’acétate de sodium. Celle de CAVETT et SELJESKOG [41] extrait la thyroglobuline brute de coupes minces de l’organe congelé, par des solutions isotoniques de chlorure de sodium de pH — 7,6 (20 heures de contact à 0°). Nous avons comparé les produits obtenus par ces deux modes opératoires et étudié leur rendement.

Les protéines extraites par l’un ou l’autre procédé sur un lot homogène de corps thyroïde présentent une teneur en iode pratiquement identique, en général un peu plus élevé dans le produit obtenu selon CAVETT et SELJESKOG, par exemple, 0,254 p. 100 pour le premier et 0,269 p. 100 pour le second. Par contre, le rendement de l’opération est nettement supérieur avec la technique de ces derniers auteurs (40 pour 100 environ dans les conditions où nous nous sommes placés) et conduit à des milieux beaucoup moins riches en lipides. Dans les deux cas, l'extraction des glandes saines et de taille normale fournit des protéines de teneur en iode très diverses. Pareils écarts dans le taux de l’iode protéique ont été constatés par certains auteurs et non par d’autres ; ils tiennent probablement aux conditions alimentaires des animaux, mais aussi aux variations saisonnières de l’activité de l’organe. Les résultats obtenus à partir du corps thyroïde de pores provenant d'élevage régionaux et d'animaux d’abattoir ou de laboratoire d’origine indéterminée ont été rassemblés dans le Tableau XX.

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