A. MÉTHODES DE DOSAGES

1. La thyroxine et la diiodotyrosine seules donnent en présence d'ions nitreux la réaction colorée propre aux o. diiodophénols, tandis que la réaction de MILLON n’est positive qu’en présence de monoiodotyrosine. Par ailleurs, la thyroxine peut être quantitativement séparée de la diiodotyrosine grâce à sa solubilité dans le n. butanol et la monoiodotyrosine traitée par le réactif de MILLON donne naissance à un dérivé coloré dont les caractères spectraux ne sont pas identiques à ceux du dérivé de la tyrosine. Ces faits ont été mis à profit pour établir le dosage des trois acides aminés purs et dans leurs mélanges, additionnés ou non de tyrosine.

2. L'étude quantitative des réactions colorées de la thyroxine, de la diiodotyrosine et de la monoiïodotyrosine en présence de divers acides aminés et celle de leur stabilité dans les conditions de l’hydrolyse alcaline des protéines a permis d’appliquer à ces dernières les méthodes de dosages des dérivés iodés établis sur leurs solutions pures.

3. De techniques particulières ont été élaborées pour les produits thyroïdiens pauvres en thyroxine et en diiodotyrosine et probablement dépourvus de monoiodotyrosine, et pour les protéines artificiellement iodées, renfermant les trois acides aminés iodés à des taux relativement élevés. Elles permettent de doser la thyroxine sur 50 à 200 Mg de produits avec + 4 p. 100 d'erreur, la diiodotyrosine sur 100 Mg avec + 4 p. 100

d'erreur et la monoiodotyrosine à = 7 p. 100 près sur 100 à 200 Mg. :

B. — 1J0ODOPROTÉINES ARTIFICIELLES.

a. SUR LA FORMATION DE LA THYROXINE ET DE SES PRÉCURSEURS.

1. La formation de monoiodotyrosine, de diiodotyrosine et de thyroxine et la disparition de la tyrosine dans la caséine et dans la thyroglobuline soumises à l’action de quantités croissantes d’iode ont été étudiées dans diverses conditions.

2. L'iode participe à des réactions de substitution, particulièrement intenses en milieu ammoniacal, et à des récations d’oxydation, plus importantes à pH 7,8 et en présence de bicarbonate de sodium. Les premières portent préférentiellement sur la tyrosine mais aussi sur d’autres acides aminés (histidine, phénylalanine), et cela avec une intensité croissante en fonction des quantités d’halogène mises en œuvre. L’ioduration d’une protéine n’affecte spécifiquement la .tyrosine qu'à des taux d’halogène très faibles:

3. De la monoiodotyrosine est présente en abondance dans les produits faiblement iodés ; elle se transforme progressivement en diiodotyrosine sous l’action de quantités plus grandes d’iode, une fraction du dérivé disubstitué donnant alors simultanément naissance à de la thyroxine. La formation de celleci n’est pas seulement fonction de la teneur en tyrosine d’une protéine, toutes choses étant égales du côté des conditions de l’ioduration. La position de cet acide aminé dans la molécule protéique détermine sa réactivité. Une fraction importante de la diiodotyrosine parait inapte à donner naissance à de la thyroxine.

4. Des processus d’oxydation altèrent la thyroxine au cours de l’halogénation des protéines surtout en milieu bicarbonaté à pH 7,8 ; ils décomposent également une partie de la tyrosine et de ses dérivés de substitution. L'existence d’un optimum de rendement en thyroxine en présence de 6 à 7 atomes d’iode par molécule de tyrosine illustre l'importance de ces réactions lors de la mise en œuvre d’un excès d’halogène.