PRÉPARATION DU VACCIN

Isolement des souches.

Nous avons préparé successivement deux formules de vacein avec des germes différents. Après essais sur l'animal __ nous avons adopté la 2€ formule qui comporte l’emploi d’un colibacille, d’un streptocoque et d’un entérocoque.

Le colibacille isolé plusieurs fois dans les liquides de péritonite et sur les tumeurs n’a pas pu être repiqué de façon satisfaisante ; après quelques tentatives nous l’avons abandonné et avons isolé un colibacille dans un cas d’appendicite gangréneuse avec péritonite,

Le streptocoque a été isolé d’un cas de péritonite mortelle après intervention sur la partie terminale du côlon gauche ; il a été prélevé au 32 jour de la péritonite.

L’entérocoque que nous avons utilisé a la même origine, mais la suppuration provoquée par une amputation du rectum n’avait pas été, dans ce cas, mortelle.

Les souches isolées sont ensemencées en bouillon martin olucosé. Après vingt-quatre heures d’étuve à 379, les cultures sont centrifugées (4.000 tours pendant 20 minutes). Après cette première centrifugation, le liquide surnageant est décanté et remplacé par une quantité égale d’eau physiologique. Avec une pipette on refait une émulsion homogène ; ces émulsions sont à nouveau centrifugées pour débarrasser les corps microbiens de toute trace de bouillon.

Ce lavage des corps microbiens est répété 2 fois encore. On numère ensuite les germes en utilisant une échelle d’opacité et l’émulsion microbienne définitive contient par centimètre cube : un nmulliard de colhibacilles, cinq cents millions de streptocoques et cinq cents millions d’entérocoques.

Cette émulsion est répartie en ampoules de 2 centimètres cubes qui sont fermées à la flamme et chauffées pendant une heure à 600,

Contrôle du vaccin.

Le contrôle de la stérilité de ce vaccin est fait de deux façons : in vitro — par l’ensemencement en milieu aérobie et anaérobie; les milieux ainsi ensemencés doivent rester stériles après trois jours ; ên vivo — 5 centimètres cubes de ce vaccin sont injectés dans la euisse d’un cobaye : cette injection ne doit provoquer aucune réaction inflammatoire ; elle doit être résorbée en 12 à 24 heures.