PRÉPARATION DE L’HÉMOGLOBINE. 3S

globuline; car lion seulement celte hémoglobine que nous verrons apte a cristalliser facilement ne s’observe pas dans le globule sous forme de cristaux, mais elle n’y existe môme pas à l’état dissous. Elle ne peut 1 être, eu ellet, par l’eau du globule rouge, qui serait insuffisante, et, quoique cristallisable, elle ne passe aucunement par dialyse dans le plasma qui pourrait la dissoudre. Le globule rouge ou l’oxyhémoglobine récemment extravasée du globule par addition d’eau au sang, décompose énergiquement l’eau oxygénée neutre sans prendre part ellemême à la réaction, tandis que l’hémoglobine cristallisée décompose cette eau oxygénée bien plus lentement et se détruit en même temps. Enfin, l’hémoglobine récemment extravasée n’est pas endosmotique, tandis que l’hémoglobine cristallisée l’est au contraire. Il faut donc que son état dans le globule soit différent de celui sous lequel on la prépare cristallisée et pure.

Préparation . — Les sangs des divers animaux ne contiennent pas la meme variété d’hémoglobine et ne sont pas également propres à l’obtenir. Ceux qui permettent le mieux sa préparation sont les sangs de rat, de souris, de coclion d Inde, de carpe, de perche, de barbeau. 11 suffit de congeler ces sangs, puis d’ajouter à la masse cristallisée son volume d’eau glacée et quelques centièmes d’éther pour que la solution, maintenue a 0°, se transforme bientôt en un magma cristallin. Les sangs de chien, de chat ou de cheval doivent subir le même traitement, mais être additionnés en outre du quart de leur volume d’alcool. Pour d’autres, ceux de l’homme ou du singe, il faut ajouter plus d'alcool encore et refroidir beaucoup. Enfin, ceux de bœuf et de porc ne donnent que très difficilement de l’hémoglobine cristallisée.

Le procédé suivant indiqué par lJoppc-Seyler permet de préparer cette substance à 1 état de pureté. Du sang défibriné frais de cheval, de cochon d’Inde, de chien, de rat ou de carpe est mélangé de 10 fois son volume d’une solution froide contenant 2 pour 100 de sel marin, puis laissé au repos 1 ou 2 jours vers 0°. Un peut alors séparer au siphon et rejellcr la liqueur qui surnage les globules. On introduit ceux-ci dans un ballon, on rétablit avec de l’eau glacée le volume du sang primitif, on ajoute une égale quantité d’éther et l’on agite vivement. Les globules laissent alors cxlravascr leur matière colorante. Après décantation de l’ether, on filtre rapidement à 0° la liqueur rouge aqueuse, et on l’additionne du quart de son volume d’alcool. On abandonne ce mélange autant que possible au-dessous de 0°. Il se prend bientôt en une masse de cristaux qu’on essore rapidement à la trompe et, qu’on lave avec de l’eau glacée alcoolisée. On peut, pour purifier la substance, la redissoudre dans la plus petite quantité d’eau possible à 15°, filtrer rapidement, refroidir dans la glace et ajouter de l’alcool, un quart