RYTHME RE8P

Au moment de l'inj.

1 minute

8 minutes

Il V a eu émission de très nombreux bois fécaux.

Expérience 44.

Un lapm a reçu 3 injections sous-cutanées de sérum de cheval les 7, 13 et 19 février. -Je ne relève aucune lésion locale le 3 mars. A cette date, je lui injecte dans la veine auriculaire 4 centimètres cubes de sérum de cheval.

Je note un abaissement de la pression carotidienne, qui passe de 100 inillinu'lres à 40 millimètres de mercure, et une accélération de la respiration, qui passe du rythme 60 au rythme 110 par minute. Le sany: extrait de la parotide 20 minutes après l'injection présente ses premiers

LA SERO'ANAPHYLAXIE DU LAPIN 37

flocons fibrineux 35 minutes et est coagulé en bloc 50 minules après la prise (retard très net de la coagulation, puisque le sang d'un lapin recueilli dans les mêmes conditions coagule en masse en 15 minutes environ). J'ai pu reconnaître des mouvements intestinaux exagérés, très visibles à travers la paroi abdominale et noter Fexpulsion de bols fécaux assez nombreux.

Le lapin s'est complètement rétabli et n'a pas présenté de cachexie.

// suffit (Vaillenrs d*iine seule injection préparatoire pour anaphylactiser le lapin.

Expérience 45.

Un lapin a reçu le 13 novembre sous la peau de l'abdomen 5 centimètres cubes de sérum de cheval. Le 2 décembre, soit 19 jours après rinjection sous-cutanée, je fais une injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum de cheval.

La pression carotidienne était à 116 millimètres de mercure; elle s'abaisse, 1 minute après la fin de Tinjection, assez lentement du reste, pour se lixer, 4 minutes après la fin de l'injection, à 44 millimètres. La respiration était aurythmede50par minute avant l'injection; elle commence à s'accélérer 1/2 minute après la fin de Finjection pour passer par le rythme de 210 par minute, 5 minutes après l'injection, et revenir progressivement au rythme primilif, qu'elle reprend 16 minutes après l'injection. Il n'y a pas eu émission de bols fécaux. La coagulabilité du sang est diminuée : les premiers flocons flbrineux se forment à 40 minutes; la coagulation est totale en 1 heure. Il n'y a pas eu cachexie consécutive.

Donc une seule injection soUs^cutanée de sérum de cheval suffit à engendrer Vanaphylaxie chez le lapin.

Toutefois, il faut remarquer que cette anaphylaxie n*est jamais aussi intense que celle qu'on obtient dans le même temps en fractionnant les doses de sérum et en répétant les injections,

, On en peut conclure qu'il y a des degrés dans Vanaphylaxie (Arch, internat, de physiologie, vol. 7, fasc. 4 p. 496, 1909).

Si, par exemple, on injecte en une seule fois 40 centimètres cubes de sérum de cheval sous la peau d'un lapin, on peut, par une nouvelle injection de 5 centimètres cubes de sérum de cheval, obtenir les effets généraux anaphylactiques, baisse de pression artérielle, diminution de la coagulabilité du sang, accélération respiratoire, parfois même expulsion de nombreux bols fécanx; mais celte seconde injection n'engendre ni lésions locales, ni cachexie tardive, même si l'essai est tenté 50 jours après l'injection préparatoire.

Si on injecte tous les 6 jours 5 centimètres cubes de sérum de cheval, on note après 8 injections (40 centimètres cubes de sérum au total), ou même après 6 injections (30 centimètres cubes de sérum au total), soit après 48 jours ou 36 jours, tous les accidents anaphylactiques, y compris les accidents locaux les plus graves et la cachexie.

38 DE VASAPHYLAXIE A VIMMVSIIÉ

— En général, les injections préparantes étaient de 5 centimètres cubes de sérum de cheval. Mais on peut réduire considérablement la dose.

En voici des exemples.

Expérience 4G.

Un lapin a reça les 21 et 29 mai, 4 et 11 juin, en injection soûs-culanée, cliaque fois i centimètre cube d'un liquide obtenu en mélangeant 1 centimètre cube de sérum de cheval et t*9 centimètres cubes d'eau salée à 1 p. 100, soit cmc. 01 de sérum par injection, et au total cmc. 04.

Le 26 juin, je pratique une injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression, qui était de 102 millimètres de mercure, commence à baisser 2 minutes après la fin de l'injection; elle continue à baisser lentement pendant 3 minutes, pour se fixer à 42 milliinctres. La respiration présente une légère accélération : elle passe du rythme 60 par minute au rythme 80 (accélération respiratoire, mais pas polypnée). Le lapin ne réagit pas localement à l'injection sous-cutanée; il ne présente pas de cachexie dans la suite.

Expérience hl.

Un lapin a reçu le 8 décembre .en injection sous-cutanée abdominale 10 centimètres cubes de sérum de cheval dilué au centième au moyen d'eau salée à 1 p. ICO, soit cmc. 1 de sérum.

Le 8 janvier, soit 31 jours plus tard, j'injecte dans la veine de l'oreille 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression, avant l'injection, était égale à 100 millimètres de mercure; elle se maintient à ce niveau 1 minute après la fin de l'injection, puis s'abaisse lentement et régulièrement pour se fixer à 80 millimètres. La respiration était au rythme de CO par minute ; elle s'accélère déjà 20 secondes après la fin de l'injection; elle est au rythme de 160 à 1^80 au bout de 2 minutes; elle se maintient à un rythme supérieur à 100 pendant plus de 15 minutes. Il n'y a pas eu émission de bols fécaux. 11 ne s'est pas produit de troubles locaux au niveau d'une injection sous-cutanée de sérum de cheval pratiquée à la fin de-l'essai ci-dessus résumé. Il n'y a pas eu de cachexie tardive.

li est donc possible d'engendrer un état d' anaphylaxie certain mais modéré par une seule injection sous-cutanée de I décigranime de sérum de cheval, chez le lapin,

11 sera établi ci-dessous que les substances anaphylactisanLes sont les protéines du sérum. Or, ces substances né représentent pas plus de 8 pour 100 du sérum, et à coup sûr moins de 10 p. 100. Par conséquent, il est possible d'engendrer fanaphyiaxie chez le lapin, en injectant sous la peau moins de 1 centigramme des substances protéiques anaphylactisantes, soit 1/2 centigramme par kilogramme, les lapins employés pesant environ 2 kilogrammes, ce qui représente 1 p. 200.000 (^4 rcA. internat de physiologie^ vol. 4, tasc. 7, p. 499, 1909).

LA SERO-ANAPHYLAXΠDU LAPIN 39

— L'iiijeclion sous-cutanée de sérum de cheval confère-t-elle instantanément la modification anaphylactique à Tanimal injecté? Ou bien y a-t-il une période d'incubation?

On reconnait sans peine que l'injection de sérum de cheval pratiquée dans les veines de lapins qui ont reçu quelques jours auparavant (3, 4, 5 ou 6 jours auparavant) du sérum de cheval en injection sous-cutanée ne provoque aucun accident, même lé plus minime.

La manifestation la plus précoce de séro-anaphylaxie que j'aie notée a eu lieu au bout de 7 jours.

Expérience 48. ♦

Un lapin avait reçu sous la peau de la paroi abdominale le 17 février 40 centimètres cubes de sérum de cheval. Le 24 février, soit 7 jours plus tard, je pratique une injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum de cheval. Je note une très légère et très courte chute de près-, sion : la pression était à 105 millimètres de mercure avant l'injection;, elle commence à baisser 1 minute 1/2 après l'injection, pour tomber à 94 millimètres, 4 minutes après l'injection; elle remonte à partir de la. minute 8 pour reprendre sa valeur primitive à la minute 11.

il n'y a eu ni accélération respiratoire, ni expulsion de matières, fécales.

Le début de l'anaphylaxie n'a donc pas été pour ce lapin postérieur à 7 jours.

Expériences 49 et 50.

Deux lapins ont reçu en injection sous-cutanée respectivement 20 -centimètres cubes et 10 centimètres cubes de sérum de cheval. Je leur injecte dans les veines, 7 jours exactement après cette injection préparatoire, 4 centimètres cubes de sérum de cheval. Je ne note aucune réaction ana-^ phylactique : en particulier, la pression n'a pas fléchi.

Le début de l'anaphylaxie est donc un peu plus tardif quand la quantité de sérum employée pour la préparation est moindre; un peu plus précoce, quand cette quantité est plus grande.

Expérience 51.

Un lapin a reçu sous la peau de la paroi abdominale le 10 février 20 centimètres cubes de sérum de cheval. Le 18 février, soit 8 jours plus' tard, j'injecte dans la veine de l'oreille 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression, avant l'injection, était égale à 106 millimètres de mercure. Elle s y maintient 4 minutes 1/2, puis s'abaisse, et, en 3 minutes, tombe à 85 millimètres. Elle ne tarde pas d'ailleurs à remonter, et 20 minutes après l'injection, elle est égale à 101 millimètres. 11 n'y a pas eu de modification respiratoire, pas d'expulsion de bols fécaux.

La période d^incubation paraît donc varier quelque peu avec la dosé de sérum injectée au moment de la préparation de l'animal; on peut admettre que Vétat d' anaphylaxie est réa-?>

40 DE VANAPHYLAXIE A VIMMCSITÉ

liséy très faiblement d'ailleui*s, de p à 8 Jours ençiron aprè» Vinjeciion préparatoire {Arch. internat, de physiologie, vol. 7, fasc.4, p. 601, 1909).

A partir de ce moment, Télat d'anaphylaxie se précise progressivement, c'est-à-dire que la réaction d'anaphylaxie, provoquée cbez les animaux préparés quand on injecte du sérum de cheval dans leurs veines, augmente d'intensité et se complète par Tadjonction à la chute de pi*ession de phénomènes complémentaires.

Expériences 52 à 56.

Des lapins ont reçu en injections sous-cutanécs 20 cenllmètres cubes de sérum de cheval, et Tessai d'anaphylaxie a été fait à Taide d'une injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum de cheval, pratiquée après 9, 12, 15, 19 et 23 jours.

^a bout de g jours ^ il se produit une chute de pression, sans modification respiratoire, sans expulsion de bols fécaux. La pression était de 100 millimètres de mercure; après 2 minutes, durant lesquelles elle conserve celte valeur, elle tombe progressivement pour se fixer à 70 millimètres, 8 minutes après Tinjection. La réaction est déjà plus forte après 9 jours qu'après 8 jours de préparation (sc reporter aux expériences cidessus — exp. 51 — où la pression n'avait commencé à fléchir qu'à la minute 3, ne s'était abaissée qu'à 85 millimètres, et avait repris sa valeur normale, ou à très peu près, à la minute 2U) .

Au bout de 1 2 jours, il se produit encore exclusivement une chute de pression; on ne note aucune accélération respiratoire, aucune expulsion de bols fécaux. La pression carotidienne était à 102 millimètres; après

1 minute 1/2, la pression commence à tomber, pour se fixer à 75 millimètres, 6 minutes après Tinjection; elle a encore cette valeur à la minute 20. Donc la réaction ne diffère pas essentiellement de celle qu'on a notée après^ jours, si ce n'est par la précocité un peu plus grande des accidents.

Au bout de i5 jours, la chute de pression est plus précoce et plus grande; une accélération respiratoire se manifeste, mais il n'y a pas expulsion de bols fécaux. La pression, avant Tinjection, était dé 140 miU limètres; environ 40 secondes après l'injection, elle tombe brusquement, et, 4 minutes après l'injection, elle est à 60 millimètres, valeur à laquelle elle se fixe. Avant l'injection, la respiration était au rythme de 50 par minute; au moment où la pression tombe, soit un peu moins d'une minute après l'injection, le rythme est à 170 par minute; il est à 130 à

2 minutes; il est à 80 à 3 minutes; puis il revient à 50.

Au bout de i g jours, la chute de pression a sensiblement les mêmes caractères que ceux que j'ai notés après 15 jours. Mais l'accélération respiratoire s'atBrme plus durable : la respiration était au rythme de 80 par minute avant l'injection; elle prend un rythme d'au moins 100 à partir de la minute 4 et jusqu'à la minute 16, avec un maximum de 140 à la minute 6. 11 y a eu expulsion d'assez nombreux bols fécaux.

Au bout de aS jours ^ la pression, qui avait, avant l'injection, une valeur de 102 millimètres, tombe rapidement, 1 minute après l'injeclion, pour se fixer à 40 millimètres à partir de la minute 3. La respiration était au rythme de 60 par minute avant l'injection ; déjà, 1 minute après

LA SEliO'ANAPHYLAXIE DU LAPlh 41

l'injection, elle est au rythme 80; elle a un rythme supérieur à 100 de la minute 2 à la minute 16, avec un maximum de 200 à la minute 6 et à la minute 10; elle ne reprend le rythme 60 que plus de 20 minutes après rinjection. Il y a eu expulsion de très nombreux bols fécaux

Chez ces 5 lapins, une injection de sérum, pratiquée sous la peau de la paroi abdominale à la dose de 5 centimètres cubes, le jour où fut effectué Tessai, n'a produit ni lésion, ni modification locale. Chez aucun de ces lapins, je n'ai noté de cachexie dans les semaines qui ont suivi Tessai.

De ces expériences, il résulte très nettement que la réaction anaphylactique ne se prodait pas (V emblée açec tous ses symptômes. C'est d'abord la chute de pression, qui représente le symptôme unique : chute de pression qui, d'abord faible et fugace, augmente ensuite d'importance et de durée, (Il faudrait y joindre sans doute la diminution de la coagulabilité du sang; mais son étude n a pas été faite avec le soin apporté à Tétude de la dépression).

Plus tard, Taccélération respiratoire et lapolypnée s'ajoutent au symptôme primitif de la chute de pression; plus tard encore,l'expulsion de matières fécales s'ajoute aux deux premiers symptômes de la réaction d'anaphylaxie.

Ainsi constitué, le tableau de la réaction anaphylactique n'est pas complet^* aucun des animaux dont je viens de rapporter, les essais n'a présenté de lésion locale; aucun n'a présenté de cachexie tardive. Or, les lésions locales et la cachexie sont des symptômes d'anaphylaxie manifestée chez les lapins qui ont reçu des injections répétées de sérum de cheval sous la peau. Vraisemblablement, ces symptômes ne se présentent pas quand l'animal n'a reçu qu'une injection préparatoire de sérum ; en. tous cas, je ne les ai jamais constatés nettement.

On peut traduire ces remarques de la façon suivante : la répétition des injections préparatoires renforce V anaphylaxie \ parmi les éléments symptomatiques de la réaction d'anaphylaxie, il en est qu'on observé déjà dans lanaphylaxie simple (produite par une seule injection) : ce sont la chute de pression^ l'accélération respiratoire, la diminution de la coagulabilité du sang, l'expulsion de bols fécaux; il en est d'autres qu'on n'observe que dans lanaphylaxie renforcée : ce sont les lésions locales et la cachexie.

42 DE L'ASAPHYLAXIE A VIMMUNIIÉ

— Dans toutes les expériences que j'ai analysées ci-dessus, fai injecté le sérum de cheval sous la peau pour engendrer Vétat d^anaphylaxie. On peut l'introduire aussi dans la cavité përitonéale, dans l'épaisseur des muscles, dans les veines : quel que soit, parmi ces modes d'introduction du sérum, celui qu'on adopte, on réalise Tanaphylaxie.

Dans mes premières expériences de séro-anaphylaxie, j'avais souvent pratiqué, ppur préparer les lapins, des injections intrapérit onëales de sérum de cheval. Après 4 ou 5 injections intrapéritonéales, j'avais pu provoquer les accidents cutanés par injection sous-cutanée de sérum, et les accidents généraux (y compris la mort rapide, ou, en cas de survie, la cachexie consécutive à l'injection) par injection intraveineuse. Je n'ai pas analysé les accidents à l'aide de la méthode graphique chez des animaux préparés par injections intra-péritonéales (l'instrumentation me manquait alors), mais les faits étaient si évidents qu'ils permettaient d'affirmer sans hésitation l'existence d'une anaphylaxie provoquée par injections intrapéritonéales de sérum.

J'ai étudié avec plus de précision V anaphylaxie engendrée par injections intraveineuses de sérum de cheval.

Expériences 57 à 58.

Deux lapias revoivent en injections intraveineuses 5 centimètres cubes de sérum de cheval les 22 et 30 décembre, G et 13 janvier.

Le 19 janvier, l'un des lapins reçoit en injection intraveineuse 5 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression artérielle était de 104 millimètres de mercure ; elle commence à baisser 30 secondes après la lin de de l'injection, tombant très brusquement à 60 millimètres, puis elle continue à baisser lentement, pour se fixer, 4 minutes après la (in de Tin* jeclion, à 44 millimètres. La respiration était au rythme de 45 avant l'injection; elle passe au rythme de 170 au moment de. la chute de pression, puis revient au rythme de 70 qu'elle conserve jusqu'à la fin de l'observation, soit 20 minutes après la fin de l'injection. Il y a eu émission de bols fécaux, mais en quantité modérée. Le lapin meurt quelques heures après l'injection.

Le 20. janvier, l'autre lapin reçoit en injection intraveineuse 5 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression artérielle était à 116 millimètres de mercure ; elle se maintient élevée 3 minutes après la fin de l'injection, puis s'abaisse progressivement pour se fixer à 45 millimètres 5 minutes après l'injection. La respiration était au rythme de 80 par minute au moment de l'injection, elle s'accélère, passant au rythme de 160 au nxoment de la chute de pression, rythme qu'elle conserve pendant 2 minutes environ, puis reprend le rythme de $0. Il y a eu émission. de matières fécales abondantes. Le lapin est hïort le leîidëiâaiii' mâttin. '' '*

lA SÉRO-ANAPIIYLAXIE DU LAPIN 43

La mort relalivemenl tardive que j'ai observée dans ces deux expériences ne se présente généralement pas : si le lapin anaphylactisé ne meurt jias dans les 5 premières minutes qui suivent l'injection mtraveineuse de sérum de cheval, il suivit. S'agil-il ici de faits spéciaux aux lapins préparés par injections intraveineuses de sérum, s'agit-il d'exceptions, je ne saurais le décider.

J'ai pratiqué à maintes reprises des injections intramiisciiiaï'res c/e serwm pour anaphylactiser des lapins : les résultats ont été identiques à ceux obtenus en injectant le sérum sous la peau.

J'ai introduit d' autre part du sérum de chèçal dans les Qoies dig'estiç>es,. dans Testomac, dans l'intestin grêle, dans le gros intestin, sans parvenir à créer Vétat d'anaphylaxie.

Expériences 59 à G4.

Le 22 janvier, deux lapins reçoivent en injection intrarectale, au moyen d'une sonde uréthrale humaine en gomme, poussée très loin 30 centimètres cubes de sérum de chevaL Ce même jour, deux autres lapins reçoivent dans l'estomac, au moyen dune sonde introduite par la voie oesophagienne 30 centimètres cubes de sérum, de cheval ; la même injection est renouvelée le 29 janvier. Le 29 janvier, deux lapins reçoivent dans la cavité de l'intestin grêle 20 centimètres Ciibesde sérum de cheval : à cet effet, j'ai pratiqué une petite ouverture de> la paroi abdominale; j'ai attiré au dehors une anse intestinale et, au moyen d'une line aiguille de seringue de Pravaz, piquée obliquement dans la paroi intestinale, j'ai fait pénétrer le sérum; la plaie abdominale a été ensuite obturée par quelques points de suture.

Le 16 et le 19 février, soit 26 et 29 jours après la préparation, les lapins qui avaient été soumis- à l'injection intrarectale n'ont présenté aucune réaction à la suite de l'injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum de cheval.

Le 22 et le 24 février, soit 25 et 27 jours après la préparation, les lapiijs qui avaient reçu le sérum dans la cavité de l'intestin grêle n'ont pas réagi à l'injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum.

Le 3 et le 4 mars, soit 40 et 41 jours après le début de la préparation, les lapins qui avaient reçu le sérum dans l'estomac n'ont présenté aucune manifestation d'anaphylaxie à la suite de Tinlroduction de 4 centimètres cubes de sérum de cheval dans la veine auriculaire [Arch. internat, de physiologie, vol. 7, fasc. 4, p. 503, 1909). . '

— J'ai provoqué Tanaphylaxie par injections préparatoires de sérum de cheval. Le sérum est un liquide complexe. Quelle ^st parmi ses constituants, la substance anaphylactisante?

Je me suis borné à rechercher si la substance anaphylactisanté est une substance protéique. A cet effet, j'ai débarrassé le sérura de ses protéines par le sulfate d'ammoniaque aJQUtê à saturation à froid, ou par le chlorure dé sodium ajouté.à satu^

44 DE VANAPHYLAXIE À L*IMMUSITÉ

ration à rébullition. Les liqueurs, séparées du précipité oa du coaguluoi par filtra tion sur papier, ne donnent pas les réactions colorés caractéristiques des substances protéiques. Injectées sous la peau du lapin, elles ne Tanaphylactisent pas visà-vis du sérum de cheval.

Expérience 65.

Un lapin a reçu en injection sous-catanée, le 6 janvier, 40 centimètres cubes du filtrat de sérum précipité à froid par le sulfate d'ammoniaque dissous à saturation, débarrassé par dialyse du sulfate d'ammoniaque.

Le 4 février, soit 29 jours après l'injection préparatoire, le lapin reçoit en injection intraveineuse 4 centimètres cubes de sérum de cheval. Il ne manifeste aucune réaction d'anaphylaxie; les courbes de pression et de respiration ne sont pas modifiées, si peu que ce soit, par Tinjection.

Expérience 66 .

Un lapin a reçu le 6 janvier, sous la peau de Tabdomen, 20 centimètres cubes de la liqueur obtenue par la coagulation du sérum à Tébullltion en présence de chlorure de sodium dissous à saturation, liqueur ne donnant pas la réaction du biuret. L'injection intraveineuse de 4 centimètres cubes de sérum faite le 15 février, soit 40 jours après l'injectiou préparatoire, ne détermine aucun accident anaphylactique.

D'autre part^ en dissolvant dans leau le précipité des protéines produit par saturation du sérum à Taide de sulfate d'ammoniaque, on obtient une liqueur qui, injectée sous la peau de lapins, les anaphylactise pour le sérum de cheval, ce qui confirme la conclusion précédente, à savoir que les substances anaphylactisantes du sérum de cheval sont les protéines qu'il contient.

Expérience 67.

Un lapin a reçu le 6 janvier, en injection sous-cutanée 10 centimètres cubes d'une solution des protéines du sérum (100 centimètres cubes de sérum de cheval ont été précipités par saturation de sulfate d'ammoniaque ; le précipité a été réuni sur un filtre, puis redissous dans 100 centimètres cubes d*eau salée à 1 p. 100). Le 9 février, soil .U jours plus tard, j'injecte dans la veine de l'*)reille de ce lapin 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression artérielle était égale avant l'injection à 108 millimètres de mercure ; 1 minute 1/2 après l'injec. tion, elle s'abaisse rapidement, pour se fixer à 48 millimètres, 4 minutes après Finjection. La respiration était au rythme de 64 par minute; au moment de la chute de pression, elle présente le rythme 160, qu'elle conserve pendant 2 minutes environ, puis un rythme moins rapide, pour reprendre le rythme 64, environ 10 minutes après l'injection. Il y a eu expulsion de nombreux bols fécaux .

Le précipité des protéines du sérum contient des albumines et des globulines, qu'on peut aisément séparer, et redissoudre

LA SÉRO'ANAPHYLAXIE DU LAPIN 45

dans Teau salée, de façon à pouvoir injecter une solution d'albumine ne contenant pas de globuline et une solution de globuline ne contenant pas d'albumine. Les deux solutions ont anaphyiactisc le lapin pour le sérum de cheval.

Expérience 68.

Le 6 janvier, j'ai injecté sous la peau de la paroi abdominale d'un lapin une solution des globulines du sérum de cheyal. Le i*' février, soit 25 jours plus tard, j'ai injecté dans les veines du lapin 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression tombe de 105 à 39 millimètres de naercure; la respiration, qui était au rythme de 80 par minute, s'accélère, et arrive an rythme de 240 qu'elle présente 4 à 5 minutes après la lin de l'injection. Il y a eu expulsion de quelques bols fécaux.

Expérience 69.

Le 6 janvier, j'ai injecté sous la peau de la paroi abdominale d'un lapin une solution des albumines du sérum de cheval. Le 17 février, soit 42 jours plus tard, j'ai injecté dans les veines du lapin 4 centimètres cubes de sérum de cheval.^ La pression tombe, passant de 90 à 78 millimètres de mercure; la respiration, qui était au rythme de 80 avant Tinjection, s'accélère au moment de la chute de pression, présente le rythme 200 à Ja minute 2, puis rapidement se ralentit, pour reprendre le rythme 80 environ 8 minutes après la lin de l'injection. Il n'y a pas eu expulsion de matières fécales.

La réaction anaphylactique n'est pas douteuse, mais elle est faible^ notablement plus faible que celle qui a été observée chez le lapin préparé par les globulines du sérum.

Expérience 70.

Pour renforcer l'action anaphylactisante des albumines du sérum de chevaly j'ai multiplié des injections préparatoires.

Un lapin a reçu en injections sous-cutanées abdominales 5 centimètres cubes de sérum de cheval, saturé de sulfate de magnésie et débarrassé par liltration du précipité des globulines. Les injections préparatoires, toutes semblables, ont été faites les 3, 9, 16, 23 et 30 novembre. Le 11 décembre, j'injecte dans la veine auriculaire 4 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression, avant l'injection, était de 112 millimètres de mercure; elle commence à baisser 1 minute après l'injeôtion, et, en 1 minute, elle tombe à 40 millimètres. La respiration était au rythme de 60 par minute ; au moment de la chute de pression, elle s'accélère, et, pendant 2 minutes, elle. est au rythme de 140 par minute; puis elle revient progressivement au rythme de 60, qu'elle présente 3 minutes après la fin de Tinjection. Il y a eu émission de très nombreux bols fécaux (Arch, internat, de physiologie, vol 7, fasc. 4, p. 505, 1919).

On peut ainsi conclure que la ou les substances anaphylac- Usantes du sérum de cheval suivent le sort des substances protéiques dans les opérations chimiques ayant pour objet de précipiter celles-ci, ou de les coaguler. Sans doute, cela ne prouve pas que nécessairement lal^bstance anaph3'lactisante soit une protéine, car elle pourrait tout simplement être entraînée.

4^ DE VANAPHYLAXΠA LIMMUNITE

fixée par les protéines, sans être identique aux protéines. Mais on peut dire, tout au moins provisoirement, que les choses se passent comme si la ou les substances anaphylac lisantes étaient les protéines mêmes du sérum, et tout aussi bien les albumines que les globulines. Nous verrons ci-dessous comment on peut préciser cette notion fondamentale.

— En général, les injections destinées à manifester Tétat d'anaphylaxie étaient pratiquées dans les veines, aQn de pouvoir obtenir des résultats plus comparables que ceux qu'on eut pu obtenir par toute autre injection, puisque, dans le cas des injections sous-cutanées, intrapéritonéaies, etc., il eut été nécessaire de tenir compte des différences de vitesse d'absorption du sérum injecté. Mais on peut démontrer que la çoie intraf^eineuse n'est pas la çoie nécessaire d introduction pour obtenir une réaction d'anaphylaxie.

Voici des expériences.

Expériences 71 à 74.

Quatre lapins, A, B, C, D ont reçu 7 injections sous-cutanées de sérum de cheval les 20 et 27 mars, 3, 10, 17, 24 avril et 1" mai. Ils présentent à cette dernière date des accidents cutanés très graves, gangrène et dégénérescence caséeuse.

Le 7 mai, je pratique sur le lapin A une injection intraveineuse de sérum de cheval; mais, afin de pouvoir comparer autant que possible les effets de cette injection avec les effets d'injections pratiquées en des régions où l'absorption demande un certain temps, je n'injecte qu'une petite quantité de sérum, et je l'injecte très lentement, à savoir 1/3 de centimètre cube en 4 minutes. Déjà, 2 minutes après le début de Tinjection, la pression fféchit très légèrement; la baisse s'accentue à partir de la fin de la 3* minute après le début de l'injection, et continue à se produire encore 1 minute après la fin de Finjection. De lOD millimètres, la pression artérielle est ainsi tombée à 58 millimètres. La respiration qui élait au rythme de 55 par minute avant l'injection, s'accélère 1 minute après la fin de l'injection, passe par un maximum de 140, environ 3 minutes après la fin de l'injection, et revient au rythme primitif 10 minutes après la fin de l'injection. Il y a eu émission de très nombreux bols fécaux.

. Le 30 mai, le lapin B reçoit en injection intrapéritonéale 20 centim êtres cubes de sérum de cheval. La pression était de 98 millimètres de mercure; elle se maintient très sensiblement à cette valeur pendant les 3 minutes qui suivent l'injection, puis s'abaisse à 42 millimètres. La respiration était, avant l'injection, au rythme rapide de 90 par minute ; elle s'accélère déjà 2 minutes après l'injection, passe par un maximum de 300 environ à la minute 3, puis décroit^progressivement pour revenir au rythme 100, environ 15 minutes après l'injection. Je n'ai pas remarqué que des bols fécaux aient été expulsés en quantité exagérée.

LA SÉRO'ANAPHYLAXIE DU LAPIN 47

Le 4 juin, le lapin G reçoit sous la peau du flanc 20 centimètres cubes de sérum de cheval. La pression était de 102 millimètres avant l'injection ; elle semble commencer à baisser 1 minute 1/2 après Tinjeclion, mais si peu qu'on a peiné à distinguer un fléchissement de la courbe; la pression est à 91 millimètres à la minute 5; elle est à 93 millimètres à la minute 10 et à 77 millimètres à la minute 15. La respiration était au rythme de 90 par minute avant l'injection; elle était au même rythme à la minute 5; à la minute 10, elle était à 80 par minute; à 12 minutes, elle devient brusquement polypnéique au rythme de 200; à 14 minutes, elle est au rythme de 240, Je n'ai pas noté d'exagération de l'expulsion des bols fécaux. Il y a donc ici une réaction anaphylactique indiscutable, mais tardive.

Par contre, le lapin D, auquel j'injecte dans l'intestin du sérum de cheval le 14 mai, ne présente aucun phénomène anormal. Il avait été fixé sur l'appareil contentif; la paroi abdominale avait été incisée sur 2 à 3 centimètres de longueur, et 20 centimètres cubes de sérum de cheval avaient été introduits dans une anse d'intestin grêle, au moyen d'une très fine aiguille de seringue de Pravaz, piquée obliquement dans la paroi intestinale. Durant les 30 minutes d'observation, il n'y eut aucune modification de la pression artérielle et de la respiration.

On peut donc engendrer la crise d/ anaphylaxie soit par injection intraçeineuse, soit par injection intrapéritonéale , soit par injection sous-cutanée de sérum de cheçal, mais non pas par introduction du sérum dans V intestin grêle.

Toutefois la réaction est beaucoup moins intense et beaucoup moins brusque, dans les cas où Tinjection est faite dans le péritoine ou sous la peau, que dans les cas où elle est faite dans les veines. L'injection intraveineuse est donc Tinjection de choix dans l'étude de séro-anaphylaxie du lapin [Arch. internat, de physiologie, vol. 7, fasc. 4, p. 509, 1909).

— J'ai cherché à déterminer ci-dessus les substances anaphylactisantes du sérum de cheval, et j'ai conclu de l'étude dont j'ai présenté le résumé, que les choses se passent comme si ces substances anaphylactisantes étaient les protéines du sérum . On peut également rechercher quelles sont les substances toxiques du sérum injecté aux lapins anaphylactisés .

Tout d'abord on constate que la toxicité du sérum de cheçal pour les lapins anaphylactisés est détruite à la température de 85^, alors même que des dispositions ont été prises pour empêcher la coagulation du sérum (on sait que le sérum sanguin, additionné de 3 volumes d'eau distillée, peut être chauffé même à 100** sans coaguler.)

48 DE VÀNAPHYLAXIE A L'IMMUNITÉ

Expérience 75.

Un lapin a été anapbylactisé. par 4 injections sous-cutanées de sérum de cheval à la dose de 5 centimètres cubes par injection, pratiquées les 22 et 30 décembre, 6 et 13 janyier. Le 20 janvier, il reçoit dans la veine de Foreille 10 centimètres cubes d'un mélange formé de 1 partie de sérum et de 3 parties d'eau distillée, mélange chauffé 20 minutes à 80^ au bain-marie. Environ 40 secondes après la iln de l'injection, la pression tombe de 112 à 36 millimètres de mercure. La respiration présente, à peu près en même temps, le rythme polypnéique : elle passe de 70 à 220 par minute et conserve ce rythme sans diminution importante pendant les 20 minutes d'observation.

Expériences 76 à 79.

Quatre lapins, préparés comme le précédent et aux mêmes dates, reçoivent dans les veines, entre le 21 et le 28 janvier, 10 centimètres cubes de sérumdilué au quart par addition de 3 volumes d'eau distillée, le mélange étant chfluffé à So", ou à 90<>, ou à 95^', ou à 100*.

Dans aucun cas il ne s'est produit aucune modification circulatoire ou respiratoire.

Les substances toxiques du sérum sont donc détruites entre 80° et 83°. Gela ne démontre pas assurément que ces substances toxiques sont les protéines du sérum, mais cela rend au moins possible que les substances toxiques soient précisément ces protéines, car on sait que la chaleur modifie profondément les protéines du sérum, et c'est vers cette température de 85° qu'est achevée ordinairement leur coagulation dans le sérum non dilué.

D'autre part, en isolant du sérum sanguin par les procédés classiques soit les albumines, soit les globuUnes, qu'il contient, en dissolvant ces protéines dans Teau salée à 1 p. 400 et en les injectant dans les veines de lapins séro-anaphylactisés, on •engendre des accidents.

Expérience 80.

Un lapin anaphylactisé par 6 injections de 5 centimètres cubes de sérum de cheval, faites sous la peau de la paroi abdominale les 28 et 30 décembre, 6, 13, 20 et 27 janvier, reçoit en injection intraveineuse le 4 février 10 Centimètres cubes d'une solution de globulines de sérum.

La pression était égale à 104 millimètres de mercure avant Tinjection ; elle se maintient à ce niveau 3 minutes, puis s'abaisse régulièrement, pour se lixer, après 1 minute 1/2 de chute, à 44 millimètres. La respiration a passé du rythme de 50 qu'elle avait avant Tinjection au rythme 160, qu elle conserve à peu près pendant les 20 minutes d'observation. De nombreux bols fécaux sont expulses.

Expérience 81.

Un lapin a été anaphylactisé par 6 injections de 5 centimètres cubes de sérum de cheval, pratiquées sous la peau les 6, 13, 20, 27 janvier, 3 et

LA SÉRO-ANAPHYLAXIE DU LAPIN 49

10 février. Je lui injecte dans la veine de l'oreille 10 centimètres cubes d'une solution d'albumiâes du sérum.

Il se produit une chute de pression (de 102 millimètre, elle tombe à 68 millimètres) et de la polypnée (rythme 180 par minute) ; des bols fécaux sont expulsés en surabondance. »

Les choses se passent donc comme si les substances toxiques du sérum étaient ses protéines, les albumines comme les globu- Unes.

Les résultats ci-dessus notés ne permettent d'ailleurs pas d'affirmer que les protéines du sérum sont réellement les substances toxiques, car celles-ci pourraient simplement avoir été fixées et entraînées parles substances protéiques précipitées, et détruites, en même temps que ces substances protéiques sont coagulées (Arch, internat, de physiologie, vol. 7, fasc. 4, p. 511, 1909). Nous verrons ultérieurement comment on peut préciser la solution du problème.

— En passant en revue (p. 14) les faits essentiels de Tanaphylaxie du chien pour les congestines, j'ai noté l'existence d'une anaphylaxie passive, engendrée par injection dans l'organisme d'un animal neuf de sérum d'un animal anapliylactisé . Y a-t-il une anaphylaxie passive du lapin pour le sérum de cheval?

J'examinerai ci-dessous cette question de l'anaphylaxie passive du lapin (chapitre 12). Je me bornerai à dire pour le moment, sans le démontrer présentement, qu'il est possible de provoquer, dans des circonstances déterminées, une très légère 5 éro-anaphylaxie passive du lapin.

La séro-anaphylaxie du lapin est un état stable. Cette proposition doit être nettement établie, car, d'après les recherches des auteurs qui ont expérimenté sur le cobaye, la séro-anaphylaxie de cet animal est, au contraire, un état instable, au moins •en apparence et qu'on peut supprimer, ou plus exactement masquer par plusieurs procédés.

Exposons d'abord, le plus brièvement possible les faits essentiels relalifs à la séro-anaphylaxie du cobaye.

Lorsqu'on Injecte du sérum de cheval sous la peau, dans le péritoine ou sous la durC'-iïière crânienne, chez le cobaye, on ne produit pas d'ac-

Arthus. — Anaphylaxie. 4

50 DE VANAPHYLAXIE A VIMMUNITÉ

cidents (5 centimètres cubes de sérum de cheval sous la peau ou dans le péritoine; i/^ decenlimètre cube bous la dure-mère crânienne). Si, aa contraire, Tinjection du sérum de cheval est faite, à la même dose de 5 centimètres cubes, sous la peau, ou dans le péritoine de cobayes qui ont reçu une injection préalable (au moins 10 à 12 jours auparavant) de 5 centimètres cubes de sérum de cheval sous la peau ou dans le péritoine, la seconde injection produit des. accidents : presque aussitôt après rinjectioo, Fanimal présente des signes d'inquiétude et de souFfrance;la respiration est accélérée tout d'abord, puis dyspnéique : le cœur faiblit, etc., et 1/2 heure à 1 heure après l'injection, 25 p. 100 des animaux sont morts ; les autres se rétablissent peu à peu. Si Tinjection seconde est pratiquée sous la dure-mère, à la dose de 1 i centimètre cube ou même à une dose moindre, on voit, après 1 à 2 minutes, l'animal présenter les mêmes accidents qu'il eut présentés si on avait injecté 5 centimètres cubes de sérum de cheval dans le péritoine : la mort est ici. la règle, et très rares sont les cobayes qui survivent (nous venons de noter qu*à la suite des injections secondes pratiquées sous la peauoo dans le péritoine, la mort ne se produit, aux doses indiquées, que dans 25 p. 100 des cas).

Quand j'aurai ajouté que l'état de séro-anaphylaxle du cobaye peut être engendré par des doses extrêmement petites de sérum de cheval (et jusqu'à 0,000001 de centimètre cube), que la voie d'injection préparatoire (sous-cutanée, intraveineuse, intrapéritonéale, intramusculaire ou sousdure-mèrienhe) est indifférente ; que la période d'incubation est d'an moins 10 jours; que pour provoquer la crise d'anaphylaxie, il est avantageux d'injecter 5 centimètres cubes de sérum de cheval dans le péritoine ou sous la peau, ou 1/4 de centimètre cube sous la dure-mère; et que l'état d'anophylaxie peut persister au moins pendant 2 ans chez les cobayes préparés, j'aurai noté tous les faits utiles à connaître pour l'étude que je poursuis.

Mais Vétai d'anaphylaxie du cobaye n'est pas immuable,

Otto (Miinchn. med. Woch. 54 p. 1665, 1907) constate que les cobayes qui ont survécu à la seconde injection présentent un état d'insensibilité à l'action du sérum de cheval durant plus ou moins longtemps, selon la dose de sérum injectée.

Gay et Southardt (J.of med. Res. 18, p. 407, 1908) vérifient cette observation ; ils reconnaissent du reste que cet état d'insensibilité n'est pas permanent et que les animaux insensibilisés recouvrent peu à peu leur sensibilité spéciale pour la reperdre dans les mêmes conditions que la première fois.

Lewis (J. of exp. Med. 10, p. 1 et 608, 1908) obtient l'état d'insensibilité sans avoir provoqué de crise d'anaphylaxie; à cet effet, il injecte très lentement (24 heures, par exemple) quelques centimètres cubes de sérum de cheval sou3 Id peau de cobayes préparés.

Besredka (Bull, de Hnst. Pasteur 6 no- 19, 20 et 21, 1908) a fait une étude fort minutieuse de cette insensibilité du cobaye, de cette anti-anaphylaxie, comme il a coutume de l'appeler. Il vérifie les faits déjà con nus, et en fait connaître de nouveaux ; en particulier, il montre que l'injection de sérum de cheval, pratiquée dans le péritoine ou sous la peau, de cobayes, qui ont reçu l'injection de sérum de cheval préparante, moins de 10 jours auparavant (la seconde injection étant ainsi pratiquée pendant la période d'incubation) immunise ces cobayes contre une injection de sérum de c^ieval, faite après le 10* jour, sans qu'aucune crise d'anaphylaxie ait jamais éclaté.

LA SÉRO'ANAPHYLAXIE DU LAPIN 51

Besredka s*est surtout efforcé de supprimer l'action toxique du sérum de cheval pour les animaux préparés, et il a eu recours à deux méthodes principales : tantôt il agit sur le sérum, tantôt il agit sur l'animal. Il a reconnu, d'une part, que le sérum de cheval dilué par l'addition de 3 volumes d'eau distillée et chauffé à une température comprise entre 76o et 100» devient de moins en moins toxique en injection intrapéritonéale ou sous-dure-mèrienne pour le cobaye anaphy pactisé, que la température à laquelle il a été chauffé était plus élevée, et fait apparaître chez lui, après 4 à 6 jours, une insensibilité au moins partielle, d'autant plus nette qu'il a été moins fortement chauffé. Il a reconnu, d'autre part, que le cobaye anaphylactisé par le sérum de cheval étant anesthésié par. l'éther, ne réagit pas à l'injection sous-dure-mèrienne de sérum de cheval, pratiquée à une date et dans des conditions où elle déterminerait sûrement la mort de cobayes anaphylactisés non anesthésiés; et que, après son réveil, le cobaye ainsi traité est en état d'anti-anaphylaxie, c'est-à-dire subit, sans présenter d'accidents, une injection sous-duremèrienne de sérum de cheval.

J'ajouterai que cette anti-anaphylaxle du cobaye ne saurait être considérée comme équivalente à Vétat normal. En effet, l'anti-anaphylaxie disparaît après un certain temps, laissant réapparaître l'anaphylaxie . En effet encore, le sang défibriné ou le sérum sanguin des cobayes en état d'anti-anaphylaxie injecté à des cobayes neufs, les rend, après 24 heures, sensibles à l'action toxique du sérum de cheval, c'est-à-dire les anaphylactisé, ce que ne fait pas le sang défibriné ou le sérum sanguin de cobayes neufs. Il s'agit donc^ dans Vantl-anaphyloMle^ d'une anaphyiax te masquée, mais non dune anaphylaxie supprimée : en réalité, on peut parler d'une instabilité apparente de V anaphylaxie, beaucoup plus que d'une instabilité réelle de l'anaphylaxie du cobaye.

En est-il de même chez le lapin? L'anaphylaxie sérique du lapin est-elle un état instable (en apparence tout au moins) ?

— A. La plupart de mes expériences de séro-anaphylaxie ont été faites sur des lapins préparés par plusieurs injections (en général de 5 à 8) de sérum de cheval, faites à 5, 6 ou 7 jours d'intervalle, et à la dose de o centimètres cubes par injection ; le plus souvent, ces injections préparatoires ont été . faites sous la peau, mais parfois aussi dans le§( muscles, dans le péritoine ou dans les veines.

Si les choses s'étaient passées chez le lapin, comme chez le cobaye, la seconde injection eut dû créer Tanti-anaphylaxie et masquer la réaction anaphylactique que Ton aurait cherché à obtenir en injectant du sérum de cheval dans les veines. Or, je n'ai jamais constaté dans les très nombreuses expériences, (plusieurs centaines) que j'ai faites, aucune suppression ou atténuation de l'anaphylaxie, au moins dans les conditions où j'ai opéré, c'est-à-dire chez des animaux ayant reçu jusqu'à 8 et

58 DE LASAPHYLAXIE A L'IMMUNIIE

exceptionnellement 10 injections préparatoires, faites à 7 jours d* intervalle.

« Une seale injection sous-cutanée de sérum de cheval, écrivais-jc (Arch. Internat, de Physiologie, vol. 7, fasc. 4, p. 499, 1909) suffit à engendrer Tanaphylaxie. Toutefois, il faut remarquer que cette anaphylaxie n*est jamais aussi intense que celle qu*on obtient pendant le même temps en fractionnant les doses de sérum et -en répétant les injections. Si on injecte une seule fois 40 centimètres cubes de sérum sous la peau, on obtient les effets généraux anaphylactiques, baisse de pression, accélération respiratoire^ expulsion de matières fécales, mais on n obtient rien autre, même après 36 jours, même après 48 jours. Si on injecte tous les 6 jours 5 centimètres cubes de sérum de cheval, on note, après 8 injections (40 centimètres cubes de sérum au total), ou même après 6 injections (30 centimètres cubes de sérum au total), soit après 48 jours, soit après 36 jours, tous les accidents anaphylactiques, y compris les accidents locaux graves, l'anémie et la cachexie. »

Et c'est tout différent de Tauti-aDaphylaxie .

— B. En second lieu, j'ai constaté qu'on ne produit pas Fantianaphylaxie chez les lapins anaphylactisés par une ou par plusieurs injections préparatoires de sérum de cheval, quand on injecte dans leurs veines, i ou 2 semaines avant Tessai; du sérum de cheval dilué au quart et chauffé à une température élevée : Tétat anaphylactique est conservé avec sa gravité normale. (Exp. 82 à 86.)

— C. En troisième lieu, j'ai constaté, chez les lapins séroauaphylactisés par une ou par plusieurs injections de sérum de cheval, la conservation de l'état d'anaphylaxie, manifestable par les modifications de pression artérielle et de rythme respiratoire, pendant Tauesthésie et après Tanesthésie, que celle-ci soit réalisée par Téther ou par tout autre agent (chloroforme, chloral par exemple). (Exp. 87 à 91).

Le lapin se comporte donc tout autrement que le cobaye.

Donc, au point de vue de Tanti-anaphylaxie, le lapin diffère profondément du cobaye : chez ce dernier, on réalise Tanti-anaphylaxie par divers moyens. simples et avec la plus grande

LA SÉRO'ANAPHYLAXIE DU LAPIN

facilité; chez le lapin, on ne la réalise pas, au moins dans les mêmes conditions; etje fais cette remarque parce que j'exposerai ci-dessons des faits dans lesquels la réaction anaphylactique du lapin est atténuée, sinon supprimée, par Tinstallation d'un état d'immunité.

Expériences 82 à 86. (Voir § B, p. 52.)

Le tableau suivant contient les résultats expérimentaux essentiels :

LAPINS

lOOo

Pr.

NOMBRE d'injections PRÉPARATOIRES

durée de la preparation (en jours)