EXPERIENCES PERSONNELLES
Première série d’expériences
Notre première série d’expériences a porté sur le streptocoque gourmeux; nous avons utilisé un sérum antigourmeux d’origine connue; ce sérum est préparé par le Laboratoire Militaire de Recherches selon la technique suivante: séries d’injections intraveineuses quotidiennes à des doses croissantes de streptocoque gourmeux alcool-éther; puis association d'injections intraveineuses d’émulsion de cultures de streptocoques sur gélose (d’abord tuées par la chaleur, puis vivantes). Nous avons titré pour chacune de nos expériences la richesse de ce sérum en anticorps (sensibilisatrices); ce sérum a été additionné à du bouillon Martin dans la proportion d’un tiers. Nous avons ensemencé sur ce milieu diverses souches de streptocoques gourmeux ayant servi à préparer ce sérum antigourmeux. Après 24 heures d’étuve. les cultures ainsi obtenues sont réensemencées sur gé- Jose en boîtes de Perri (dans des proportions convenables). Les colonies sur boîtes de PErRI sont dénombrées après 24 et 48 heures d’étuve.
Les mêmes expériences ont été répétées avec des cultures de streptocoques gourmeux sur bouillon MarTin additionné de sérum normal de cheval, et avec des souches n’ayant pas servi à préparer le séruin antigourmeux.
Notre but était double:
1° Rechercher s’il y avait spécificité dans la production plus considérable des germes.
Ps dires
2° Rechercher s’il y avait une relation entre la richesse du sérum en anticorps et le nombre des colonies en boîtes de Perri. Nous avons titré le taux des sensibilisatrices du sérum antigourmeux en utilisant la méthode de fixation du complément. La technique suivie a été celle de BESREDKA en suivant les données préconisées par À. UrBai.
Nous rappellerons brièvement le principe de la réaclion de BorDET-GENGOU.
Si au mélange de l’antigène et d’une sensibilisatrice, on ajoute du sérum frais normal contenant par conséquent de l’alexine, ou complément, ce complément se fixe sur l’antigène grâce à la sensibilisatrice et à la condition que celle-ci soit spécifique pour l’antigène considéré; il disparaît donc du milieu. C’est la fixation du complément. Mais pour savoir si le complément est réellement fixé, une autre opération est nécessaire. Elle consiste à ajouter au mélange précédent une émulsion de globules rouges de mouton, par exemple, additionnée de sérum d’un animal préparé par des injections de globules rouges de mouton, sérum dit hémolytique, qui a été au préalable chauffé à 56°, de manière à détruire le complément; par suite le sérum hémolytique ne contient plus que la sensibilisatrice. En supposant que le complément apporté par le sérum frais ait bien été fixé au moment du premier mélange, ce complément n’est plus maintepant libre pour utiliser la sensibilisatrice antimouton, pour se fixer, grâce à cette dernière, sur les globules rouges de mouton, et les dissoudre; l’hémolyse ne se produit pas. La réaction dans ce cas est dite positive et démontre la présence de la sensibilisatrice dans le premier mélange. Telle est la déviation du complément qui permet de savoir, un antigène étant donné, si le sérum examiné renferme bien la sensibilisatrice correspondante, et, une sensibilisatrice spécifique étant donnée, si l’antigène correspondant existe.
Reprenons le principe plus en détail; réalisons séparément les deux mélanges suivants:
Mélange A: Hématies de mouton débarrassés de
leur sérum. Sérum de lapin antimouton chauffé à 56°.
Mélange B: Emulsion de bacilles typhiques, — sérum antityphique chauffé à 56°, — sérum frais de cobaye.
Puis mélangeons À et B. L’hémolyse ne se produit pas. Réalisons la même expérience avec deux mélanges À et B’, B’ différant de B par la substitution de sérum anticholérique au sérum antityphique. On observe alors l’hémolyse.
L'interprétation des faits est la suivante:
1° Dans le mélange À (qui constitue ce que l’on appelle un « système hémolytique »), les hématies ont fixé l’anticorps hémolytique; il suffira donc d’un apport d’alexine pour déclancher l’hémolyse.
2° Dans le mélange B coexistent: l’antigène typhique, — la sensibilisatrice antityphique, — l’alexine; l’anticorps est fixé électivement sur l’antigène, lequel est par suite « sensibilisé »; l’alexine est alors en condition d'agir: elle se fixe à son tour sur le complexe antigène-anticorps et, pour des propriétés convenables des éléments entrant dans le mélange, on conçoit qu'après un certain temps de contact, il ne reste plus d’alexine disponible.
3° Par suite, dans le mélange À + B, l’hémolvse ne devra pas se manifester, puisque l’alexine du mélange est immobilisée, « déviée », donc incapable d'agir.
4° Dans le mélange B’, la sensibilisatrice anticholérique ne se fixant pas, en raison de sa spécificité, sur l’antigène typhique, l’alexine reste inemployée, et par suite, disponible.
5° On devra par conséquent observer l’hémolyse dans le mélange À + B.
Technique de la réaction par le procédé de Besredka