PREMIER TEMPS: PRÉPARATION DES MÉLANGES B

Préparation des tubes de contrôle sérum, antigène et alexine.

Le tableau ci-dessous (tableau I) rend compte des opérations. à effectuer lors de ce premier temps. Les tubes 1 à 6 constituent üne série de mélanges B ne différant entre eux que par la dose d’alexine.

DEUXIÈME TEMPS: TITRAGE DU SÉRUM HÉMOLYTIQUE ET PRÉPARATION DU SYSTÈME HÉMOLYTIQUE

a) Titrage du sérum hémolytique.

On sensibilise d’abord une quantité fixe d’hématies (10 cc. de l’émulsion diluée à 1 p. 20) par des quantités variables de sérum hémolytique (0 cc. 10; 0 cc. 15; 0 cc. 20); la sensibilisation est obtenue par un contact de 10 à 20 minutes à la température du laboratoire; on verse ensuite 1 cc. de chaque mélange (voir tableau IT, tubes [1], [IT], [III]) dans chacun des deux petits tubes correspondants (même tableau) qui contiennent de l’alexine. Il est bon d’ajouter de l’antigène car il a parfois le pouvoir de fixer directement l’alexine.

On porte alors les six petits tubes à l’étuve à 37° pendant une demi-heure. Supposons que l’hémolyse soit incomplète ou nulle dans les tubes 1” et 1””, totale dans les autres: on en concluera que 0 cc. 15 est la dose minima de sérum hémolytique assurant la sensibilisation des globules. Si l’hémolyse n'est complète qu’à partir du tube 2”, on prendra 0 cc. 20 comme dose minima de sérum hémolytique.

b) Préparation du système hémolytique.

On prépare, en quantité suffisante, les globules sensibilisés nécessaires aux réactions, sachant qu'il en faudra 1 cc. pour chacun des tubes du premier tableau.

TROISIÈME TEMPS: RÉACTION PROPREMENT DITE ET RÉACTIONS DE CONTRÔLE Chacun des tubes préparés au premier temps reçoit

alors 1 cc. du système hémolytique; on les remet ensuite à l’étuve à 37° pour une demi-heure.

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