DOSAGE DE LA CRÉATINIKE

A. Principe. — La créatinine donne, comme on le sait, avec le chlorure de zinc, une combinaison de chlorure de zinc et de créatinine (C*H'Az*0*, ZnCl), assez soluble dans l'eau bouillante, trèsdifficilement soluble dans l'esprit de vin froid et concentré, et qui,

d'après mes propres expériences, convient parfaitement pour déterminer par les pesées cet élément extrêmement important del urine ; 100 parties de chlorure de zinc et de créatinine représentent 62,44 parties de créatinine.

1 partie de chlorure de zinc et de créatinine exige pour se dissoudre 921 7 parties d'alcool à 98 p. 100, et 5743 parties du même liquide à 87 p. 100.

B. Préparation de la solution de chlorure de zinc, — On dissout dans de Tacide chlorhydrique pur de Toxyde de zinc chimiquement pur ou du carbonate de zinc et Ton évapore la solution au bain-marie à consistance de sirop très-épais, jusqu'à ce que tout Tacide libre soit expulsé. On dissout le résidu refroidi dans de Tesprit de vin assez concentré et Ton étend lu dissolution de manière à ce qu'elle ait un poids spécifique de 1,20.

C. Application.— On mélange avec un laitde chaux, jusqu'à réaction alcaline, 200 ou 300 c. c. de l'urine émise en vingt-quatre heures, mêlée et mesurée avec soin, puis on ajoute une solution étendue de chlorure de calcium tant qu'il se forme un précipité. Au bout d'une ou deux heures on filtre, puis, au bain-marie, on évapore aussi rapidement que possible à sirop très-épais le liquide filtré et l'eau de lavage, et Ton mélange le résidu, encore chaud, avec 40 ou 50 c. c. d'esprit de vin à 95 p. 100. On introduit la masse bien mélangée dans un petit gobelet de verre ; on lave la capsule avec un peu d'esprit de vin, et l'on abandonne à la cave pendant six ou huit heures, afin que tout ce qui est susceptible de se précipiter puisse se déposer complètement. Ensuite on filtre le liquide sur un filtre aussi petit que possible ; on porte ensuite le précipité sur le filtre et on le lave ; lorsque le liquide s'est complètement écoulé, on lave avec un peu d'esprit de vin. Si tout le liquide filtré occupe un volume beaucoup au-dessus de 60 c. c, on le laisse se réduire sur une plaque de fer chaude à 50 ou 60 c. c. Après refroidissement complet, on ajoute 1/2 c. c. de la solution alcoolique de chlorure de zinc ; on agite fortement pendant longtemps, ce qui favorise beaucoup la séparation, et, après avoir recouvert le vase avec une plaque de verre, on l'abandonne pendant deux ou trois jours à la cave. Au bout de ce temps, on porte la cristallisation sur un filtre desséché et pesé entre deux verres de montre (fig. 29), et pour la faire tomber sur le filtre, on se sert toujours du liquide filtré obtenu en premier lieu. Lorsque tout le chlorure

de zinc et de crcatinine a été rassemblé sur le filtre et que Tcaumère s'est écoulée complètement, on lave avec un peu d'esprit de vin, jusqu'à ce que celui-ci s'écoule incolore et ne réagisse plus sur le chlore. — Le lavage doit être bien fait, mais il ne faut pas le prolonger inutilement. — On dessèche à lOO** le filtre contenant le chlorure de zinc et de créatinine, et on le pèse entre les deux verres démontre. 100 parties de ce précipité représentent 62,44 de créatinine. — Le chlorure de zinc et de créatinine ainsi obtenu se présente sous forme d'une poudre faiblement colorée en jaunâtre, et qui, ainsi que le montre le microscope, consiste en globules jaunâtres transparents, à contours bien limités et de différentes grosseurs. — D'après mes déterminations, ce produit contient environ 94 p. 100 de chlorure de zinc et de créatinine pur; seulement comme, à cause de la solubilité de ce corps, la précipitation n'est jamais absolument complète, on peut sans crainte le considérer comme pur, et compter, pour 100 parties de ce corps, 62,44 parties de créatinine ; alors les deux erreurs se compensent suffisamment. Mais l'extrait alcoolique du résidu de l'urine doit, comme il a été dit, être toujours abandonné pendant plusieurs heures, avant de procéder à la filtration et à la précipitation de la créatinine, afin que tout ce qui est susceptible de se précipiter, notamment le sel marin, ait eu le temps de se réparer ; si, effectivement, on ne procède pas ainsi, il arrive fréquemment que des cubes de sel marin se trouvent mélangés avec le chlorure de zinc et de créatinine, et rendent la détermination tout à fait fausse. C'est pourquoi je conseille de soumettre à l'examen microscopique le chlorure de zinc et de créatinine pesé, puis humecté avec de l'alcool absolu ; il devra se présenter avec les formes décrites § 3, C, 1 , et être absolument exempt de cubes de sel marin.

La méthode donne des résultats satisfaisants. Avec de la créatinine pure, on a trouvé 99 et 99,2 p. 100 au lieu de 100. (Doctlments anabjîiques.)

§71. DOSAGE DE L'ALBDMIiNE.

A. Par la méthode des pesées,

1. La détermination quantitative de l'albumine repose, Cotniiit

sa recherche qualitative, sur la coagulation qu'elle subit par l'action de la chaleur, et il faut, pour que cette coagulation soit complète, l'observation la plus stricte des précautions déjà indiquées §21.

Dans un gobelet de verre, on introduit avec une pipette, suivant que la richesse de l'urine en albumine est plus ou moins grande, 20, 50 ou 100 c. c. du liquide préalablement filtré, de telle sorte qu'on n'a pas affaire à plus de 0^\2 ou O^^^o d'albumine coagulée, ce qui facilite extrêmement l'opération du dosage. Avec des urines concentrées, il est en outre très-convenable d'étendre avant la coagulation les centimètres cubes mesurés. Si l'on n'a mesuré que 20 c. c. d'une urine fortement albumineuse, on les étend avec 80 c. c. d'eau ; si l'on a pris 50 c. c» d'urine, on ajoute 50 c. c. d'eau, etc. Si, au contraire, la quantité d'albumine est si petite que 100 c. c. d'urine n'en renferment pas plus de 0^',2 à 0**^.3, il est inutile d'étendre le liquide. On chauffe ensuite le gobelet de verre au bain-marie pendant une demi-heure ; s'il n'y a pas une quantité suffisante d'acide libre, si la coagulation n'a pas lieu en gros flocons et si le liquide qui surnage ne s'éclaircit pas complètement, on y projette, au moyen d'une baguette de verre plongée dans Facide acétique, une ou deux gouttes de cet acide et l'on continue de chauffer, ce qui ne tarde pas à produire de gros flocons d'albumine et la clarification du liquide. — Comme on le sait, il faut éviter tout excès d'acide acétique, parce que, si Ton a ajouté trop d'acide, une partie de l'albumine s'y redissout et la détermination est entachée d'erreur. Mais, d'un autre côté, l'urine ne doit, en aucune circonstance, avoir une réaction acide, parce que, dans une urine de ce genre, il se forme toujours un albuminate alcalin soluble, qui ne se coagule pas du tout par Tébullition.

On peut encore mélanger l'urine avec de l'acide acétique avant de la chauffer, mais alors il faut prendre encore plus de précautions, parce que, si l'on a ajouté trop d'acide, il ne se forme plus de coagulum par l'ébuUition. Si l'urine est acide, l'addition de Tacide acétique n'est pas précisément nécessaire, mais, dans tous les cas, la coagulation complète et en gros flocons est beaucoup favorisée par cet acide.

Lorsque, en tenant compte des précautions indiquées, on a

opéré la coagulation d'une manière complète et en flocons épais, et lorsque le liquide surnageant s*est bien éclairci, on procède à la filtra tion.

Sur un filtre à plis, desséché, pesé, puis humecté avec de Teau, ou verse d'abord le liquide qui surnage le coagulum; si la quantité d'albumine n'est pas trop grande, si Turine est suffisamment étendue et si la coagulation est complète, le liquide s'écoule rapidement et parfaitement limpide ; enfin on met aussi sur le filtre la plus grande partie du coagulum. Lorsque tout le liquide s'est écoulé, avec la fiole à jet contenant de Teau bouillante on pousse Talbumine vers la pointe du filtre, ce que l'on peut faire avec facilité. Maintenant on lave le gobelet de verre avec de Teau bouillante ; avec une plume on détache les dernières particules d'albumines, et l'on finit par rassembler ainsi tout le coagulum sur le filtre, qu'on lave encore avec de l'eau bouillante, jusqu'à ce que quelques gouttes du liquide filtré ne réagissent plus sur l'argent ou bien ne laissent plus de résidu, lorsqu'on les évapore sur une lame de platine. Si l'on exécute les opérations dans l'ordre qui vient d'être indiqué, la filtration, qui sans cela serait souvent trèslente, se fait d'une manière extrêmement rapide et facile»

Maintenant on enlève avec précaution le filtre de l'entonnoir, on le place sur l'un des deux verres de montre (fig. 29) et on le dessèche au bain marie à 100°, jusqu'à ce que, après l'avoir laisse refroidir dans l'exsiccateur, il ne perde plus de poids. 11 faut faire cette opération avec beaucoup de soin, parce que l'albumine, notamment si la quantité qui se trouve sur le filtre est trop grande, se prend le plus souvent en une masse cornée et en même temps se recouvre d'une croûte sèche, tandis qu'il y a encore dans l'intérieur de la masse de l'humidité qui ne peut être expulsée que par une longue dessiccation à 100" (six ou huit heures). La dessiccation ne doit, par conséquent, être regardée comme terminée que lorsqu'il y a concordance entre deux pesées dans l'mtervalle desquelles le filtre a été exposé quelque temps à la température indiquée. Après avoir retranché le poids des verres de montre et du fillre de celui obtenu en dernier lieu, on arrive à connaître combien il y avait d'albumine dans la quantité d'urine essayée, et on peut alors calculer la proportion de cette substance pour le volume total de l'uriiie.

Le dosage de Talbumine exécuté de cette manière est sujet à deux sortes d'erreur : en premier lieu, l'albumine, en se coagulant, entraine avec elle un peu de matière colorante qui ne peut pas être éliminée, même par un long lavage à l'eau bouillante. C'est ce qui fait que Talbumine desséchée est généralement jaune et même brune. Cette source d'erreur est cependant très-peu importante, et on peut, sans crainte, ne pas la prendre en considération. Souvent aussi des phosphates terreux se séparent en même temps que l'albumine, et ces substances ont naturellement pour conséquence d'augmenter la quantité réelle de l'albumine. C'est pourquoi, lorsqu'il s'agit de déterminations tout à fait précises, il faut brûler avec le filtre, dans un creuset de platine dont on connaît le poids, l'albumine desséchée et pesée, puis chauffer au rouge jusqu'à ce que tout le charbon soit détruit, ce qu'il est facile de faire en peu de temps en tenant le creuset incliné. L'augmentation de poids du creuset, moins le poids de la cendre du filtre que l'on connaît, donne la richesse de l'albumine pesée en substances minérales, richesse qui doit être retranchée de la quantité d'albumine trouvée en premier lieu. — Dans la plupart des cas, il n'est pas nécessaire d'avoir recours à cette modification du procédé ; je me suis souvent assuré que la quantité de l'albumine coagulée dans une urine acide suffisamment étendue est extrêmement petite et que, par conséquent, elle n'exercée qu'une faible influence sur le résultat.

20 c. c. d'une urine très-riche en albumine furent étendus avec 80 c. c. d*eau, puis coagulés au baîn-marie dans un gobelet de verre; le coagulum fut rassemblé sur un filtre à plis» lavé avec soin et desséché à lOO"", jusqu'à ce que son poids restât invariable.

L*albumine pesait 0'',5573, ce qui représentait pour Turine émise en vingtquatre heures (1050 ce.) 18,76 grammes d*albumine. Après la combustion et la soustraction de la cendre du filtre il resta 0'%0013 pour la cendre de Talbumine. Déduction fnite de cette dernière quantité, il resta, pour la proportion d'albumine éliminée en vingt-quatre heures IS^'yGO au lieu des 18'',76 trouvés en premier lieu.

2. Le procédé qui vient d'être décrit est généralement bon, mais il exige, pour donner des résultats exacts, des conditions qui ne peuvent pas toujours être réalisées. Le plus souvent le lavage est difficile, très-lent, incomplet, et le précipité sec ne correspond pas toujours avec une exactitude suffisante à la quantité réelle d'àlbu-

ut DES UM!(ES.

mine. — Ce sont ces considérations qui ont déterminé M, Méhu ^ à rechercher un autre agent pour la précipitation de Talbumine, et, après de nombreux essais pratiqués sur des poids connus d'albumine de Tœuf ou du sérum, il s'est convaincu que Ton pouvait doser très-rapidement Talbumine au moyen de la liqueur suivante :

Acide phéniqoe i partie.

Acide acétique du commerce I partie.

Alcool à 86* 2 parties.

On prend iOO grammes de Turine à essayer, on y ajoute successivement 2 c. c. d'acide azotique ordinaire et 10 c. c. de la solution phonique précédente ; on agite bien la liqueur après chaque addition et Ton jette le précipité sur un petit filtre de papier blanc bien sec et pesé à l'avance. Le liquide s'écoule rapidement; quand il s'est écoulé tout entier, on lave avec de l'eau contenant 1/2 p. 100 d'acide phénique, enfin avec de l'eau légèrement alcoolisée. On dessèche le filtre à i 10*, et, comme le résidu sec est trèshygrométrique, on le pèse entre les deux verres de montre (fig. 29) après l'avoir laissé refroidir dans l'essiccateur (fig. 15). En retranchant du poids de ce filtre le poids du filtre vide et sec, on aura le poids de l'albumine. — En opérant exactement comme il vient d'être dit, la filtration est si rapide que c'est à peine s'il se précipite quelque traces d'acide urique : on retrouve celui-ci dans les eaux de lavage où il cristallise.

Si l*on prend une solution filtrée de blanc d*œuf donnant 1 gramme de résidu desséché à 110*, et que Ton ajoute cette dose à 100 grammes d*urine non albumineure et bien limpide, on obtient par la méthode précédente 0^,9^ à C*%07, en moyenne 0^,95. Avec le sérum du sang, avec les liquides albumineux pathologiques des diverses cavités séreuses de l'économie, on obtient des chiffres qui varient dans les mêmes limites. 11 faut opérer avec beaucoup de soin pour avoir des résultats exacts, à cause surtout de la dessiccation et de rhygrométricité du précipité. Si le liquide qui s'écoule du filtre est trouble, il ne faut pas conclure que Talbumine soit entraînée, car, en ajoutant un peu d'eau, surtout de Teau alcoolisée, on rend à ce liquide toute sa transparence, parce que Ton redissout l'acide phénique. Dans tous les cas, les eaux de lavage ne doivent plus être réellement précipitables par la solution phénique, sans quoi on n'aurait employé qu'une quantité insufGsante de réactif, ce qui est fort rare. L'addition à Turine de 60 grammes par litre de sucre de diabète, de sulfate de magnésie, d^iodure de poUissium, d'azotate de potasse, de chlorufe de sodium» ne change

* Journal de Pharm. et de Cfiimie, février 18C9, p. 99.

DÉTERMINATION DE CHAQUE CORPS. m

rien aux résultats. Le carbonate d'ammoniaque n'empêche pas non plus la pré> cipiiation, mais le précipité a tout Taspect de la crème du lait^] «L. G.

B. Par la polarisation circulaire.

Si la richesse de l'urine en albumine n'est pas trop faible, si le liquide lui-même n'a pas une couleur trop foncée et s'il peut être complètement clarifié par filtration, le dosage de l'albumine réussit également avec le polarimètre de Soleil et Venlzke. Dans ce but, on procède exactement comme il est indiqué (g 66, 2) au sujet du dosage du sucre. Si la couleur et la transparence de l'urine permettent Temploi d'un tube de 200 millimètres de long, on remplit avec soin un tube ayant cette dimension ; on le place dans l'appareil, et, en tournant le compensateur, on fait en sorte que les deux moitiés delà double plaque aient une coloration exactement semblable. Le point o du vernier se trouve maintenant sur le côté gauche du zéro de l'échelle, et avec un lube de 200 millimètres de long, chaque division correspond à i gramme d'albumine par 100 c. c. d'urine. Mais si l'on s'est servi d'un tube n'ayant que 100 millimètres de long, il faut, pour trouver la proportion d'albumine contenue dans 100 c. c. d'urine, multiplier par 2 les degrés lus sur l'échelle et le vernier. Si l'urine ne peut pas être obtenue suffisamment claire par filtration, il est souvent possible de détruire le trouble avec une goutte d'acide acétique, ou avec quelques gouttes de carbonate de soude, ou bien d'un lait de chaux, et cela sans que le pouvoir rotatoire de l'albumine soit modifié. Alors, après la filtration, l'urine est généralement suffisamment claire pour être examinée au polarimètre, mais quelquefois aussi on ne réussit pas à la clarifier. (Hôppe-Seyier .)